于童洲,张天宇,周立业

(内蒙古民族大学农学院，内蒙古 通辽 028000)

生物入侵给自然生态系统和人类经济造成了严重的影响，是世界上最棘手的生态环境问题之一[1-2]。少花蒺藜草俗名刺蒺藜、草狗子、草蒺藜，为禾本科蒺藜属一年生草本植物[3]。少花蒺藜草原产于美洲，20世纪40年代传入我国，在我国的辽宁省、内蒙古自治区、吉林省广泛扩散传播，其成熟果实的刺苞极易造成放牧家畜口腔和胃肠的溃疡，严重影响到农牧民的经济收入和日常生活，现已成为科尔沁沙地危害最为严重的入侵杂草之一[4]，遏制和防除少花蒺藜草已经到了刻不容缓的地步。

外来植物入侵后，可能改变土壤水分与营养循环等土壤条件，这些土壤条件的改变又可能促进入侵物种的进一步扩散，进而对本地生物多样性和生态环境造成严重破坏[5-7]。在早期关于生物入侵的研究中，对于入侵植物与入侵地生态系统各组分间相互作用的研究多集中在地上部分[11]，而随着研究的不断深入，入侵植物与入侵地土壤之间的互作关系越来越受到研究者的重视[14-15]。土壤酶是联系植物和土壤有效养分的纽带，可以指示土壤生态系统功能与土壤肥力状况，对有机质的矿化和有机污染物的降解具有促进作用[8-10]，作为决定土壤养分转化方向和速率的关键性生物因子[11]，土壤酶还参与了土壤中多种养分物质的分解、合成以及释放过程，并且催化土壤中的一切生物化学反应[12-13]。而根际土壤在本土植物和外来植物之间可以起到桥梁的作用，不同植物根际产生的分泌物种类与数量不同，导致不同植物群落下土壤的酶活性具有差异，同时植物根际土壤由于受到植物根系活动的影响，其中的生物地球化学循环最为活跃，物理、化学、生物学特征和酶活性也显著不同于非根际土壤，而这些差异对植物群落的建成具有重要意义[17-19]。

在研究防除外来物种入侵措施中，生物替代控制因不会引发新一轮生态安全问题而备受关注[20]。近年来研究发现，一些多年生优质牧草对少花蒺藜草具有较强的竞争优势[2]。为进一步探索优质牧草对少花蒺藜草的替代作用，明确优质牧草对少花蒺藜草的竞争机制，本研究以少花蒺藜草为研究对象，利用3种优质牧草(紫花苜蓿、羊草、草木樨)对其进行替代竞争，分析替代竞争下少花蒺藜草根际与非根际土土壤中脲酶、磷酸酶、蔗糖酶与过氧化氢酶的活性变化，探讨在不同替代作用下不同生长时期少花蒺藜草生存策略，以期对遏制少花蒺藜草在科尔沁沙地的传播提供理论依据。

1 材料和方法

1.1 研究区概况

研究区设在内蒙古民族大学科技示范园区(N 43°19′～43°55′，E 120°55′～122°55′)，海拔高度178 m，年平均气温6.4 ℃，年有效积温3 184 ℃，极端低温-30.9 ℃。无霜期为145 d，年平均降水量为399.1 mm，土壤为沙壤土。

