江 灵，王 华，王 静，王雨涵，杨 倩，吴世梅，黄远帅

（1.西南医科大学附属医院输血科，四川 泸州 646000；2.雅安市人民医院输血科，四川 雅安 625000；3.四川大学华西医院龙泉医院检验科，四川 成都 610000）

Rh 是最复杂的血型系统，是除ABO 血型系统以外最重要的一个血型系统，共有54 个抗原，其中最具有临床意义的是C、c、D、E、e 五种抗原[1]，而D抗原免疫原性最强。临床血液系统疾病患者、呼吸与危重症患者、消化道大出血及危重症患者多数存在出血、贫血、凝血功能障碍等情况，需要反复多次输血；而患者多次输注Rh 表型不同的红细胞后，红细胞同种免疫问题随之出现，增加不规则抗体产生概率，且产生的不规则抗体不仅会引起急性以及迟发性的溶血性输血反应[2]，还会增加输血科交叉配血的难度，延长配血输血时间，影响患者输血的安全性和有效性。因此，Rh 血型系统（RhCcEe）抗原配合性输血对反复多次输血的患者至关重要。本研究结合2017 年6 月-2020 年6 月在西南医科大学附属医院接受多次输血治疗的155 例患者临床资料，分析RhCcEe 抗原配合性输血在多次输血患者中的应用价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2017 年6 月-2020 年6 月在西南医科大学附属医院接受多次输血治疗的患者155例作为研究对象。纳入标准：①住院期间需要多次输注悬浮红细胞者；②不规则抗体筛查阴性；③无过敏反应史。排除标准：①住院期间输注悬浮红细胞的次数≤2 次；②首次检测不规则抗体筛查阳性者。根据随机数字表法将研究对象分为试验组77 例和对照组78 例。试验组女39 例，男38 例；年龄15～79 岁，平均年龄（52.10±19.60）岁；对照组中女33 例，男45例；年龄16～78 岁，平均年龄（53.60±18.70）岁。两组年龄、性别比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经医院伦理委员会批准，患者及其家属知情同意，并签署知情同意书。

1.2 试剂与仪器 ABO/RhD 血型定型检测试剂卡、IgM 抗D 血型定型试剂、Rh 血型分型检测卡、抗球蛋白（IgG）检测卡、抗球蛋白试剂（江苏力博医药生物技术股份有限公司）；抗A，抗B 血型定型试剂（北京金豪制药股份有限公司）；抗体鉴定细胞（上海血液生物医药有限责任公司）；ABO 血型反定型试剂盒、不规则抗体筛选红细胞（长春博迅生物技术有限责任公司），所有试剂均为批检合格产品且在有效期内使用。离心机（Baso 2005-1，台湾BASO 企业有限公司）；KA-2200 久保田离心机（日本），微柱凝胶板式离心机（TD-3A，长春博研科学仪器有限责任公司），试剂卡孵育器（LB-37）（江苏力博医药生物有限公司），全自动血型及配血分析系统（IH-1000，Bio-Rad 中国公司）。

1.3 方法

1.3.1 ABO、RhCcEe 血型抗原鉴定 患者输血前采集标本进行输血前血型鉴定，输血时再次采集交叉配血标本进行血型复查，2 次鉴定结果一致者录入系统。

1.3.2 不规则抗体筛选和鉴定 将患者标本离心后，取上清液25 μl 加入抗人球蛋白微柱凝胶卡中，分别加入不规则抗体筛选红细胞或抗体鉴定细胞，37 ℃孵育15 min，离心等待结果。

1.3.3 交叉配血 试验组进行ABO、RhCcEe 抗原配合性输血，无法找到抗原一致的献血者时进行相容性输血，即按照Rh 表型匹配优先级别进行配血（表1），对照组仅进行ABO、RhD 相合性输血。每次输血后对患者进行输血后疗效评估和输血不良反应的反馈，并在下一次交叉配血之前进行不规则抗体筛查，抗筛阳性者进行不规则抗体鉴定。

表1 Rh 表型匹配优先级

1.4 统计学方法 采用SPSS 20.0 统计学软件进行数据分析。计量资料以（）表示，采用t检验；计数资料以[n（%）]表示，采用χ2检验。以P＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 患者Rh 抗原表型分型情况 Rh 抗原表型分布为 CCDee（47.74%）、CcDEe（31.61%）、CcDee（9.03%）、ccDEE（6.45%）、ccDEe（3.87%）、CCDEe（1.30%），见表2。

