肖圆圆 袁 琪 袁剑华 杨凯丽 郝隽毅 卿一青 宋雅婷 方热军*

(1.湖南农业大学动物科学技术学院，长沙 410128；2.长沙湘金饲料有限公司，长沙 410000)

目前，我国是世界上最大的鹌鹑蛋生产和消费大国，鹌鹑存栏超5亿只，年产蛋量约占世界总产量的60%。2020年，鹌鹑被《国家畜禽遗传资源目录》列为传统畜禽。鹌鹑肉、蛋富含各种人体必需氨基酸和脂肪酸[1]。但随着日龄的增加，蛋禽肠道对养分和矿物质的消化吸收能力下降，由此导致的生产性能降低[2]、蛋壳品质下降[3]问题在生产中较为常见，这不利于鹌鹑蛋的生产、收集、储存和运输过程，直接影响经济效益，严重影响蛋鹌鹌行业的健康发展。因此，寻求提升生产性能、改善蛋壳品质的有效措施具有重要的实际意义。

生产性能和蛋壳品质通常受蛋禽品种、日龄、饲养方式和营养水平等因素的影响[4]。有研究表明，随蛋鸡日龄的增长，鸡蛋重量和体积增加，蛋壳重量波动不大[5]，而厚度随日龄增加而逐渐减低[6]。通过饲粮营养调控提升蛋鹌鹑生产性能，促进其肠道对钙的消化吸收，改善蛋壳品质成为了当前研究热点之一。胆汁酸(bile acid，BA)是胆汁的主要成分，是胆固醇经肝脏分解代谢形成的水溶性胆烷酸的总称。BA可提高肠道抗炎菌的相对丰度[7]，调节肠道内pH，加速菌体自溶，抑制有害菌的繁殖[8]。有研究表明，BA可显著改善肉雏鸡肠道黏膜结构[9]，提高肠道胰蛋白酶活性[10]，提高乌鳢生长性能，改善其糖脂代谢[11]；饲粮添加250、500和750 g/t BA可提高产蛋后期海兰褐蛋鸡产蛋率，降低坏蛋率，显著改善蛋品质[12]。以上结果提示，饲粮添加适宜水平BA可改善肠道健康，有助于肠道对养分的消化吸收，从而促进动物生长发育。目前BA在肉鸡和水产动物生产上的应用多有研究，但其对蛋鹌鹑的影响研究鲜有报道，因此，本试验旨在研究饲粮中添加BA对蛋鹌鹑生产性能、蛋壳品质和钙磷表观代谢率的影响，为BA在蛋鹌鹑生产中的应用提供理论依据，促进鹌鹑产业提质增效。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验动物日本蛋用鹌鹑由湖南省某公司提供；BA由山东某公司提供，纯度为20%。

1.2 试验设计

采用单因素试验设计，选取产蛋率和体重相近的16周龄日本鹌鹑960只，随机分为4个组，每组6个重复，每个重复40只。对照组饲喂基础饲粮，试验组则在基础饲粮中分别添加40(BA1组)、80(BA2组)和120 mg/kg(BA3组)BA。预试期1周，正试期6周。基础饲粮参照NRC(1994)及《中国饲料成分及营养价值表(2020)》配制而成，其组成及营养水平见表1。

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)

续表1项目 Items含量 Content色氨酸 Try0.22钙 Ca3.57非植酸磷 NPP0.32

1.3 饲养管理

试验在湖南省岳阳市鹌鹑试验基地进行，采用6层立体笼养，纵向负压通风，环境温度控制在20～25 ℃，人工控光为16 h/d，颗粒料饲喂。日本鹌鹑自由采食，充足饮水，按正常免疫程序进行免疫接种。

