赵丹阳 李香月* 姚 婷 杨晓伟 史艳艳 李军国 商方方 谷 旭**

(1.中国农业科学院饲料研究所，农业农村部动物产品质量安全饲料源性因子风险评估实验室，北京 100081；2.北京市饲料监察所，北京 100110；3.天津市农业生态环境监测与农产品质量检测中心，天津 300193)

亚麻籽(Linumusitatissimum)为亚麻科草本植物亚麻的种子，又被称为胡麻籽，颜色多为浅黄色或棕褐色[1-2]。亚麻籽含有丰富的油脂、蛋白质、木酚素、矿物质以及不饱和脂肪酸等，被广泛用于调控畜禽产品品质，如亚麻籽微囊粉等功能性饲料原料[3-4]。亚麻籽及其副产物不仅可以提高禽畜产品中不饱和脂肪酸的含量及营养价值，还有助于改善动物健康，增强免疫力[5]。本实验室前期研究发现，北京油鸡饲粮中添加9%的亚麻籽对其生长性能无不良影响；相较于未添加亚麻籽的试验饲粮，添加量为9%的亚麻籽在鸡胸肉中n-3多不饱和脂肪酸(PUFA)含量从(0.38±0.15) g/kg提高到(1.55±0.35) g/kg[6]。亚麻籽含有生氰糖苷、抗维生素B6因子、植酸等有毒物质或抗营养因子[7]，动物食用添加高含量的亚麻籽后，生氰糖苷被水解产生氢氰酸，引起动物中毒，导致动物细胞产生中毒性缺氧症[8]。亚麻籽中的抗维生素B6因子可破坏机体对维生素B6的吸收，使动物出现精神萎靡、食欲不振、神经紊乱等症状[9]。在生产使用时必须采取相关手段降低抗营养因子的含量。饲料加工过程中的加热、研磨、制粒、粉碎、挤压膨化和微波烘焙可消除一些抗营养因子，同时添加酶制剂的方法也可以消除抗营养物质[10]。在上述加工过程中，饲料的挤压膨化是一种集蒸煮、压缩、混合、杀菌、脱毒、成型为一体的加工环节，饲料原料经过高温、高压、挤压等一系列处理，其理化性质发生变化，加工后的原料可降低脂质氧化、使抗营养因子失活、增加氮和膳食纤维的溶解度、消灭微生物病原体[11-12]，从而降低抗营养因子的含量。

北京油鸡被称为“中华宫廷黄鸡”，产于北京近郊,是北京地区特有的优良地方鸡种，以肉味鲜美、蛋质佳良而著称。相较于其他鸡种，北京油鸡的肌肉中含有较多的蛋白质和氨基酸，并且含有较多人体所必需的不饱和脂肪酸[13]。随着人民生活水平的日益提高，对畜禽产品的营养健康和品质的需求不断增加，市场上对功能性畜禽产品的需求量加大，饲粮中添加亚麻籽会提高畜禽的健康水平以及在动物产品中n-3脂肪酸含量[14]。但是在先前研究中，畜禽生产中亚麻籽的研究主要集中在直接利用，而对膨化亚麻籽的研究鲜有报道，所以目前利用膨化亚麻籽作为饲料原料生产功能性的畜禽产品已经成为研究的关注热点。

因此，本研究拟在饲粮中添加膨化亚麻籽、亚麻籽饲喂北京油鸡，以期确定添加膨化亚麻籽对北京油鸡的生长性能、屠宰性能、血浆生化指标及肌肉n-3PUFA沉积量的影响。本研究将为膨化亚麻籽作为功能性饲料原料生产富含n-3PUFA的鸡肉产品的科学合理使用提供理论依据和数据支撑。

1 材料与方法

1.1 试验动物与试验设计

试验选择10周龄北京油鸡(雌鸡)450只[初始平均体重为(586.13±17.81) g]，随机分为5组，每组6个重复，每个重复15只。在基础饲粮中分别添加0(阴性对照)、9%的亚麻籽(阳性对照)及9%、12%、15%的膨化亚麻籽，制成5种试验饲粮，分别命名为E0、F9、E9、E12、E15，进行为期8周的养殖试验。动物试验在中国农业科学院南口中试基地进行。