表2 Rh 抗原表型分布情况（n）

2.2 试验组不规则抗体检测结果分析 试验组不规则抗体阳性率为1.30%（1/77），低于对照组的10.26%（8/78），差异有统计学意义（P＜0.05）。对照组8 例不规则抗体分别为4 例抗-E、2 例抗-cE、1 例抗-Ce、1 例抗-Le。试验组仅1 例抗-M。最早产生不规则抗体的为第3 次输血后。试验组未观察到输血不良反应发生，对照组有6 例输血不良反应发生（主要是迟发性免疫性溶血反应和迟发性血清学反应），组间比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。

3 讨论

输血在临床诊疗当中发挥着越来越重要的作用，尤其是对于血液系统疾病、消化道大出血以及危重症大出血患者，输血已经成为了一种不可替代的疗法。在输血诊疗中，ABO 和Rh 血型系统是最重要的两大系统，具有临床意义的抗原有A、B、D、C、c、E、e 等，抗原A、B、D 的抗原性最强，一直被列为常规检测项目，因而抗-A、抗-B、抗-D 引起的输血不良反应相对较少[3]。而其余抗原并没有进行常规检测，其免疫原性都较强，均可刺激机体产生相应的不规则抗体。血液系统疾病患者、消化内科大出血患者以及危重症大出血患者对血液的需求量较大，需要反复多次输血，从而增加抗原刺激机体产生不规则抗体的几率。因此，为减少和避免输血所致不规则抗体的产生，提高临床输血的安全性，为患者进行RhCcEe 抗原相合性输血具有重要的临床意义。

本研究中Rh 抗原表型主要分布为CCDee（47.74%）、CcDEe（31.61%）、CcDee（9.03%）、ccDEE（6.45%）、ccDEe（3.87%）、CCDEe（1.30%），受血患者Rh 系统5 个主要抗原分布频率由高到低分别为D、e、C、c、E，与既往研究报道相符[4-7]。在研究期间，试验组仅有1 例检测出抗-M 的不规则抗体，属于MNS 系统的常见抗体，多为自然产生，较少引起输血不良反应。而同期对照组患者的抗筛阳性率为10.26%，不规则抗体经鉴定为4 例抗-E、2 例抗-Ec、1例抗-Ce、1 例抗Le，与文献报道类似[8，9]。可以看出对照组患者未进行RhCcEe 抗原配合性输血时，在反复多次输血后产生不规则抗体的概率增加，产生的抗体主要是抗-E 和抗-Ec，这与Rh 抗原分布与对应不规则抗体产生的比例相吻合[10-12]，是因为我国人群中c、E 抗原的抗原性较强且频率分布的阴阳性接近[13]，在反复多次输血的情况下，高频次的输入c、E 抗原阳性的血液会刺激Ec 阴性患者产生相应的抗-E、抗-c 抗体，并且随着输注次数的增加，抗体的滴度也会逐渐增加[14-17]。此外，因患者体内不规则抗体一旦产生，只可能随着时间的推移而逐渐降低，但不会完全消失。当再次输血接触到相应抗原，便会激活机体的“回忆性输血反应”，使体内抗体效价迅速升高，造成严重的溶血反应[18]。本研究中试验组未出现输血不良发应，而对照组患者因反复输注Rh 抗原不匹配的异体血液，引起红细胞同种免疫反应，其发生输血不良反应的概率明显增加，以迟发性血清学反应和迟发性免疫性溶血反应为主。近年国内研究表明，针对Rh 血型系统的E、C、c、e 抗原所产生的不规则抗体是引起迟发型溶血性输血反应[19-22]和新生儿溶血病等的主要原因[23-26]。

综上所述，对需要反复多次输血的临床患者进行RhCcEe 抗原配合性输血可有效地降低因输血产生Rh 血型系统不规则抗体的概率，提高输注红细胞的有效性，同时还可以解决既往存在不规则抗体导致交叉配血不合的问题，降低“回忆性输血反应”，是预防输血患者发生Rh 免疫的重要策略，对保障用血安全和疗效具有重要意义。