1.4 测定指标及方法

1.4.1 生产性能

以重复为单位，记录正试期每日产蛋数、蛋重和不合格蛋数，及时记录鹌鹑死淘数；每周结料1次并记录余料量。计算产蛋率、平均蛋重、平均日采食量和料蛋比，计算公式如下：

产蛋率(%)=100×(日产蛋总数/存栏鹌鹑总数)；
平均蛋重(g)=总蛋重/产蛋数；
平均日采食量(g/d)=总采食量/存栏鹌鹑数；
料蛋比=总采食量/总蛋重。

1.4.2 钙、磷和粗脂肪表观代谢率

正试期第39～42天，以重复为单位，每日按五点法收集鲜粪150 g，清理非粪杂物后用10%硫酸固氮，再置于-20 ℃冰箱待测；按四分法采集饲粮样品150 g，置于4 ℃冰箱以供试验分析。饲粮和鹌鹑粪样中钙、磷含量采用紫外可见分光光度计(UV752型，上海佑科仪器仪表有限公司)测定，粗脂肪含量参照《饲料分析与检测》[13]方法测定；采用酸不溶灰分法计算表观代谢率，具体步骤与计算公式参照《饲料中盐酸不溶灰分的测定》(GB/T 23742—2009)。计算公式如下：

某营养物质表观代谢率(%)=100-[100×
(粪中该营养物质含量×饲粮中酸不溶灰分含量/
饲粮中该营养物质含量×粪中酸不溶灰分含量)]。

1.4.3 蛋壳表观品质

正试期第6周，对23周龄日本鹌鹑蛋进行取样，每重复随机选取4枚接近重复平均蛋重的鹌鹑蛋(不含破、软、沙壳蛋和畸形蛋)，测定蛋壳表观质量，并保留完整蛋壳用于测定蛋壳中钙、磷含量。

蛋壳表观品质的测定：蛋壳强度用ESTG-01型蛋壳强度分析仪(ORKO，以色列)测定；蛋壳厚度用NFN-380型蛋壳厚度测定仪(FHK，日本)测定。

蛋壳中钙、磷含量的测定：将完整蛋壳去除壳膜，用温热蒸馏水冲洗，使其内外表面无污染物黏后60 ℃烘干、粉碎，蛋壳中钙、磷含量参照《饲料分析与检测》[13]方法测定。

1.5 数据统计与分析

采用SPSS 26.0软件进行单因素方差分析(one-way ANOVA)，采用Duncan氏法进行多重比较，P<0.05为差异显著，P<0.01为差异极显著，0.05

2 结 果

2.1 饲粮添加BA对16～23周龄日本鹌鹑生产性能的影响

由表2可知，与对照组相比，各试验组日本鹌鹑产蛋率均有上升趋势，其中BA2组产蛋率有显著高于其余各组的趋势(0.050.05)。

表2 饲粮添加BA对16～23周龄日本鹌鹑生产性能的影响

2.2 饲粮添加BA对日本鹌鹑钙、磷和粗脂肪表观代谢率的影响

由表3可知，与对照组相比，各试验组日本鹌鹑钙表观代谢率均极显著升高(P<0.01)；BA2组磷表观代谢率极显著低于其余各组(P<0.01)；与对照组相比，各试验组粗脂肪表观代谢率均提高，其中BA1组和BA3组差异极显著(P<0.01)。

2.3 饲粮添加BA对23周龄日本鹌鹑蛋壳品质的影响

由表4可知，试验组日本鹌鹑蛋壳强度均高于对照组，且BA1组和BA2组蛋壳强度显著高于对照组(P<0.05)；试验组蛋壳钙含量均高于对照组，其中BA1组和BA3组极显著提高(P<0.01)；试验组蛋壳磷含量均极显著低于对照组(P<0.01)，同时BA2组和BA3组极显著低于BA1组(P<0.01)；饲粮添加BA对蛋壳厚度无显著影响(P>0.05)。

