林 青，蒋诚传，林慧珍，廖 瑜，潘慧颖，王柏莲

（广西医科大学附属武鸣医院医学检验科，广西 南宁 530199）

宫颈癌是女性常见的恶性肿瘤之一，也是导致女性死亡的主要原因。2020 年，全球约有60.4 万例女性诊断出患有宫颈癌，大约34.2 万例女性死于宫颈癌。我国宫颈癌的发病形势不容乐观，2018 年报告宫颈癌新增病例106 430 例，死亡47 739 例，占全球宫颈癌发病率和死亡率的18.2%和17.3%[1]，且发病人群有年轻化趋势[2]。宫颈癌是目前唯一明确病因、早期可有效防治的癌症[3]。人乳头瘤病毒（HPV）感染是导致宫颈癌的主要原因，宫颈癌的发生、发展与HPV 持续感染密切相关。在HPV 持续感染期间，通过科学的筛查手段以及有效的治疗，可以阻断HPV 持续感染，避免形成癌前病变。有研究证实，HPV 感染情况和基因型别分布有明显的地域和种族差异[4]。广西南宁市武鸣区是壮族人群聚居地，本研究通过对20 863 例壮族女性宫颈脱落细胞进行HPV-DNA 分型检测分析，以掌握当地女性HPV 感染情况及型别分布特征，为本地区壮族女性宫颈癌防控策略的制定提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2014 年5 月至2021 年9 月在广西医科大学附属武鸣医院就诊并进行HPV 检测的20 863 例女性为研究对象，其年龄18 ～88 岁。纳入标准：（1）已婚或有性生活史；（2）自愿参加本研究，了解宫颈癌筛查的意义并知情同意；（3）检查前24 h 内无性生活，未用阴道栓剂或其他药物清洁冲洗阴道。排除标准：（1）正在使用阴道栓剂或其他药物清洁冲洗阴道；（2）处于妊娠期或哺乳期。本研究已通过医院伦理委员会审核同意。

1.2 方法

1.2.1 标本采集 标本由临床妇科医生采集，暴露宫颈，将采样刷置于宫颈口顺时针旋转3 ～5 圈，取出宫颈刷置于装有标本保存液的采样管中，折断刷头，密闭送至实验室。所有样品均保存于4 ℃冰箱中，并于48 h 内进行检测。

1.2.2 主要仪器与试剂 ABI 7500 实时荧光定量PCR仪（美国ABI 公司）；HPV DNA 提取和杂交试剂（潮州凯普生物化学有限公司）；台式高速冷冻离心机（湘仪仪器有限公司）。

1.2.3 HPV 分型检测 采用潮州凯普生物化学有限公司提供的仪器和试剂盒对标本进行HPV 基因分型检测。该方法采用导流杂交基因芯片技术原理，检测21 种HPV 基因型，包括15 种高危型（HPV16、H P V 1 8、H P V 3 1、H P V 3 3、H P V 3 5、H P V 3 9、H P V 4 5、H P V 5 1、H P V 5 2、H P V 5 3、H P V 5 6、HPV58、HPV59、HPV66 和HPV68）和6 种 低 危型 ﹝ HPV6、HPV11、HPV42、HPV43、HPV44、HPV81（CP8304）﹞，具体操作按说明书进行。根据杂交膜上探针分布的位置判断HPV 基因型，单独某种基因型杂交点阳性为单一感染，若2 种或以上基因型杂交点阳性则为多重感染。

1.3 观察指标

观察20 863 例女性的HPV 感染情况。

1.4 统计学处理

采用Excel 2007 和SPSS 15.0 统计软件进行数据分析。符合正态分布的定量资料用均数± 标准差（±s）表示；计数资料用例数和百分率表示，组间比较采用χ² 检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HPV 感染概况