1.2 试验设计与土样采集

于2020年4月15日，选择试验地生长状况良好一致，种植年限为1年的紫花苜蓿、羊草和草木樨进行采集，采集后将根际剪至同一长度并移栽到预先整好的试验地小区，以试验地土壤为基质进行一个月的适应性生长，小区面积2 m×3 m，移栽采用穴栽方式，植株间距40 cm，于5月15日将少花蒺藜草播种在各穴牧草之间(每穴2粒，出苗后定苗至1株)，少花蒺藜草与各穴牧草间距为20 cm，并以单播少花蒺藜草为对照组，少花蒺藜草株行距均为20 cm，分别记为少花蒺藜草单种(S)、少花蒺藜草与紫花苜蓿混种(SM)、少花蒺藜草与羊草混种(SY)、少花蒺藜草与草木樨混种(SC)，共计4个处理，每个处理3次重复，试验期间进行正常灌溉，所有牧草不进行刈割。土样采集时间开始于2020年6月15日，按照5点取样法每隔30 d取土1次(分别为少花蒺藜草的苗期、分蘖期和开花结实期)，采集方法为Riley和Barber的抖落法[20-21]，用铁锹挖取少花蒺藜草地下根系(0～20 cm)，抖去大块不含根系的土壤作为非根际土壤，然后用细毛刷刷取根系表层黏贴的土壤，去除杂质后作为根际土壤，按照四分法选取适当土样装入自封袋，在4 ℃下保存带回实验室进行试验分析。

1.3 土样指标测定及其方法

用pH计测定土壤pH值。土壤酶活性主要参考关松荫等[22]的测定方法。土壤脲酶的测定采用苯酚钠-次氯酸钠比色法，以24 h内1 g土壤中NH3-N的毫克数表示土壤脲酶活性；土壤磷酸酶的测定采用磷酸苯二钠比色法，以24 h内1 g土壤中释放出的酚的质量(mg)表示土壤磷酸酶活性；土壤蔗糖酶的测定采用3,5-二硝基水杨酸比色法，以24 h内1 g干土生成的葡萄糖毫克数表示；土壤过氧化氢酶的测定采用高锰酸钾滴定法，以每g干土1 h内消耗的0.1 mol/L KMnO4体积数表示。

1.4 数据统计与分析

本试验所有数据均使用Microsoft Office Excel 2013进行统计、计算和制作图表，使用SPSS 23.0对试验数据进行单因素方差分析(One-way ANOVA)及相关分析，显著度水平为0.05。

2 结果与分析

2.1 混播处理下少花蒺藜草根际和非根际土壤的pH

少花蒺藜草无论是根际土还是非根际土土壤pH值都大于7，土壤偏碱性且各土壤样本之间的pH值没有显著差异(P>0.05)(表1)。

表1 少花蒺藜草不同生育时期土壤pH值

2.2 混播处理下少花蒺藜草苗期土壤酶活性的变化

不同混播模式下少花蒺藜草苗期根际土壤脲酶活性无显著性差异(P>0.05)(图1-A)，与草木樨竞争时，少花蒺藜草根际土中磷酸酶和蔗糖酶活性显著高于其他处理(P<0.05)(图1-B，图1-C)；与对照相比，紫花苜蓿竞争条件下少花蒺藜草根际土过氧化氢酶活性提高了6%(P<0.05)(图1-D)。在少花蒺藜草苗期同一替代处理下根际土壤酶活性大于非根际土壤。

图1 不同混播处理下少花蒺藜草苗期土壤的酶活性Fig.1 Changes of soil enzyme activities at seedling stage of C.pauciflorusunder different competitive conditions注：不同大写字母表示在0.05水平上根际土壤酶的差异显著性，不同小写字母表示在0.05水平上非根际土壤酶的差异显著性。下同

2.3 不同混播处理下少花蒺藜草分蘖期土壤酶活性变化

少花蒺藜草在分蘖期时与不同牧草混播对其根际土壤脲酶和过氧化氢酶活性无显著性影响(P>0.05)(图2-A,图2-D)。草木樨处理下根际土土壤磷酸酶和蔗糖酶酶活性显著高于其他处理(P<0.05)，而其他处理组之间没有显著性差异(P>0.05)(图2-B,图2-C)。在同一处理条件下少花蒺藜草根际土壤的4种酶活性均高于非根际土壤。

图2 不同混播处理下少花蒺藜草分蘖期土壤的酶活性Fig.2 Changes of soil enzyme activities at tillering stage of C.pauciflorusunder different competitive conditions