3 讨 论

3.1 饲粮添加BA对16～23周龄日本鹌鹑生产性能的影响

生产性能是决定经济效益的重要指标，如何在不影响正常生长的条件下，提高产蛋率和降低料蛋比是禽类生产中急需攻克的难题[14]。目前，关于BA在鹌鹑生产上的研究鲜见报道。有研究表明，饲粮添加BA对海兰褐蛋鸡产蛋高峰期的产蛋率有提升效果，且显著改善蛋品质[12]。本试验结果表明，饲粮添加80 mg/kg BA有提升鹌鹑产蛋率的趋势，与上述结果相似。脂肪肝出血综合征(fatty liver hemorrhagic syndrome,FLHS)是一种营养代谢疾病，在蛋禽产蛋高峰期较为常见，在全球各地有不同程度的发病，对鹌鹑肝脏造成严重损伤的同时,会导致产蛋率大幅下降[15]。鹌鹑产蛋率受自由基含量、卵泡生成激素、黄体生成激素、雌激素和卵巢芳香化酶活性等因素的影响[16]。有研究发现，鹅去氧胆酸(鸡胆汁主要成分)干预能够提高FLHS蛋鸡肝脏抗氧化能力[17]，从而使肝脏、垂体、卵巢和输卵管等高产自由基器官免受攻击[16]，进而影响生殖激素及自由基的水平，这可能也是80 mg/kg BA添加组产蛋率升高的原因。

表3 饲粮添加BA对日本鹌鹑钙、磷和粗脂肪表观代谢率的影响

表4 饲粮添加BA对23周龄日本鹌鹑蛋壳品质的影响

有研究表明，饲粮添加80、400和600 mg/kg BA可降低肉鸡料重比和平均日采食量，显著提升其生长性能[18-19]。曾佳佳等[20]在蛋鸡饲粮中添加中草药-益生菌-BA复合制剂也得出了相似的研究结果。Piekarski等[21]也报道，0.1%和0.5%的鹅去氧胆酸可降低肉鸡平均日采食量。本试验结果表明，饲粮添加80 mg/kg BA可显著降低蛋鹌鹑料蛋比。这与上述等人研究结果相似，这可能与BA参与调节胆固醇平衡[22]、促进脂质消化吸收有关。

3.2 饲粮添加BA对日本鹌鹑钙、磷和粗脂肪表观代谢率的影响

蛋壳主要由碳酸钙组成，蛋禽钙代谢水平直接影响蛋壳品质。机体缺钙、缺磷均会抑制动物采食，导致增重减慢、饲料利用率下降，直接导致料蛋/重比显著升高；导致产蛋期禽类产蛋受阻，使壳钙沉积减少、蛋壳软化，提升坏蛋率，严重影响产蛋性能；还易导致骨质疏松，影响成年禽类受精卵发育。由于磷酸钙盐的形成，机体不会出现磷过多的情况，但在实际生产中，会导致机体钙不足、引起骨重吸收而导致骨折，同时还会因消化不良而引起禽类腹泻。

目前，关于BA影响蛋鹌鹑肠道对钙、磷吸收能力的相关研究未见报道。有研究发现，在肉杂鸡饲粮中添加200、400和600 mg/kg BA，钙表观利用率显著提高[23]。本试验结果表明，饲粮添加40、80和120 mg/kg BA均可显著提升日本鹌鹑对钙的表观代谢率，与其结果相似。维生素D作为脂溶性维生素，可促进肠道上皮细胞顶端钙离子渗透及胞内胞质的转运与排出，从而调控钙离子在肠道上皮细胞的吸收[24]。在饲粮中添加不同形式维生素D可提高蛋鸡对钙、磷的利用率[25]。有研究表明，维生素D3可调控钙磷吸收，改善骨强度[26-27]，并提高蛋鸡产蛋后期蛋壳品质及胫骨强度[28]。本研究结果表明，饲粮添加不同水平BA均提升了粗脂肪代谢率，其中40和120 mg/kg BA添加组差异极显著。这提示，BA可能通过提高脂肪吸收利用，促进脂溶性维生素的吸收[29]，从而提高肠道钙的吸收代谢能力。十二指肠对钙的吸收率达90%，是肠道吸收钙离子的主要场所[30]。有研究表明，BA可提高肉鸡肠道绒毛高度，降低隐窝深度，增加小肠表面积，并可提高小鼠回肠闭锁小带蛋白-1(ZO-1)、闭合蛋白(occludin)、封闭蛋白-4(claudin-4)基因的表达量，改善肠道屏障功能[31]。因此，BA还可能通过影响肠道形态，直接提高鹌鹑肠道对钙和粗脂肪的消化吸收来调节钙的代谢。

