洁尔阴软膏镇痛试验研究

2010-01-10刘碧崇孙艳霞杨磊林

成都大学学报（自然科学版） 2010年3期

刘碧崇,姚倩,孙艳霞,杨磊林

(1.成都大学生物产业学院,四川成都 610106;2.四川恩威中医药研究开发有限公司,四川成都 610041)

0 引言

洁尔阴软膏为四川恩威中医药研究开发有限公司研究开发的由蛇床子、艾叶、独活、石菖蒲、苍术、薄荷、黄柏、黄芩、苦参、地肤子、茵陈、土荆皮、栀子、金银花等组成的中药复方制剂.临床上拟用于治疗霉菌性、滴虫性阴道炎等症.本文采用经典的镇痛试验模型——小鼠醋酸扭体试验与小鼠热板试验,研究洁尔阴软膏是否具有镇痛作用,并与洁尔阴洗液进行比较,拟为洁尔阴软膏申报生产提供理论依据.

1 材料

1.1 药物与试剂

实验所用药物与试剂包括:洁尔阴软膏由四川恩威中医药研究所制剂研究室提供(高剂量组(1 g软膏含生药0.438 g)、批号010604,中剂量组(1 g软膏含生药0.219 g)、批号010603,低剂量组(1 g软膏含生药0.110 g)、批号010605);赋形剂为乳化基质,由四川恩威中医药研究所制剂研究室提供(批号010606);洁尔阴洗液(0.125 g原生药材/mL),由成都恩威制药有限公司提供(批号0106043);冰乙酸,由上海伊嘉利化工试剂有限公司提供(批号20000509);生理盐水,由双流县一医院提供(批号20010403).

1.2 仪器

试验所用仪器包括:Y LS-6A智能热板仪(山东省医学科学院设备站),JD200-3电子天平(沈阳龙腾电子称量仪器有限公司),注射器、烧杯、秒表等.

1.3 试验动物

试验所用动物为:昆明种小鼠,体重18～22 g,雌雄各半,共60只(扭体).昆明种小鼠80只,体重18～22 g,全雌(热板).试验所用动物由四川抗菌素工业研究所提供(质量合格证,川实动管第99-30号).

2 方法

2.1 扭体法

2.1.1 分组.

将60只小鼠按体重(禁食,不禁水12 h)随机分成6组,每组10只,雌雄各半.分为生理盐水组,洁尔阴洗液对照组,洁尔阴软膏高、中、低剂量组,洁尔阴软膏基质组.

2.1.2 给药.

给药前一天,先用剃毛刀在小鼠腹部剃去腹部的毛(避免出现皮肤破损),等脱毛后第二天上药,具体操作步骤如下:

(1)生理盐水组,每只小鼠按0.05 mL涂抹在腹部脱毛区;

(2)洁尔阴洗液对照组,用10%的浓度的洁尔阴洗液,将每只小鼠按0.05 m L均匀涂抹在腹部脱毛区;

(3)洁尔阴软膏高、中、低剂量组,将软膏均匀涂抹在腹部脱毛区,给药量分别为0.120 g原生药/kg、0.060 g原生药/kg、0.030 g原生药/kg;

(4)洁尔阴软膏基质组,给予等量的基质于小鼠腹部脱毛区,连续给药3 d,最后一次给药后30 min各小鼠均于腹腔注射0.6%醋酸0.2 mL/只,并观察10 min内各组出现扭体反应(腹部内凹、伸展后肢、臀部抬高)的小鼠只数,计算各药镇痛百分率及10 min内出现扭体反应的平均时间.镇痛百分率计算公式如下,

2.2 热板法

取健康小鼠置热板仪内,热板温度为55.0± 0.5℃,室温20.0±1℃,以小鼠舔后足为指标.挑选痛阈均值在5～30 s内小鼠60只,随机分为生理盐水组、洁尔阴洗液组、洁尔阴软膏高剂量组、洁尔阴中剂量组、洁尔阴低剂量组、基质组共6组.给药前一日将小鼠腹部剃毛,去毛面积约2×2 cm2.每日给脱毛区域涂药一次,连续3 d,给药剂量见表3.生理盐水组按0.05 mL/只涂抹,基质组给予等量的基质涂抹于腹部,末次给药后15 min、30 min、60 min、90 min分别测其痛阈值的变化.