1.2 试验饲粮

采用外观均匀一致、无霉变的膨化亚麻籽，购自河南某膨化饲料科技有限公司。试验添加亚麻籽和膨化亚麻籽营养成分见表1，试验饲粮组成及营养水平见表2。

表1 亚麻籽和膨化亚麻籽营养成分(风干基础)Table 1 Nutrient components of flaxseed and extruded flaxseed (air-dry basis)1) %

表2 试验饲粮组成及营养水平(干物质基础)Table 2 Composition and nutrient levels of experimental diets (DM basis) %

1.3 饲养管理

整个试验期采用笼养的方式，定期对鸡舍进行消毒和清洁，保持通风，固定光照时间，温度保持在(25±5) ℃，自由采食和饮水。所有试验程序均按照《肉鸡饲养管理手册》执行。

1.4 测定指标

1.4.1 生长性能

记录每天每笼的饲粮用量以及健康状况。分别测定试验鸡的初始重和末重，记录5个组试验鸡的采食量，计算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。

平均日采食量(g)=总耗料量/(只数×天数)；平均日增重(g)=总增重/(只数×天数)；料重比=总耗料量/总增重。

1.4.2 屠宰性能

试验结束后各重复随机选取1只健康试鸡，空腹禁食12 h，称量活体重后放血宰杀，解剖后分离肝脏和腹脂等，测定屠体重、全净膛重、腹脂重，计算屠宰率、全净膛率、腹脂率、肝脏指数(以活体重为基础计量)。另取一份胸部肌肉样品于-40 ℃冰箱保存，用于测定脂肪酸含量。

1.4.3 血浆生化指标和抗氧化指标

由科华ZY KHB-1280全自动生化仪测定血浆中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性及总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量。根据南京建成生物工程研究所试剂盒说明的方法测定血浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。具体的检测方法参照赵丹阳等[15]的试验步骤。

1.4.4 肌肉脂肪酸含量

具体样品的前处理方法参照GB 5009.168—2016，试验操作过程和操作仪器条件参照赵丹阳等[15]的试验进行。称取0.200 0 g样品后，分别加入2 mL 5 mg/mL的内标溶液，1 mL正己烷，3 mL甲酰氯溶液。水浴加热后，冷却至室温，加入5 mL 6%的K2CO3溶液，离心后使用气相色谱仪检测。

1.5 数据处理

试验采用SPSS 17.0软件中one-way ANOVA进行多重比较，Duncan氏法进行多重比较，P<0.05表示差异显著，数据结果以“平均值±标准差”形式表示。

2 结果与分析

2.1 饲粮添加膨化亚麻籽对北京油鸡生长性能和屠宰性能的影响

由表3可知，相比于F9组，E9组北京油鸡的初始重、末重、平均日增重、平均日采食量和料重比均无显著差异(P>0.05)。E9和E12组试验鸡的平均日增重显著高于E0组(P<0.05)。E12组平均日采食量显著高于E0组(P<0.05)，E9和E15组与E0组差异不显著(P>0.05)。E9、E12、E15组试验鸡与E0组末重和料重比均没有显著差异(P>0.05)。

由表3可知，E9组与F9组活体重、屠宰率、全净膛率、腹脂率及肝脏指数均无显著差异(P>0.05)。相比于E0组，E9、E12、E15组试验鸡屠宰率、全净膛率以及腹脂率差异不显著(P>0.05)，肝脏指数显著降低(P<0.05)。

表3 饲粮添加膨化亚麻籽对北京油鸡生长性能和屠宰性能的影响Table 3 Effects of dietary extruded flaxseed on growth performance and slaughter performance of Beijing fatty chicken