2.4 不同混播处理下少花蒺藜草开花期土壤酶活性的变化

开花期时，不同混播处理下少花蒺藜草的脲酶活性均显著高于对照组(P<0.05)，变化趋势为SY>SM>SC(图3-A)。在羊草与草木樨处理下，少花蒺藜草根际土壤磷酸酶活性显著高于对照组和紫花苜蓿处理(P<0.05)(图3-B)。在草木樨处理下少花蒺藜草根际土壤蔗糖酶活性最高，其他两组处理之间无显著性差异(P<0.05)，且3组组处理的蔗糖酶活性显著高于对照组S(P<0.05)(图3-C)。少花蒺藜草过氧化氢酶活性变化趋势处理为S>SC>SY>SM，其中对照组过氧化氢酶活性显著高于紫花苜蓿与羊草处理(P<0.05)，与草木樨处理之间无显著性差异(P>0.05)，不同处理之间过氧化氢酶活性无显著性差异(P>0.05)(图3-D)。在相同处理条件下少花蒺藜草根际土壤的4种酶活性均高于非根际土壤。

图3 不同混播处理下少花蒺藜草开花期土壤的酶活性Fig.3 Changes of soil enzyme activities at flowering stage of C.pauciflorusunder different competitive conditions

3 讨论

土壤酶是植物、土壤动物和微生物代谢向土壤中释放的活性物质，用酶活性可以表征土壤的生态功能强度、各种生物化学过程的反应速率和方向[23]。本研究中少花蒺藜草在不同替代作用下根际土壤的4种酶活性均高于非根际土，表现出一定的根际正效应(根际土/非根际土>0)，可能是因为少花蒺藜草在生长过程中通过根系吸收水分以及无机物质，同时又向周围土壤释放出根系分泌物如糖类、氨基酸、酚类和有机酸等物质，再加上凋落物的分解和土壤中形成腐殖质等因素，提高了少花蒺藜草根际土壤中微生物的活性，进而提高了根际土壤中的养分和酶活性。而非根际土壤受到植物根系活动的影响较小，从而导致少花蒺藜草的根际与非根际之间的土壤酶活性具有较大差异。这与杨玉海等[24]及罗明等[25]的结论相一致。说明入侵植物-土壤-微生物所组成生态微域向稳态的方向发展，从而提高了自身的入侵性[17]。

与少花蒺藜草单种相比，3种替代牧草均不同程度地提高了少花蒺藜草根际土壤脲酶、磷酸酶和蔗糖酶的活性，造成这一结果的原因一是可能因为少花蒺藜草根系在受到竞争胁迫时会启动自我防御系统，产生根系分泌物，提高对土壤肥力的吸收利用以增强自身的竞争能力，这与赵燕娜等对某种入侵植物的研究结果相似[26]；二是可能因为替代植物根系在发育过程中会产生不同种类的化感物质并对其他植物根际的微环境形成影响，这与张海霞等[16]及杜鄂巍等[27]的研究结果一致。本研究结果表明，与草木樨混播下，少花蒺藜草根际土土壤酶活性提高最为显著，说明草木樨与少花蒺藜草之间的竞争最为激烈，而紫花苜蓿和羊草也在一定程度上刺激了少花蒺藜草脲酶与磷酸酶活性的增长，但关于二者是否可以作为替代少花蒺藜草的最佳牧草还有待对植物地上部分进一步研究。

本试验中相同处理下少花蒺藜草的根际土壤酶活性均在开花结果期最高，其原因可能是不同生长期少花蒺藜草对土壤养分的需求不同，产生的根系分泌物不同，导致土壤中酶活性发生变化，这与罗雪晶等[8]的结论一致，都表明了植物根际土壤酶活性会随着不同生长时期发生改变。

4 结论

不同牧草与少花蒺藜草竞争混播，少花蒺藜草会向根际分泌出更多的化学物质，提高土壤中的酶活性，增强其自身的竞争能力。本研究中与草木樨混播下少花蒺藜草根际土脲酶、磷酸酶与蔗糖酶活变化最为显著，未达到竞争抑制效果。