戴军 陈兴年 刘杰

三氯乙烯中毒患者免疫球蛋白及T细胞亚群的临床分析

戴军 陈兴年 刘杰

目的了解免疫球蛋白和T细胞免疫在三氯乙烯中毒发病中的作用，探讨三氯乙烯中毒发生的免疫学机制。方法用免疫球蛋白测定试剂盒和流式细胞仪技术分别对病例组与对照组的免疫球蛋白(IgA、IgG和IgM)、T细胞亚群表面标志CD3、CD4和CD8的表达情况进行分析。结果三氯乙烯中毒患者免疫球蛋白IgM明显降低(P＜0.01)，CD4和CD8比例明显升高(P＜0.01)。结论三氯乙烯中毒患者体内存在免疫功能失调，观察免疫球蛋白IgM和T细胞亚群变化有助于判断病情程度和指导治疗。

三氯乙烯中毒；免疫球蛋白；T细胞亚群

三氯乙烯(trichloroethylene,TCE)为无色易挥发的液体,在工业生产中常用作脱脂去污剂、萃取剂、有机溶剂,广泛应用于金属部件及电子元件去油污、纺织物的干洗、有机合成等。职业接触三氯乙烯部分人可引起药疹样皮炎，伴心、肝、肾等多脏器功能损害,病情凶险,病死率高[1]。我国三氯乙烯中毒病例数量大，起病急，易误诊,后果严重,发病机制尚未完全清楚，危害极大,已成为职业危害的新问题。根据动物实验结果及TCE中毒的临床特点,有报道认为TCE中毒与免疫损害密切相关[2-3]，但目前关于TCE中毒与免疫损害的报道很少。本文对10例TCE中毒患者免疫球蛋白和T细胞亚群进行了测定和分析，现将结果报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象

TCE中毒组10例，均为住院病人，其中男6例，女4例，年龄18～32岁，平均(24.1±4.7)岁，接触TCE工龄0.5～5个月。10例患者的诊断均参照《职业性急性三氯乙烯中毒诊断标准》(GBZ38-2002)确诊。健康对照组为不接触TCE及其他毒物的健康体检者，其中男性6例，女性4例，年龄18～31岁，平均(24.7±4.9)岁，与TCE中毒组年龄差异无统计学意义。

1.2 标本处理

免疫球蛋白分析分别抽取TCE中毒组和健康对照组静脉血各5ml,静置24h后收集血清，-20℃保存。流式细胞仪分析应用静脉采集外周血(肝素抗凝)2ml，分离淋巴细胞，调细胞浓度为5×105～1×106个/mL。

1.3 测定方法

采用免疫比浊法测定IgA、IgG和IgM；用流式细胞术测定CD3、CD4、CD8及CD4/CD8。

1.4 统计学处理

2 结果

2.1 TCE中毒组和健康对照组血清免疫球蛋白的比较

由表1可见，TCE中毒组和健康对照组IgA和IgG水平无明显改变，但TCE中毒组血清免疫球蛋白IgM水平明显低于健康对照组，差异均具有统计学意义(P＜0.01)。

2.2 TCE中毒组和健康对照组T细胞亚群的比较

由表2可见，与健康对照组相比，TCE中毒组T淋巴细胞亚群CD4+和CD8+明显升高(P＜0.01)，而CD3+和CD4+/CD8+虽然有差异，但差异无显著性(P＞0.05)。

表1 TCE中毒组与对照组血清免疫球蛋白检测

表2 TCE中毒组与对照组T细胞亚群检测

3 讨论

变态反应性疾病是一种与多基因相关的疾病,其病因学至今尚不完全清楚。变态反应分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型属于体液免疫型变态反应, Ⅳ型属于细胞免疫型变态反应,也称为迟发型变态反应。许多学者认为TCE中毒中有Ⅳ型变态反应发生，如皮肤的急性损害。研究结果表明，Ⅳ型变态反应性疾病与T淋巴细胞激活、细胞因子分泌、其他因素的共同参与密切相关[4]。本文通过对10例TCE中毒患者免疫球蛋白IgA、IgM和IgG的检测发现，与对照组相比，TCE中毒组的IgM水平明显降低，提示IgM参与了TCE中毒的免疫调节，这可能与IgM的早期免疫性有关。

既往研究表明，免疫调节参与了TCE中毒反应，如Griffin等[5]用TCE饮水给MRL+/+小鼠染毒时发现TCE引起的自身免疫反应与T辅助细胞非特异性活化有关,且长期接触TCE可导致TCE免疫反应的发生。但是这些研究许多都是以小鼠等动物进行研究的，临床资料比较少见。我们对10例TCE中毒患者T淋巴细胞亚群的变化进行了观察，发现TCE中毒T淋巴细胞亚群CD4+和CD8+明显升高，这与Griffin等[5]报道的结果一致,提示TCE可通过激活CD4+细胞的活性增殖，引起TCE接触者细胞功能亢进，不同淋巴细胞亚群的数量和功能异常，可导致机体免疫紊乱产生病理变化。

综上所述，三氯乙烯中毒患者体内存在免疫功能失调，观察免疫球蛋白IgM和T细胞亚群变化有助于判断病情程度和指导治疗。

[1]刘杰,周良瑶,戴军,等.三氯乙烯中毒6例的临床分析[J].职业与健康,2008,24(19):2026-2027.

[2]苏素花,翟日洪,农康,等.3例三氯乙烯中毒患者免疫损害指标的观察[J].广西预防医学,2005,11(4):239-241.

[3]张胜,王玉良.三氯乙烯对接触者免疫球蛋白水平和脂质过氧化作用[J].职业与健康,2009,25(7):673-675.

[4]Sarah J B,Jason C D,Leah J H,et al.Developmental exposure to trichloroethylene promotes CD4+T cell differentiation and hyperactivity in association with oxidative stress and neurobehavioral deficits in MRL+/+mice[J].Toxicology and Applied Pharmacology,2008,231(3):344-353.

[5]Griffin J M,Blossom S J,Jackson S K,et a1.Trichloroethylene accelerates an autoimmune response by Th1 T cell activation in MRL+/+mice[J].Immunopharmacology,2000,46(2):123-137.

Objective To explore the effects of immunoglobulin and T-lymphocyte subsets on trichloroethylene poisoning, and to investigate the immune mechanisms of pathogenesis of trichloroethylene poisoning. Methods The expression of immunoglobulins (IgA, IgG and IgM) and the expression of CD3, CD4 and CD8 on the T cell surface in patients group and control group were detected by immune globins detection kit andfiow cytometry, respectively. Results The level of IgM significantly decreased in patients with trichloroethylene poisoning(P＜0.01), however, the CD4+T cells and CD8+T cells of patients increased dramatically compared with that of control group(P＜0.01). Conclusion The immune in patients with trichloroethylene poisoning become dysfunction, and the detection of IgM and T-lymphocyte subsets may help to the diagnosis and therapy of trichloroethylene poisoning.

trichloroethylene poisoning; immunoglobulin; T-lymphocyte subsets

10.3969/j.issn.1009-4393.2010.12.026

215007 江苏省苏州市第五人民医院 (戴军 陈兴年 刘杰)