牛奶过敏是婴幼儿最常见食物过敏反应之一，在欧美发达国家，婴儿牛奶过敏发生率约为2%～7.5%[1]。牛奶过敏是由乳及乳制品中的过敏原蛋白引起的一种变态反应，目前普遍认为酪蛋白和β-乳球蛋白是主要的过敏原。αs1-酪蛋白是酪蛋白中最主要的一个过敏原，凡是对酪蛋白过敏的人，基本上都对αs1-酪蛋白过敏[2]。

蛋白质引发食物过敏反应的免疫学物质基础就是过敏原表位，即过敏原中参与结合抗体的组成部分。不同类型的表位在食物过敏中存在着差异，是导致食物过敏复杂性的关键物质基础之一。从免疫学机制来看，食物过敏可分为IgE介导和非IgE介导两大类，大多数婴幼儿的牛乳过敏反应都属于IgG介导，IgG介导的牛乳过敏反应机制目前尚不清楚[3]。本研究通过固相合成法合成αs1-酪蛋白作用表位，识别IgG作用表位，揭示IgG介导牛奶过敏的机制。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

αs1-酪蛋白多肽（实验室合成）；链霉亲和素（Streptαvidin，SΑ）；HRP标记的兔抗人IgG（二抗），四甲基联苯胺（TMB），96孔聚苯乙烯酶标板，均购自Sigmα公司。

1.2 仪器与设备

BIO-RΑD550型酶标仪（美国BIO-RΑD公司）；PSH500Α生化培养箱（中国重庆银河实验仪器有限公司）；F-32酸度剂（日本崛厂制作公司）；Th-80D-2B型冻干机（北京天地精仪科技有限公司）；高效液相Vydαc C-18218TP柱（美国VYDΑC公司）。

1.3 方法

1.3.1 多肽的合成[4]

采用Fmoc固相肽合成法，将C-末端氨基酸连接到一种合适的固相载体上，采用常规Fmoc法进行逐步缩合。合成结束后，用强酸将序列从固相载体上切割下来，经HPLC纯化，冷冻干燥后备用。

1.3.2 合成肽的纯化和鉴定

合成肽纯度的鉴定用高效液相色谱（RP-HPLC）和质谱进行分析。……