2.2 饲粮添加膨化亚麻籽对北京油鸡血浆生化指标的影响

由表4可知，相比于F9组，E9组血浆AST活性显著升高(P<0.05)，ALT活性显著降低(P<0.05)，TC、TG、HDL-C、LDL-C含量没有显著变化(P>0.05)。E9、E12、E15组血浆AST活性显著低于E0组(P<0.05)。E12组血浆ALT活性显著高于E0组(P<0.05)。E9、E12组试验鸡血浆TG含量呈上升趋势但差异不显著(P>0.05)，E15组TG含量显著高于E0组(P<0.05)。E9、E12、E15组与E0组血浆TC、HDL-C、LDL-C含量无显著差异(P>0.05)。

表4 饲粮添加膨化亚麻籽对北京油鸡血浆生化指标的影响Table 4 Effects of dietary extruded flaxseed on plasma biochemical indexes of Beijing fatty chicken

2.3 饲粮添加膨化亚麻籽对北京油鸡血浆抗氧化能力的影响

由表5可知，E9和E12组血浆中SOD活性显著低于E0组和F9组(P<0.05)。E0组和F9组血浆MDA含量显著低于E9、E12、E15组(P<0.05)，E9、E12、E15组间血浆MDA含量无显著差异(P>0.05)。

表5 饲粮添加膨化亚麻籽对北京油鸡血浆抗氧化能力的影响Table 5 Effects of dietary extruded flaxseed on plasma antioxidant capacity of Beijing fatty chicken

2.4 饲粮添加膨化亚麻籽对北京油鸡肌肉n-3PUFA沉积量的影响

由表6可知，相比于E0组，E9、E12、E15组肌肉中C18∶3n-3、C20∶5n-3、C22∶6n-3以及长链n-3多不饱和脂肪酸(LC-n-3PUFA)含量显著提高(P<0.05)，同时C20∶4含量显著降低(P<0.05)。E9、E12、E15组的n-3PUFA含量相比于E0组显著提高(P<0.05)，与F9组差异不显著(P>0.05)，E9、E12、E15组之间差异不显著(P>0.05)。E9、E12、E15组肌肉中n-6PUFA/n-3PUFA与F9组没有显著差异(P>0.05)，但显著低于E0组(P<0.05)。

表6 饲粮添加膨化亚麻籽对北京油鸡肌肉n-3PUFA沉积量的影响Table 6 Effects of dietary extruded flaxseed on n-3PUFA deposition in muscle of Beijing fatty chicken g/kg

3 讨 论

3.1 饲粮中相同添加水平的膨化亚麻籽和亚麻籽对北京油鸡的影响比较

3.1.1 饲粮中相同添加水平的膨化亚麻籽和亚麻籽对北京油鸡的生长性能和屠宰性能的影响

林霏雨等[16]研究表明，饲粮中添加2%、4%、6%的膨化亚麻籽对育肥猪的生长性能无显著影响，但随着添加剂量的增加，可显著提高料重比。黄玉兰等[17]设计了1.0%～5.0%的亚麻籽饲喂爱拔益加(AA)肉鸡，研究结果表明，在饲粮中添加5%的亚麻籽会显著降低平均日增重，但屠体率和全净膛率相比于对照组没有显著差异。本试验结果表明，E9组相比于F9组对北京油鸡的生长性能和屠宰性能无显著影响。这说明亚麻籽膨化后不会对北京油鸡的生长性能和屠宰性能产生负面影响。

3.1.2 饲粮中相同添加水平的膨化亚麻籽和亚麻籽对北京油鸡血浆生化指标的影响

研究中AST和ALT活性常被用来反映肝脏功能的状态和代谢水平，当肝细胞受损时,此类酶进入血液的速度大幅度提高，显著增加血液中这些酶的活性[18]。本试验结果表明，E9组相比于F9组显著提高了血浆AST活性，显著降低血浆ALT活性。根据Bark等[19]的研究表明，转氨酶活性在正常范围内的升高，可以促进氨基酸的合成，有利于蛋白质合成与代谢。本试验与其取得了相似的结果，表明添加膨化亚麻籽相比于亚麻籽可能会促进合成氨基酸和蛋白质的代谢作用，但相关机制有待进一步研究验证。E9与F9组间血浆TC、TG、HDL-C、LDL-C含量没有显著差异。

