曹弟勇,周燕知,吴丹阳,郑 倩

(1.川北医学院机能实验中心;2.川北医学院 2007级护理学院;3.川北医学院 2007级临床学院,四川 南充 637000)

缺氧实验是机能实验学中一个重要的基础性实验,缺氧瓶是该实验中关键仪器。传统缺氧瓶将钠石灰放入瓶底(如图 1),与实验动物直接接触,易受动物分泌物污染,每使用一次就需重新更换,这不仅造成了实验药品浪费,也加大了实验准备人员的工作负担。为此,本小组对缺氧瓶进行了改良,将钠石灰分别置于广口瓶上部和中部,并用改良后的缺氧瓶与传统型缺氧瓶进行缺氧实验,对实验结果进行了对比研究。

1 材料和方法

1.1 实验动物:30只健康小白鼠由川北医学院动物实验中心提供,雌雄不限,体重 25g±0.5g。

1.2 药品:钠石灰(H3Ca2NaO4)购自上海顺强生物科技有限公司。

1.3 改良型缺氧瓶的制作:将细金属滤网固定于广口瓶的上部,钠石灰置于滤网中,即得到改良 A型缺氧瓶(如图 2);将钠石灰密封包裹于干燥纱布内,用细线将包裹悬吊于广口瓶中部,即得到改良 B型缺氧瓶(如图 3)。

1.4 小鼠存活时间的测定:30只小白鼠随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,每组 10。三种类型缺氧瓶编号为 1-10号。Ⅰ组小白鼠分别放入 1-10号传统型缺氧瓶,Ⅱ组小白鼠分别放入 1-10号改良 A型缺氧瓶,Ⅲ组小白鼠分别放入 1-10号改良 B型缺氧瓶中,同时塞紧瓶塞,用秒表分别记录每组中各小白鼠存活时间,即从塞紧瓶塞到小白鼠死亡的时间。

1.5 数据处理及统计方法:数据处理采用 EXCEL2003统计软件,小鼠平均存活时间的比较采用方差分析。

表1 各组小白鼠存活时间(分钟)

2 结 果

传统型缺氧瓶中小白鼠平均存活时间与改良 A型和 B型缺氧瓶无显著差异(p＞0.05),改良 A型缺氧瓶小鼠平均存活时间与改良 B型缺氧瓶无显著差异(p＞0.05),见表 1。

3 讨 论

氧是维持生命活动所必需的物质,缺氧是存在于多种疾病中的基本病理过程之一,也是造成细胞损伤的重要原因,严重缺氧状态下,机体可以在数分钟内死亡[1-4]。

缺氧实验的开设,在于帮助我们正确理解缺氧对机体的危害以及氧疗在疾病治疗中的重要意义[5]。缺氧瓶是缺氧实验的关键仪器,动物在缺氧下的存活时间是实验观察的重要指标。为了消除二氧化碳吸入对动物存活时间的影响,需在瓶中加入钠石灰以吸收呼出气中二氧化碳。传统缺氧瓶将钠石灰置于瓶底与动物直接接触,这样就存在两个问题:一是易受动物分泌物污染,影响二氧化碳的吸收效果;二是部分动物舔食钠石灰,易致气道阻塞。这两个因素都可能导致或者加速动物的死亡,使小鼠在缺氧下存活的时间出现较大偏差。另外,每用完一次就需废弃更换新的钠石灰,这不仅造成了药品的较多浪费,而且增加了实验准备的工作量。

为了解决传统缺氧瓶存在的弊病,降低仪器因素对实验结果的影响,本小组对传统缺氧瓶进行了改良,将钠石灰置于缺氧瓶上部(改良 A型)或中部(改良 B型),并用传统型缺氧瓶和改良型缺氧瓶同时进行缺氧实验,对实验结果进行对比研究,结果显示,改良型缺氧瓶内小鼠平均存活时间与传统型缺氧瓶无显著差异(p＞0.05),改良 A型缺氧瓶内小鼠平均存活时间与改良 B型缺氧瓶无显著差异(p＞0.05)。标准差是反映所有观察值与均数的平均离散程度的指标,其值越大,数据的离散程度就大[6]。本研究结果数据显示,改良型缺氧瓶与传统型缺氧瓶小鼠存活时间的标准差有明显不同,前者较小(A型为 1.65,B型为 3.13),后者较大(为8.83),这说明改良型缺氧瓶对实验结果的影响小,小鼠存活时间集中度好,实验数据稳定,而传统型缺氧瓶相对较差。

综上结果,改良后的缺氧瓶将钠石灰与小鼠隔离,很好的解决了传统型缺氧瓶实验中存在的两大主要问题,能有效地消除实验的误差,数据稳定性好,而且不受动物分泌物的影响,勿需用一次换一次,在一定程度上减少了药品的浪费和实验准备的工作量。另外,改良型缺氧瓶仅将钠石灰放置的位置加以变更,无需增加过多的实验经费投入即可制作完成,在实验中有重要的推广价值。

[1] 王 晶,冯秀娟,张燕荣,等.急性缺氧对小鼠丘脑肥大细胞的影响[J].农业科学研究,2008,29(4):55-58

[2] 刘淑英,梁西西,于洪川,等.小鼠急性缺氧后颈部淋巴结内肥大细胞的变化[J].宁夏大学学报(自然科学版),2009,30(1):69-71,80

[3] 于洪川,魏智清,张振汉,等.小鼠急性缺氧后肺内肥大细胞的变化[J].宁夏大学学报(自然科学版),2007,28(3):499-251

[4] 金惠铭,王建枝.病理生理学[M].第 6版,北京:人民卫生出版社,2006.76-87

[5] 郑 倩.医学机能实验学[M].北京:科学出版社,2009.112-115

[6] 颜 虹.医学统计学[M].北京:人民卫生出版社,2005.40-41