骆 灿，龚丽婷，郑 刚，姚菲菲，陶志成

（1.杭正检测集团有限公司，浙江 杭州 310000；2.浙江金正检测有限公司，浙江 金华 322000）

四聚乙醛，又名蜗牛敌，常被用于防治诸如蛞蝓、蜗牛等软体动物[1-2]。由于四聚乙醛导致的人畜中毒的事情时有发生，为了保障食品安全我国制订了《食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量》（GB 2763—2021）。该标准规定了四聚乙醛在不同种类果蔬中的最大残留限量，其中番茄的最大残留量为0.5 mg·kg-1，茎用莴苣叶和茼蒿的最大残留限量为10 mg·kg-1，猕猴桃和火龙果的最大残留限量为0.1 mg·kg-1[3]。

文献报道中关于检测食品中四聚乙醛残留量的方法主要有气相色谱法、气相色谱-质谱法和液相色谱串联质谱法等[4-5]。鉴于目前QuEChERS前处理方法在食品检测中的广泛应用，本文采用基于QuEChERS 净化结合气相色谱质谱法（Gas Chromatography Mass Spectrometry，GC-MS/MS）以检测果蔬中的四聚乙醛残留量，对样品提取、净化和检测条件进行优化，建立一种简单快速的适用于检测果蔬中四聚乙醛残留量的GC-MS/MS 法。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

8890-7000D 三重四极杆气质联用仪（美国Agilent 公 司）；19091S-433UI HP-5MS 色谱柱 （30 m×0.25 mm，0.25 μm，美国Agilent 公司）。SFTDL-6A 离心机（上海菲恰尔分析仪器有限公司）；MS 3 basic 振荡器（IKA 公司）；四聚乙醛标准品（99.4%，BePure）；乙酸乙酯、二氯甲烷、乙腈（色谱纯）；氯化钠（分析纯）；QuEChERS 试剂盒（885 mg硫酸镁+150 mg PSA+15 mg GCB）。

1.2 方法

1.2.1 仪器条件

色谱条件：色谱柱Agilent 19091S-433UI HP-5MS Ultra Inert（30 m×0.25 mm，0.25 μm）； 程序升温：50 ℃保持2 min，以20 ℃·min-1的升温速率升至 160 ℃后，再以40 ℃·min-1的升温速率升至280 ℃保持1 min；进样口温度：200 ℃；传输线温度：280 ℃；载气：氦气（99.999%），流速1.0 mL·min-1；进样量：1 μL；进样方式：不分流进样。

质谱条件：离子源(Xtr EI)；离子源温度：280 ℃；电子轰击源：70 eV；四极杆温度：150 ℃；碰撞气流量：1.50 mL·min-1；猝灭流量：2.25 mL·min-1；溶剂延迟：5 min；模式：多反应监测MRM 模式采集。采集条件如下：定量离子对89.0/45.1，碰撞能量15 eV，定性离子对131.0/42.8，碰撞能量15 eV，定性离子对45.0/43.0，碰撞能量15 eV。

1.2.2 样品前处理

取10 g（精确至0.01 g）均质后的样品于50 mL离心管中，加入6 g NaCl，加入20 mL 乙腈+乙酸 乙 酯（3+1），涡 旋振荡2 min，5 000 r·min-1离心5 min。吸取上清液8 mL 加到内含885 mg 硫酸镁+150 mg PSA+15 mg GCB 的离心管中，涡旋混匀 1 min，4 200 r·min-1离心5 min，取上清液过微孔滤膜（0.22 μm），用于测定。

1.2.3 标准曲线

称取适量四聚乙醛标准品，先用少量二氯甲烷溶解，再以乙腈+乙酸乙酯（3+1）将其配制成 100 μg·mL-1的单标储备液，避光冷藏保存，按需使用；以按上述前处理方法处理得到的基质空白溶液将标准品稀释成0.004 μg·mL-1、0.010 μg·mL-1、 0.050 μg·mL-1、0.100 μg·mL-1、0.200 μg·mL-1和 0.500 μg·mL-1的基质标准工作液，现配现用。

1.2.4 添加回收实验

对小青菜、西红柿、韭菜、苹果、枣和蜜桔进行添加回收实验，添加浓度为0.01 mg·kg-1、 0.10 mg·kg-1、0.50 mg·kg-1。取样后添加适量标液混匀静置0.5 h 后，再对样品进行处理。

2 结果与分析

2.1 仪器条件的选择

对于四聚乙醛化合物，经过质谱优化后，确定仪器条件见1.2.1，采用上述仪器条件对四聚乙醛进行样品中的定性定量测定，四聚乙醛的标准溶液质谱图见图1。由谱图可见，出峰时间为6.216 min，峰形较好。

图1 四聚乙醛的标准溶液质谱图

2.2 前处理的选择与优化

目前，乙腈和乙酸乙酯作为提取溶剂在农药提取中已经得到了广泛应用，因此本研究选择乙酸乙酯和乙腈作为提取溶剂。在考察了乙腈、乙酸乙酯、乙腈+乙酸乙酯（1+1）和乙腈+乙酸乙酯（3+1）4 种溶剂的提取效果后，发现乙腈+乙酸乙酯（3+1）的提取效果最好。故本研究采用了乙腈+乙酸乙酯（3+1）作为提取溶剂。

在比较了不同净化手段（LC-NH2/Envi-carb 固相萃取柱、弗罗里硅土柱、QuEChERS 试剂盒）的回收率之后，对加标量为0.50 mg·kg-1的样品进行试验。结果表明，采用LC-NH2/Envi-carb 固相萃取柱净化的样液回收率为83%，采用弗罗里硅土柱净化的样液回收率为82%，采用QuEChERS 净化的样液回收率为105%，回收率均满足要求，但考虑到操作的简单快速，本研究选择QuEChERS 净化作为净化 手段。

2.3 添加回收率

采用阴性样品添加标液的方法，分别对小青菜、西红柿、韭菜、苹果、枣和蜜桔进行添加回收实验，添加浓度为0.01 mg·kg-1、0.10 mg·kg-1、0.50 mg·kg-1。按照1.2.2 方法提取，GC-MS/MS 测定，计算添加回收率，结果见表1。

结果表明，四聚乙醛在0.004 ～0.500 μg·mL-1线性关系良好，相关系数大于0.999，加标试验平均回收率在84%～113%，RSD 在0.91%～7.84%，检出限为0.002 mg·kg-1（S/N=3）。

3 结论

本文建立了一种样品前处理简单快速，方法灵敏度和选择性高，重复性好，能够满足快速检测果蔬中四聚乙醛残留量的气相色谱串联质谱检测方法。与文献方法相比，本法在保证高灵敏度和准确性的同时，尽可能简化了前处理，提高了工作效率，为快速测定果蔬中四聚乙醛残留量的研究提供了数据 基础。