赵 丽，杜飞云，侯旭杰，3，杨家荣，蒲云峰，3

（1. 塔里木大学食品科学与工程学院，新疆阿拉尔 843300；2.新疆叶河源果业股份有限公司，新疆图木舒克 843900；3. 南疆特色农产品深加工兵团重点实验室，新疆阿拉尔 843300）

枣（Ziziphus jujubaMill.） 是鼠李科（Rhamnaceae） 枣属（Ziziphus） 植物，枣果实中含有丰富的营养物质和功能成分[1]，其中维C 的含量尤为丰富，素有“维C 之王”的美誉[2]，因此常将维C 含量作为评价枣果品质的重要指标。目前，枣果中维C常用的测定方法有高效液相色谱法、2,6 -二氯靛酚法、紫外分光光度法、碘量法、钼蓝比色法等[3-5]，其中高效液相色谱法具有分离效果好、灵敏度高、准确度高等特点，被广泛用于蔬菜水果中维C 测定。以甲酸水为流动相，采用Spuirsil C18亲水柱分离，建立枣果中维C 的HPLC 分析方法，并于2,6 -二氯靛酚法和碘量法测定结果比较，明确枣果中维C分析方法之间的差异，为枣果维C 的准确测定提供技术支持和参考。

1 材料与方法

1.1 材料、试剂与仪器

枣样采摘于塔里木大学枣种质资源圃。

维C 标准品，阿拉丁试剂（上海） 有限公司提供；碘酸钾、碘化钾、草酸、可溶性淀粉、2,6 - 二氯酚靛酚等，均为分析纯试剂。

TGL-20M 型台式高速冷冻离心机，湖南湘仪离心机仪器有限公司产品； LC-20A 液相色谱、PDA检测器，日本岛津公司产品。

1.2 试验方法

1.2.1 HPLC 法

称取一定量样品，用2%草酸室温超声提取30 min，再以转速3 000 r/min 离心15 min，取上清液过0.22 μm滤膜，4 ℃下放置备用。

色谱柱：Spuirsil C18（250 mm×4.6 mm，i.d.）柱（天津迪马公司产品），流动相为0.5%甲酸，流速0.6 mL/min，进样量10 μL，柱温30 ℃，检测波长243 nm。

1.2.2 2,6 - 二氯靛酚法

参照GB 5009. 86—2016 食品中抗坏血酸的测定第三法2,6 - 二氯靛酚滴定法测定。

1.2.3 碘量法

参照徐朝阳[6]的方法测定。

1.3 数据处理

每个处理重复3 次，结果以X±SD 表示，采用SPSS 20.0 进行方差分析，并进行Duncan's 多重比较（p＜0.05）。

2 结果与分析

2.1 维C 含量的HPLC 色谱图

目前，HPLC 法测定维C 含量的流动相多为磷酸缓冲盐溶液和甲醇组成，采用Spuirsil C18亲水柱分离，流动相仅选用0.5%的甲酸水溶液，流动相配制简单，且不含甲醇等有机相。

维C 标准品和枣样的HPLC 色谱图见图1。

图1 维C 标准品和枣样的HPLC 色谱图

从图1 可看出，标准品和样品色谱峰基线平稳、分离度高，说明该色谱条件适合枣果中维C 含量的测定。

2.2 维C 的HPLC 分析方法的建立

维C 测定方法的参数见表1。

表1 维C 测定方法的参数

从表1 可以看出，在3.125~100.000 μg/mL 内，维C 标准曲线为Y=0.498 4X+0.680 1，回归系数为R2=0.999 0。该方法的回收率在91.54%~97.59%内，重现性的RSD 为0.98%（n=6），室温下放置55 h 稳定性的RSD 为2.53% （n=12），4 ℃下放置55 h 稳定性的RSD 为0.58%（n=12)。检测限（LOD） 和定量限（QOD） 按照Araujo P[7]的方法计算，即检测限（LOD） 为3×SD/m和定量限（LOQ） 为10×SD/m，其中SD为标准曲线的截距，m为标准曲线斜率。该方法的检测限（LOD） 和定量限（QOD） 分别为4.01和13.64 μg/mL。这说明建立的方法适合枣果中维C含量的测定。此外，从稳定性结果来看，样品处理好后，在4 ℃下放置比室温放置的RSD 更小，说明样品处理好后在4 ℃下放置结果更稳定。

2.3 枣果维C 含量测定方法的比较

3 种维C 含量测定方法的比较见表2。

表2 3 种维C 含量测定方法的比较 / mg·g-1

从表2 可以看出，8 个品种鲜枣的维C 含量均较高，说明鲜枣可以作为补充维C 的食物来源。从分析方法来看，采用HPLC 法测定的结果显著低于2,6-二氯靛酚法和碘量法（p＜0.05），这可能是由于2,6 -二氯靛酚法和碘量法专一性不如HPLC 法，一些非维C 物质干扰测定结果，导致2,6 - 二氯靛酚法和碘量法的结果偏高。因此，枣果中维C 含量测定时建议采用HPLC 法。

3 结论

采用Spuirsil C18亲水柱，建立了枣果中维C 含量测定的HPLC 方法，该方法具有流动相配制简单、分析时间短、准确度高、回收率高等特点。通过对8 个品种鲜枣的分析，发现鲜枣中维C 含量丰富，说明鲜枣是维C 优质的食物来源；3 种分析方法的比较，发现2,6- 二氯靛酚法和碘量法测定结果显著高于HPLC 法。因此，在枣果维C 含量测定时，HPLC 法测定结果更能准确地反映枣果维C 含量的真实水平。