吴国智 郝砚英 王 勇 杨 元

摘要:利用花叶玉簪的侧芽为外植体,研究了其工厂化组培育苗技术。结果表明:芽诱导较理想的培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L作为继代培养基效果最好,可以保持原来的花叶特征;以MS+NAA 0.2 mg/L作为花叶玉簪的生根培养基,生根数较多;以蛭石∶珍珠岩=5∶1配比的成活率为最高,生长势也较强。

关键词:花叶玉簪;组织培养;育苗技术

中图分类号:S682.1+9文献标识码:A DOI编码:10.3969/j.issn.1006-6500.2009.05.024

Study on Industrialized Seedling Technique of Tissue Culture in Hosta plantagineu

WU Guo-zhi,HAO Yan-ying,WANG Yong,YANG Yuan

(Tianjin Flower Garden,Tianjin 300112,China)

Abstract:Rapid seedling technique via tissue culture in Hosta plantagineu was studied by lateral bud as explant in the paper. The results showed that the appropriate medium for bud induction was MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L; the best medium for successive transfer culture was MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L, it could keep the primary character of flower and leaf; the root number was more in the rooting medium with MS+NAA 0.2 mg/L; the survival rate was high and the growth vigor was strong in the combination of vermiculite and pearl rock =5∶1 .

Key words:Hosta plantagineu;tissue culture;seedling technique

花叶玉簪(Hosta plantagineu)为多年生宿根花卉,是百合科著名观叶植物玉簪的变种,对喜光花卉有极强的互补性,是园林绿化的优良品种。花叶玉簪的引进与推广,极大地提高了其观赏效果,丰富了天津市园林绿化的景观色彩。该品种株矮喜荫,复色叶面,带褶皱,金边银心相互交织,绚丽多彩的叶片呈现出魔幻般的花团锦簇。在城市高大楼群的背侧、立交桥下、庭院大树遮荫处、树篱边等喜阳花卉生长不利的地方均可种植。装盆后,可登堂入室,客厅、书房、大厅、会议室、窗台上均可用它来点缀、装饰,花叶玉簪的花还可散发出淡淡幽香,高雅不凡。

花叶玉簪常规的繁殖方法主要是通过分株,增殖率低,仅为3～5倍左右,短期内要形成大规模的生产困难较大,如果引进种苗,价格又很高。采用组织培养的繁殖方法,可以很好地解决上述难题[1],但通过花蕾诱导愈伤组织后形成的芽有变异现象发生,有些失去了原来的花叶特征,而由侧芽直接诱导产生的不定芽性状稳定,基本没有发现变异,保留着原来的花叶特征,在短期内获得了数以万计的组培苗,为花叶玉簪的大面积推广打下了坚实的基础。本试验利用花叶玉簪的芽为外植体,研究了工厂化组培育苗技术,提高了花叶玉簪的繁殖系数。

1材料和方法

1.1材料

1.1.1品种法兰西、甜心、金冠。

1.1.2外植体选取花叶玉簪未出土的侧芽和和花蕾作为外植体。

1.2方法

1.2.1无菌材料的获得将侧芽的外层皮及花蕾的外苞叶剥掉,自来水冲洗10 min后,放入漂白粉消毒液处理30 min,取出置入0.1%升汞溶液消毒10 min,无菌水洗3次,切取芽长0.8～1 cm,花蕾纵切成4块,分别接种在不同激素水平的芽和愈伤组织诱导培养基上。

1.2.2培养基和培养条件芽和愈伤组织诱导、继代培养和生根培养均以MS为基本培养基,附加不同浓度的细胞分裂素和生长素。蔗糖30 g/L,琼脂5 g/L,培养温度为25 ℃左右。外植体接种后,先进行暗培养30 d,诱导出愈伤组织和分化出不定芽后,再转到光照培养,光照强度为1 000～1 500 lx,光照时间12 h/d。