本试验结果表明，饲粮添加80 mg/kg BA虽显著降低了鹌鹑对磷的表观代谢率，但其对平均日采食量的下降效果不显著，且其料蛋比仍显著降低，这与上述机体缺磷症状不符。有研究表明，钙过量会加重肠道负担，抑制微量元素如锌[32]和有机磷的吸收与利用[33]。因此，BA可能是提高了肠道对钙的吸收利用，加重了肠道负担从而降低了磷的表观代谢率，具体原因有待进一步验证。

3.3 饲粮添加BA对23周龄日本鹌鹑蛋壳品质的影响

蛋壳可保护其内容物，还可提供种蛋孵化所需钙源。蛋壳的钙化分为钙化起始、线性沉积和钙化末期，均在在子宫内进行，接着逐渐形成蛋壳乳突层、栅栏层、垂直晶体层和胶护膜[34]。蛋壳形成的动态过程中，血液中钙离子不断被子宫上皮细胞摄入，然后分泌到子宫腔中与碳酸氢根离子形成碳酸钙(占蛋壳组分的96%以上[35])。血液中钙离子主要来源于肠道吸收和髓质骨动员，因此，钙代谢直接影响蛋壳形成过程和蛋壳品质[36]。

蛋壳品质可由蛋壳强度和厚度等相关指标评价，主要受蛋禽品种、日龄和饲养管理及蛋的储存条件等因素的影响[4]。随着蛋禽产业的规模化、机械化，蛋禽因老龄化引起的子宫部衰老和钙代谢的改变，是导致产蛋率和蛋壳品质下降的主要原因[37]。钙在蛋鸡肠道中的吸收主要受饲粮钙水平[38]和蛋鸡日龄[39]等因素的影响。然而蛋禽对钙的吸收能力有限，高钙饲粮不仅不能改善蛋壳质量[40]，同时也抑制采食和减缓生长。有研究表明，饲粮钙水平低于2.5%时才与蛋壳质量存在线性关系[41]。因此，从提高机体钙代谢的角度出发，通过营养调控强化钙的吸收利用和缓解壳钙沉积异常，才能解决随日龄增加导致的蛋壳质量下降的问题。

目前，关于BA对鹌鹑蛋壳品质的相关研究鲜见报道。有研究表明，饲粮添加0.2%中草药-益生菌-BA复合制剂对海兰褐蛋鸡蛋壳厚度无显著影响[20]，这与本试验结果一致。本试验结果还表明，饲粮添加40、80和120 mg/kg BA对鹌鹑蛋的蛋壳强度和蛋壳钙含量均有提升效果，其中40和80 mg/kg BA添加组蛋壳强度差异显著，40和120 mg/kg BA添加组蛋壳钙含量差异显著。这说明饲粮添加适宜水平BA可促进钙的代谢，增加鹌鹑蛋壳内钙的沉积，从而增强蛋壳强度，改善鹌鹑蛋壳品质。

4 结 论

① 饲粮添加80 mg/kg BA有提高日本鹌鹑产蛋率的趋势，能够显著降低料蛋比，从而改善生产性能。

② 饲粮添加40～120 mg/kg BA均可显著提高日本鹌鹑钙表观代谢率。

③ 饲粮添加40～120 mg/kg BA可增加鹌鹑蛋的壳钙沉积，提高蛋壳强度，改善鹌鹑蛋壳品质。

④ 建议日本鹌鹑(16～23周龄)饲粮BA适宜添加水平为80 mg/kg。