纳入研究的20 863 例女性中，HPV 阳性2944 例，阳性率14.11%。2944 例阳性患者中单一感染2383例，占总阳性人数的80.94%（2383/2944），多重感染检出561 例，占总阳性人数的19.06%（561/2944）。2944 例阳性患者中共检出HPV 亚型3688 株，其中高危型3322 株，占比90.02%，低危型366 株，占比9.92%。15 种高危亚型检出的株数分别为HPV16（455株）、HPV18（170 株）、HPV31（87 株）、HPV33（125株）、HPV35（21 株）、HPV39（257 株）、HPV45（42 株）、HPV51（290 株）、HPV52（808 株）、HPV53（267 株）、HPV56（75 株）、HPV58（400 株）、HPV59（62 株）、HPV66（84 株）、HPV68（179 株），各高危亚型占总检出株数的阳性率分别为：12.34%、4.61%、2.36%、3.39%、0.57%、6.97%、1.14%、7.86%、21.91%、7.24%、2.03%、10.85%、1.68%、2.28%、4.85%，检 出 率排名前五的是：HPV52、HPV16、HPV58、HPV51、HPV53。6 种低危亚型检出的株数分别为HPV6（76株）、HPV11（41 株）、HPV42（19 株）、HPV43（26 株）、HPV44（53 株）、HPV81（151 株），各低危亚型占总检出株数的阳性率分别为：2.06%、1.11%、0.52%、0.70%、1.44%、4.09%，检出率最高的是HPV81，其次是HPV6。20 863 例女性按年龄大小分为五个组：＜30 岁、30 ～39 岁、40 ～49 岁、50 ～59 岁和≥60 岁，各年龄段HPV 感染率及单一、多重感染分布见表1。

表1 各年龄段HPV 感染分布情况[例（%）]

2.2 单一感染阳性构成比

20 863 例女性中，单一感染2383 例，占总阳性 人 数 的80.94%，15 种 高 危 型HPV16、HPV18、H P V 3 1、H P V 3 3、H P V 3 5、H P V 3 9、H P V 4 5、H P V 5 1、H P V 5 2、H P V 5 3、H P V 5 6、H P V 5 8、HPV59、HPV66、HPV68 单一感染阳性构成比分别为：13.72%、4.44%、2.18%、3.06%、0.67%、6.80%、1.05%、7.39%、24.80%、7.00%、1.89%、10.87%、1.47%、1.89%、3.94% ；6 种低危型HPV6、HPV11、HPV42、HPV43、HPV44、HPV81 单一感染构成比分别为：1.85%、1.26%、0.29%、0.80%、1.34%、3.27%；排名前十的亚型中，高危型占9 席，低危型仅占1 席，HPV 单一感染排序前十的亚型在不同年龄段的分布情况见表2。

表2 HPV 单一感染排序前十的亚型在不同年龄段的分布情况（%）

2.3 多重感染阳性构成比

20 863 例女性中，多重感染561 例，15 种高危 型HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、H P V 3 9、H P V 4 5、H P V 5 1、H P V 5 2、H P V 5 3、HPV56、HPV58、HPV59、HPV66、HPV68 多 重 感染阳性构成比分别为：9.81%、4.9%、2.68%、3.98%、0.38%、7.28%、1.30%、8.74%、16.63%、7.66%、2.30%、10.80%、2.07%、2.99%、6.51%，构成比排名前五的型别为：HPV52（16.63%）、HPV58（10.80%）、HPV16（9.81%）、HPV51（8.74%）、HPV53（7.66%），与检出率排名前五的亚型基本一致；6 种低危型HPV6、HPV11、HPV42、HPV43、HPV44、HPV81多重感染阳性构成比分别为：2.45%、0.84%、0.92%、0.54%、1.61%、5.59%，低危亚型中HPV81 容易与其他亚型结合，其次是HPV6。HPV 多重感染排名前十的亚型中，低危亚型只有HPV81 占有一席之地，其他均是高危亚型。HPV 多重感染排名前十的亚型在不同年龄段的分布见表3。