1.2.3炼苗基质的选择蛭石+珍珠岩的3种比例为5∶1,3∶1,1∶1。草炭土+珍珠岩的 3种比例为8∶1,5∶1,2∶1。

2结果与分析

2.1不同激素水平对芽和愈伤组织诱导的影响

外植体接种在诱导培养基上,经过30 d的暗培养后,芽基部不断分化出不定芽,花蕾则形成小突起状的愈伤组织。继续进行光照培养15 d,不定芽由白色变为绿色,花蕾形成的愈伤组织也逐渐不断分化出丛生芽。不同激素水平对芽和愈伤组织的诱导结果见表1。

从表1可看出,芽诱导的较理想培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;花蕾诱导愈伤组织的培养基则以MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L为最好。

2.2继代培养阶段,不同激素水平对芽分化数量、质量的影响

外植体通过不定芽诱导,产生了大量不定芽,但不定芽的数量多少又直接影响到芽的质量。如果芽分化过旺,不定芽纤细,无效芽增加,影响到下一步的生根培养;而芽分化过少,芽虽生长健壮,但达不到组培扩繁基数的需要。通过继代培养基的筛选试验,找到了芽分化的最佳培养基,结果见表2。从表2得知,处理3(MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L)作为继代培养基,效果最好,不但其分化的芽较多,而且质量高,健壮,有效芽比例达100%,完全符合花叶玉簪通过组培方法提高的繁殖系数,实现工厂化育苗的需要。

2.3不同生长素组合对生根的影响

切取继代瓶内的健壮芽,接种于含有不同浓度生长素的培养基上,培养25 d,统计生根数量和生根率,结果见表3。

由表3 可见,以MS+NAA 0.2 mg/L作为花叶玉簪的生根培养基,效果最好,根数较多,生根率达89%。

2.4不同基质配比对花叶玉簪移栽成活率及生长势的影响

当生根苗根长0.5～1.5 cm时,取出移栽,30 d后,统计不同基质配比对小苗移栽的成活率及生长势,结果见表4。

从表4可见,花叶玉簪小苗移栽时,蛭石+珍珠岩和草炭土+珍珠岩两种组合的小苗移栽的成活率及生长势相差不大,其中以蛭石+珍珠岩=5∶1配比的成活率为最高,生长势也较强;草炭土+珍珠岩=5∶1配比的移栽成活率也较高,生长势最强。

3讨论

(1)花叶玉簪在遗传、生理、组织学上与常规玉簪品种有一定的差异。控制叶片斑纹性状的基因在激素刺激下容易发生变异而失去花叶特征。因此,在组织培养过程中,取材部位和激素种类、浓度控制非常重要。在本研究中,花叶玉簪芽和花蕾诱导出丛生芽后,在继代培养中,我们发现通过花蕾诱导愈伤组织后形成的芽有变异现象发生,有些失去了原来的花叶特征,而由芽直接诱导产生的不定芽性状稳定,基本没有发现变异,保留着原来的花叶特征。

(2)在组培繁殖过程中,法兰西、甜心、金冠等3个花叶玉簪品种芽的分化率略有一定的差异。因此,应根据品种和瓶苗的生长情况调整细胞分裂素和生长素使用的浓度。

(3)出瓶苗中有少数苗的根发育较差或根茎处有愈伤化,会影响新根的发生,可用利刀切除,浅植于蛭石床上2～3周,待新根长好后再移栽。一般4—5月份下地栽种或上盆的小苗,经过精心养管,翌年即可开花。

(4)花叶玉簪通过组织繁殖可以在短期内获得数十万株小苗,繁殖系数极高。目前,我们通过侧芽直接诱导产生不定芽的方法已成功生产出30万株小苗,满足了我市的绿化工程用苗和盆栽花卉生产的需要,取得了很高的经济效益和社会效益。

参考文献:

[1] 郝砚英,赵哀梅,王勇,等.花叶玉簪的组织培养与快速繁殖技术研究[J].天津农业科学,2006,12 (2):18-19.