韩德兰 刘丽 赵芝 刘楠

梗阻性黄疸(obstructive jaundice，OJ)是多种肝胆疾病的共同病理过程，具有病死率高、并发症多的临床特点。目前普遍认为与内毒素有关，而肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在内毒素血症中起关键作用[1]。本研究通过对 OJ大鼠肝脏形态学改变、肝功能指标及内毒素、TNF-α在血液中浓度的测定来观察 OJ大鼠肝脏的变化并探讨肝损伤与TNF-α的关系。

1 材料与方法

1.1 实验动物 按照GB14922-94《实验动物微生物和寄生虫检测等级》的标准，选用同一实验室清洁级成年健康雄性Sprague-Daw ley大鼠 36只(河北医科大学动物实验中心提供)，体重(250±25)g。随机分为假手术组 6只，OJ大鼠模型组(CBDL组)30只。

1.2 方法

1.2.1 实验动物模型的建立:对大鼠采用胆总管结扎的方法建立 OJ大鼠模型(CBDL组)。具体操作方法如下:采用 10%水合氯醛按 3mg/kg腹腔注射麻醉大鼠。在无菌条件下行腹腔正中线切口，切口长约 2 cm，至剑突下，暴露十二指肠上段胆总管。与近肝门处分离肝门静脉与胆总管，剥离胆总管周围组织。用 3/0号丝线双重结扎胆总管，与两道结扎线之间切断胆总管，分层关腹。假手术组动物游离胆总管步骤与前相同，但只置线不结扎。整个操作均在无菌条件下进行，然后饲以正常饮水及复合饲料喂养。CBDL组分别于结扎后 1、2、3、4、5周麻醉动物取材，假手术组与 5周CBDL组同批麻醉取材。

1.2.2 检查内容:以 10%水合氯醛(3ml/kg)腹腔内注射麻醉大鼠，切开皮肤暴露腹腔，心脏取血，留取血液。血标本静置1 h后，以 3000 r/m in低温离心 15min，取血清 -20℃冻存，用于TNF-α、内毒素、肝功能检测。留取肝组织，采用 HE染色确定模型建立情况，Masson三色染色观察肝硬化形成情况。……