2.3 统计分析

试验数据采用SPSS 11.0进行统计分析.

3 试验结果及讨论

3.1 洁尔阴软膏对醋酸所致小鼠腹腔疼痛的镇痛作用(扭体法)

洁尔阴软膏对醋酸所致小鼠腹腔疼痛的镇痛作用(扭体法)结果见表1、表2.

表1 洁尔阴软膏对醋酸所致小鼠腹腔疼痛的镇痛作用

表2 洁尔阴软膏对醋酸所致小鼠腹腔疼痛的镇痛

注:＊表示给药组与生理盐水组比较P＜0.05.

组别剂量/(g原生药/kg) 动物数/只出现扭体反应的时间/s生理盐水组 — 10 332.4±27.6洁尔阴洗液对照组 0.031 10 520.1±101.3＊洁尔阴软膏高剂量组 0.120 10 537.3±91.9＊洁尔阴软膏中剂量组 0.060 10 519.9±101.5＊洁尔阴软膏低剂量组 0.030 10 496.0±115.7＊洁尔阴软膏基质组 — 10 338.5±28.0

表1、表2数据表明:洁尔阴洗液(0.031 g原生药/kg)与洁尔阴软膏(0.030 g原生药/kg、0.060 g原生药/kg、0.120 g原生药/kg)相比均能有效地抑制醋酸对小鼠腹腔的致痛作用,与生理盐水组比较有显著差异(P＜0.05);而洁尔阴洗液与洁尔阴软膏以及各剂量之间均无显著差异(P＞0.05);基质组与生理盐水组比较,亦无显著差异(P＞0.05).说明洁尔阴软膏具有抑制醋酸引起的扭体作用.

3.2 洁尔阴软膏对小鼠热板法痛阈值的影响

洁尔阴软膏对小鼠热板法痛阈值的影响结果见表3.

表3 洁尔阴软膏对小鼠热板法痛阈值的影响

注:＊表示与生理盐水组比较,P＜0.05.

组别剂量/(g原生药/kg) 动物数/只药前痛阈/s给药后不同时间痛阈/s 15 min 30 min 60 min 90 min生理盐水对照组 — 10 17.20±3.16 17.65±5.38 16.75±6.67 17.30±4.91 19.05±7.77洁尔阴洗液组 0.031 10 18.85±4.14 24.60±9.90＊ 32.50±16.87＊ 38.00±21.96＊ 45.3±17.17＊洁尔阴软膏高剂量组 0.120 10 24.50±6.33 32.8±14.39＊ 38.00±21.96＊ 33.4±15.99＊ 34.75±16.31＊洁尔阴软膏中剂量组 0.060 10 16.80±4.59 24.60±7.90＊ 28.15±6.78＊ 29.40±5.17＊ 32.35±9.80＊洁尔阴软膏低剂量组 0.030 10 16.40±5.10 18.80±8.62 19.60±11.76 29.25±6.11＊ 31.85±7.39＊洁尔阴软膏基质组 — 10 18.40±3.68 17.40±4.14 18.25±4.42 17.05±5.44 19.50±6.05

由表3可见,洁尔阴洗液(0.031 g原生药/kg)、洁尔阴软膏(0.060 g原生药/kg、0.120 g原生药/kg)组与生理盐水组比较在15 min、30 min、60 min、90 min都表现出显著性差异 (P＜0.05),洁尔阴软膏低剂量(0.030 g原生药/kg)组与生理盐水组比较在60 min、90 min有显著性差异(P＜0.05),基质组与生理盐水组比较,无显著差异(P＞0.05),洁尔阴洗液与洁尔阴软膏各组相比无显著差异(P＞0.05).