注射用三磷酸胞苷二钠的处方设计及稳定性考察

2008-05-28周建华

上海医药 2008年5期

周建华

摘要目的：研究注射用三磷酸胞苷二钠的生产处方并考察其稳定性。方法：采用单因素辅料筛选和对比试验法，对注射用三磷酸胞苷二钠的处方进行优化，并采用高效液相色谱法测定其含量并考察其稳定性。结果：注射用三磷酸胞苷二钠的处方为三磷酸胞苷二钠40 mg，甘露醇20 mg，甘氨酸20 mg，注射用水1 mL,冷冻干燥。结论：该处方设计合理，制剂稳定性好。

关键词三磷酸胞苷二钠筛选对比试验法稳定性

中图分类号：R97 文献标识码：B 文章编号：1006-1533(2008)05-0224-03

三磷酸胞苷二钠为腺苷酸类药物，可促进神经细胞内磷脂、核酸和蛋白质的合成代谢，调节神经细胞生物膜的合成，增强神经细胞抗损伤能力，营养神经细胞，延缓神经细胞凋亡。临床上主要用于治疗脑梗死、充血性心力衰竭、急性脑血管病、新生儿缺氧缺血性脑病和糖尿病周围神经病变等［1～3］。

由于三磷酸胞苷二钠对温度较敏感，在常温下易分解为二磷酸胞苷二钠和一磷酸胞苷二钠。为增强其稳定性，笔者将该品经过处方优化并制成冻干粉针剂，对注射用三磷酸胞苷二钠的处方工艺和稳定性进行了研究。お

1 仪器与试药

1.1 仪器

SPD-10Avp高效液相色谱仪(日本岛津公司)；pHSJ-3FpH计（上海精密科学仪器有限公司）；Lyo-1真空冷冻干燥机（上海东富龙科技有限公司）；SHH-250JS恒温恒湿箱（重庆市永生实验仪器厂）。

1.2 试药

三磷酸胞苷二钠（杭州美亚生物技术有限公司，批号：050402）；甘露醇（上海长征富民药业有限公司，批号：05082701）；右旋糖酐40(六安华源制药有限公司，批号：05083002)；甘氨酸（协和氨基酸有限公司，批号：K469194）；注射用三磷酸胞苷二钠（见工艺验证项下，批号：060301、060302、060303）。お

2 方法与结果

2.1 处方设计

2.1.1 溶剂的确定

根据三磷酸胞苷二钠易溶于水的特点，经过溶解试验，40 mg三磷酸胞苷二钠可在0.5 mL的注射用水中完全溶解，且放置数日不析出。因此，选择注射用水为本品的溶剂。

2.1.2 冻干体积的确定

为了保证主药的溶解且冻干易于成型，经试验，确定冻干体积为1 mL。

2.1.3赋形剂的筛选

合适的赋形剂可以使制剂易于冻干并能保持较好的外观性状。本实验选择甘露醇和右旋糖酐40分别制备样品，考察样品的干燥失重、外观性状、复溶性，从而筛选出最合适的赋形剂，结果见表1。

从表1可见，用甘露醇作赋形剂时，冻干品的干燥失重、外观性状及复溶性均优于右旋糖酐40。因此，选择甘露醇作为本品的赋形剂。

2.1.4 处方筛选

冻干制剂要求骨架成型且较牢固，外观光平细密，含水分低，复溶性好。在确定溶剂、冻干体积、赋型剂的基础上选用甘氨酸为稳定剂。处方组成见表2。

按上述处方组成配成药液，过滤，灌装于管制瓶中，每瓶1 mL，半加塞入冻干箱冻干。对制得的样品进行评价，考察外观性状、干燥失重、复溶性、澄清度、含量及有关物质，结果见表3。

从表3可见，各处方的外观性状无明显差异；随着甘露醇用量的增加，干燥失重逐渐降低；而随着甘氨酸用量的减少，含量逐渐降低。综合考虑，可选择处方D作为最优处方。

2.2 工艺验证

按上述最优处方称取处方量三磷酸胞苷二钠、甘氨酸及甘露醇，加入冷的注射用水中搅拌溶解，用2 mol/L 氢氧化纳调pH至5.5~6.5，用冷注射用水定容，用0.22 μm微孔滤膜无菌过滤，冻干，制备3批中试样品（批号：060301、060302、060303）。结果，所制备的3批样品的性状均为白色冻干块状物，干燥失重分别为3.5%、3.2%和2.9%，均小于7.0%；含量分别为98.3%、101.6%和102.1%，含量在95 .0％～105.0％之间；有关物质分别为1.7%、1.5%和1.9%，均小于5.0％。

2.3 质量控制

2.3.1 干燥失重

取本品，以五氧化二磷为干燥剂，60 ℃减压干燥至恒重，失重不得超过7.0%［4］。3批样品干燥失重分别为3.5%、3.2%和2.9%，均小于7.0%。

2.3.2 含量测定

总核苷酸：用分光光度法测定［4］，在280 nm波长处测定吸收度，按C9H14N3Na2O14P3的吸收系数为243计算。

三磷酸胞苷二钠的重量比：用高效液相色谱法测定［4］。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.2 mol/L 磷酸盐缓冲液（取磷酸氢二钠35.8 g，磷酸二氢钾13.6 g，加水900 mL溶解，用1 mol/L氢氧化钠溶液调节pH至7.0，加入四丁基溴化铵1.61 g，加水至1 000 mL摇匀。甲醇∶水（95∶5）为流动相；柱温为35 ℃，检测波长为271 nm；理论板数按三磷酸胞苷二钠峰计算应大于1 500；各色谱峰的分离度应符合规定。出峰次序依次为一磷酸胞苷、二磷酸胞苷与三磷酸胞苷。三磷酸胞苷二钠含量（%）=总核苷酸×三磷酸胞苷二钠的重量比。结果，3批样品的含量分别为98.3%、101.6%和102.1%。

2.3.3 有关物质检查

按照含量测定项下三磷酸胞苷二钠的重量比的方法测定，有关物质不得超过5.0%。结果，3批样品的有关物质分别为1.7%、1.5%和1.9%。

2.4 稳定性研究［4］

根据三磷酸胞苷二钠对温度比较敏感的特点，将3批样品（批号：060301、060302、060303）按市售包装，在温度为（30±2）℃、相对湿度（65±5）％的加速试验条件下放置，分别于1、2、3、6个月取样分析各项指标，结果见表4。按市售包装，在温度为（25±2）℃、相对湿度（60±10)％的长期试验条件下放置，分别于3、6、9、12个月取样分析各项指标，结果见表5。

加速及长期试验结果表明，在温度为（30±2）℃、相对湿度（65±5）％加速试验条件下，干燥失重、含量、有关物质等各项指标均符合质量标准要求。在温度为（25±2）℃、相对湿度（60±10）％长期试验条件下，干燥失重、含量、有关物质等各项指标均符合质量标准要求。