梁 鑫,漆 著,单旭东,黄明孔,余 颜

(成都中医药大学附属第二医院生殖医学中心 610041)

睾丸活组织直接镜检法诊断无精子症患者的临床意义

梁 鑫,漆 著,单旭东,黄明孔,余 颜

(成都中医药大学附属第二医院生殖医学中心 610041)

目的探讨睾丸活组织直接镜检法诊断无精子症患者临床意义。方法对47例无精子症患者进行睾丸活组织检查,同一部位取睾丸组织两份,一份做常规病理组织学检查,另一份将组织撕碎后,立刻在倒置显微镜下检查有无精子及活动精子,然后对两种方法所得结果进行比较。结果47例中,病理组织学检查可见精子生成16例(34.0%),组织撕碎后直接镜检发现精子30例(63.8%)。后者精子检出率明显高于前者。结论与常规病理组织学检查方法相比,直接镜检法能更好地反映睾丸内有无精子或活动精子,且简单易行。在进行病理学检查的同时取睾丸组织直接镜检,可为准备进行卵胞浆内精子注射(ICSI)治疗的患者提供更为确切的依据。

睾丸活检;直接镜检;无精子症

当前,无精子症患者的诊治依然比较困难,如何进行科学的估计、摸索一种行之有效的方法指导患者进一步检查治疗是摆在广大男科医生面前的一个难题。本研究主要目的是寻求一种合理的临床诊断方法来指导患者的进一步治疗。作者在经过伦理委员会同意及患者的知情同意后,对无精子症患者进行睾丸活检,以探讨直接镜检法诊断无精子症患者临床意义。

1 临床资料

1.1 一般资料 无精子症患者47例,年龄21～42岁,平均31.4岁,全部由本院男科医生进行体检。纳入标准:一侧睾丸体积大于或等于8 mL,外周血染色体检测正常,2次以上射出精液经离心后检查均未发现精子者。

1.2 方法 用微创手术方法在一侧同一部位取睾丸组织两份,一份做病理检查,另一份立即镜检,如果发现有活动精子,则不再提取另一侧睾丸组织。如果一侧直接镜检未发现活动精子,则同法取另一侧睾丸组织检查。常规病理检查的睾丸组织取出后立即置Bouin′s液中固定,送病理科,石蜡包埋组织切片,常规HE染色,镜下观察。直接镜检法由本院生殖中心实验室检测,将取出的睾丸组织立即放在 HEPES缓冲的HTF培养液中洗去血细胞后,将组织置于培养皿中,加少量培养液,用折弯的1 mL空针针头先将组织割成数段,然后再进行挤压磨碎,最后在倒置显微镜(×200)下检查有无精子及活动精子。两种检查先互盲,待出具正式报告后汇总比较。

2 结 果

47例经两种方法检测所得结果见表1。直接镜检法的精子检出率(63.8%)高于病理检查法,差异有统计学意义(χ2=8.344,P=0.004)。

表1 47例两种方法检测结果比较[n(%)]

3 讨 论

我国男性不育的致病原因较多,其中很大一部分是无精子症所致[1]。尽管超声检查可作为一种无创伤性的诊断睾丸疾病的方法[2],但是睾丸活检仍是无精子症病因诊断的主要方法之一。睾丸活检虽为创伤性检查,但能客观地反映睾丸的生精状况,对男性不育的临床诊断、病因分析及治疗措施的选定具有重要的临床价值[3-4]。有研究表明,无精子症患者血清FSH、LH、T和抑制素B水平及睾丸大小并不能完全预测能否从睾丸获得精子[5]。卵胞浆内单精子显微注射术(ICSI)前进行睾丸活组织检查,查出是否有精子或活动精子对于无精子症的治疗很有必要,防止在辅助生殖技术(ART)治疗中男方因取精失败而造成不育,增加夫妇经济上的损失和精神上的压力[6]。

自从1992年ICSI开展以来,睾丸活检已从一种诊断方法变成了治疗手段[7]。本研究结果显示,直接镜检法可见精子的患者,病理检查中也发现精子,但在病理检查中未发现精子的一部分患者中,直接镜检时却可见精子。病理组织学检查诊断有精子生成者为34.0%,无精子者为66.0%,而直接镜检法分别为63.8%和36.2%,说明直接镜检法在反映睾丸内有无精子方面更为准确,可以防止因病理检查漏诊的患者失去获得血亲后代的机会。二者差异可能与切片数量不够、被观察组织的大小及范围等有关。

在用手术方法取得睾丸组织行病理学检查的同时,做一次直接镜检,是十分有意义的,一则可以及时了解睾丸内有无精子或活动精子,二则可为以后是否可做ICSI提供重要信息。此外,若只在病理检查中见到了精子,而未必一定有活动精子,需要谨慎施行ICSI治疗。作者就见到只在病理检查显示有精子而进行ICSI的患者中,有2例未能找到足够的活动精子行ICSI,经低渗膨胀试验(HOS)[8],确认不活动精子中有存活精子后行ICSI,其受精率相当低。因此作者认为,直接镜检法具有简便、快速、结果准确率高、可确认活动精子等优点。

一次睾丸活检后对术侧睾丸局部所带来的影响需经6个月方能消除。若左右两侧睾丸同时活检,手术取精行ICSI与前次睾丸活检的时间间隔较短,可能对获得足够数量成熟的活动精子带来困难。因此,作者的改良做法是,如果直接镜检法检查到一侧睾丸组织有活动精子,则不取另一侧睾丸组织,这样可保护患者另一侧睾丸免受损伤,给ICSI时手术取精创造较好的条件。同时,有报道称,用新鲜和冷冻的睾丸精子和附睾精子进行ICSI的妊娠结局差异无统计学意义[9]。故此,为防止睾丸活检后ICSI取精失败,造成患者精神上的痛苦和经济上的压力,也为防止反复手术取精给睾丸带来不必要的损伤,还可将睾丸活检结果为有活动精子患者的睾丸组织或精子冻存,作为备用。

[1] 汤召兵,陈在贤.78例男性原发不育的染色体分析[J].重庆医学,2004,33(10):1557.

[2] 于洁.彩超在睾丸疾病诊断与鉴别诊断中的应用价值[J].重庆医学,2006,35(9):863.

[3] 佟树文,宋旭东,唐文君,等.男性不育睾丸活检的临床病理分析[J].中国综合临床,2006,22(5):456.

[4] 陈怀波.无精子症患者睾丸活检的临床意义——附 70例报道[J].中国男科学杂志,1998,12(4):236.

[5] Hauser R,Botchan A,Yogev L,et al.Probability of sperm detection in nonobstructive azoospermic men undergoing testicular sperm extraction procedures unrelated to clinical parameters[J].Arch Androl,2002,48:301.

[6] Seo JT,Ko WJ.Predictive factors of successful testicular sperm recovery in nonobstructive azoospermia atients[J].Int J Androl,2001,24:306.

[7] 赵紫东,薛生娟,王宏,等.睾丸活组织玻璃压片镜检对无精子症的诊断价值[J].中国男科学杂志,2007,21(2):48.

[8] 世界卫生组织.人类精液及精子——宫颈黏液相互作用实验室检验手册[M].4版.北京:人民卫生出版社,2001:24.

[9] 欧建平,李阳,庄广伦.无精症睾丸活检病理学特点及对男性不育诊治的指导意义[J].中华泌尿外科杂志,2004,25(5):354.

R698.2;R361.2

B

1671-8348(2010)09-1118-02

2009-09-09

2009-10-19)

◦经验交流◦