表3 HPV 多重感染排名前十的亚型在不同年龄段的分布情况（%）

3 讨论

HPV 是一种双链DNA、无包膜病毒，具有嗜黏膜和皮肤上皮的特点。有研究表明，大约75% 的女性一生中会在不同阶段感染HPV，HPV 阳性率与女性年龄及性活跃程度密切相关，且多为一过性感染[5]。人体感染HPV 后会导致皮肤黏膜鳞状上皮增殖，持续的HPV 感染是导致宫颈癌发生的重要原因。定期筛查HPV 是预防宫颈癌发生的有效措施。本研究对20 863 例女性进行HPV 筛查，检出HPV 感染2944 例，阳性率为14.11%，与李江萍等[6]报道的武汉青山地区HPV 感染率14.43% 接近，低于唐凤祝等[7]报道的四川HPV 感染率18.56%。各地报道的HPV 阳性率不尽相同，阳性率在不同地区的差异可能与不同地区感染高危因素的不同有关，也可能与选择的研究对象如体检人群、门诊患者、住院患者等有关。本研究常见的HPV 亚型为HPV52、HPV16、HPV58、HPV51、HPV53，与唐凤祝等[7]报道的成都常见HPV 亚型为HPV52、HPV16、HPV58、HPV53、HPV81 基本一致；河北廊坊女性常见的HPV 亚型为HPV52、HPV16、HPV58、HPV81、HPV66[8]；青海西宁地区女性常见的HPV 亚 型 为HPV16、HPV18、HPV26、HPV53、HPV58[9]。以上提示HPV 感染率、亚型分布存在地域性差异，因此各地制定宫颈癌筛查指南时应考虑地区针对性。由表1 可见，不管是阳性检出率还是单一感染率、多重感染率或是高危型检出率、低危型检出率，HPV 感染都存在着一个共同的特征：在不同年龄段的分布都呈现两头高、中间低的“U”型态势。本研究除感染率与毛雅珍等[10]、杨英梅等[11]报道的HPV 感染随着女性年龄的变化呈“U”型分布的特点一致外，还发现单一感染率、多重感染率或高危型、低危型检出率都存在“U”型分布的特点。这种“U”型分布特征的形成可能与女性一生中激素水平的变化和性生活活跃程度有关[12]。虽然年龄＜30 岁的年轻人性生活活跃，加之可能有多个性伴侣，易发生HPV 感染，但由于其性激素水平高，容易清除HPV，故多为一过性感染。HPV 阳性率与女性的年龄及性行为密切相关，年轻、有多个性伴侣的女性HPV 阳性率较高，感染高峰多在18 ～28 岁，且多为一过性感染[13]。女性30 ～49 岁性伴侣趋于稳定，激素水平正常，因此HPV 感染率低；年龄＞60 岁的女性卵巢功能减退，激素水平下降，HPV 清除能力下降，因此感染率高。

本研究中单一感染者2383 例，占总阳性人数的80.94%，多重感染561 例，占总阳性人数的19.06%。提示本地区HPV 以单一感染为主。由表2 和表3 可知，HPV16 在单一感染中随着年龄的增大构成比呈线性上升趋势，在多重感染中呈“U”型分布的态势。高危亚型HPV16 是与宫颈癌的发生关系最密切的一个亚型[14]。女性随着年龄的增大，激素水平的降低，免疫力和病毒清除能力均呈下降趋势，在感染HPV 后容易发展为宫颈癌。HPV52 在单一或多重感染中都呈现中间高、两头低的特点，其在宫颈癌前病变中占比较多。HPV52 能限制细胞转化，只有少量转化成宫颈浸润癌[15]，而癌前病变好发年龄段为30 ～49 岁，故呈现中间高、两头低的特点。HPV58 在单一感染中，＞60岁年龄段占比最低，而多重感染呈“U”型分别的态势。说明HPV58 在年龄＞60 岁女性中多以多重感染的方式存在。翟青枝等[16]对高度鳞状上皮内病变（HSIL）患者进行研究发现，HPV58 阳性患者术后持续感染率较高。因此，对于感染HPV58 亚型的宫颈癌前病变及宫颈癌术后患者，应加强术后随访，观察疾病的转归情况。HPV 基因型的单一感染和多重感染对引起宫颈病变的风险是否有差异，不同的文献报道各有不同[17]。多数学者认为多重感染患者宫颈癌的发生风险与单一感染总体相似，几乎没有多种HPV 之间存在协同及相互作用的证据[18]。而翟青枝等[16]对HSIL患者进行研究发现，HSIL 患者中单一感染和混合感染与术后HPV 清除率相关，并证实混合感染术后阳性率高于单一感染。可见，多重感染虽未直接加重宫颈病变，但可引起术后的持续感染。因此，对于HPV多重感染患者，建议术后按期随访，观察疾病的转归情况，便于及时发现宫颈病变。

本文通过分析7 年多来在广西医科大学附属武鸣医院就诊的20 863 例壮族女性HPV 感染的情况，发现本地区女性HPV 感染有其自身的规律和特点，即：壮族地区女性HPV 以单一、高危型别感染为主，常见型别有HPV52、HPV16、HPV58，且各型别在不同年龄段的分布及致病性各不相同。因此，本地区应根据女性HPV 感染的自身特点和规律，有针对性地开展宫颈癌的防治工作，选择适合本地区的HPV 疫苗，做到有的放矢，为本地区宫颈癌的防治提供流行病学依据。