3.1.3 饲粮中相同添加水平的膨化亚麻籽和亚麻籽对北京油鸡血浆抗氧化能力的影响

SOD是机体内重要的抗氧化酶，影响自由基的清除能力。MDA是自由基与机体内多聚不饱和脂类易发生脂质过氧化反应产生的醛类物质[20-21]。MDA含量的高低是用来反映细胞受损程度的指标之一，MDA的含量增加主要伤害生物膜结构，破坏细胞膜[22]。本试验中，E9组血浆中SOD活性显著低于F9组，MDA含量显著高于F9组，表明饲粮中添加膨化亚麻籽引起了北京油鸡体内的氧化应激反应，并对其抗氧化系统造成一定的影响，降低了机体的抗氧化能力。

3.1.4 饲粮中相同添加水平的膨化亚麻籽和亚麻籽对北京油鸡肌肉n-3PUFA沉积量的影响

n-3PUFA主要包括亚麻酸(ALA，C18∶3n-3)、二十二碳六烯酸(DHA，C22∶6n-3)和二十碳五烯酸(EPA，C20∶5n-3)等，为人体必需脂肪酸。调节细胞的代谢及功能，可显著降低血浆TG的含量，降低心血管疾病，抑制炎症性疾病的发生，改善心肌舒张和收缩[23]。亚麻籽是n-3PUFA的宝贵天然来源，在饲粮中加入亚麻籽是提高鸡蛋和肉中多不饱和脂肪酸含量的有效途径，肉鸡能够通过消化道消化亚麻籽，在小肠吸收营养，进一步代谢成为ALA，将ALA延长并去饱和为EPA和DHA最终沉积到脂肪中[24]。本试验中E9与F9组肌肉C18∶3n-3、C20∶5n-3、C22∶6n-3、LC-n-3PUFA、n-3PUFA含量以及n-6PUFA/n-3PUFA均无显著变化。

3.2 饲粮中添加不同添加水平的膨化亚麻籽对北京油鸡的影响

3.2.1 饲粮中添加不同添加水平的膨化亚麻籽对北京油鸡生长性能和屠宰性能的影响

任迎春等[25]设计了膨化亚麻籽水平为0～5.7%的试验肉鸡饲粮，研究结果表明添加膨化亚麻籽对肉鸡的料重比和肉鸡胫骨的长度、周长没有显著影响。赵慧敏等[26]用0～15%亚麻籽饲喂肉鸡结果表明，随着饲粮亚麻籽添加水平的升高肉鸡的平均日增重显著降低。本试验结果表明，添加膨化亚麻籽可在一定程度上提高肉鸡的平均日增重和平均日采食量，降低了料重比。这与邓波等[27]用5%和10%的亚麻籽饲喂生长育肥猪的结果相一致。这是由于亚麻籽中含有抗营养因子生氰糖苷，经水解产生氢氰酸对动物产生毒害作用，添加量过多会影响动物的生产性能[17]，本试验采用的膨化亚麻籽，膨化过程中消除了大部分对动物体有害的抗营养因子生氰糖苷[28]，且北京油鸡相较于普通肉鸡生长速度缓慢[6]，采食量较小食用抗营养因子含量可能未到达抗营养水平所导致。E9、E12、E15组与F9组间末重、平均日增重、平均日采食量和料重比均无显著差异。

一般认为屠宰率在80%以上、全净膛率在60%以上有良好的肉用性能[29]。任迎春等[25]研究表明，膨化亚麻籽的添加量为3.8%和5.7%时可以显著提高屠宰率，但全净膛率、半净膛率及腹脂率等没有显著影响。本试验中相比于E0组，E9、E12、E15组屠体率和全净膛率无显著差异，腹脂率有所提高但未达到显著水平，可能是饲粮中添加膨化亚麻籽后提高了粗脂肪含量，进而增加鸡肉脂肪的沉积量[15]。肝脏作为禽类最大的内脏器官之一，具有吸收代谢营养物质、储藏多余碳水化合物、分解有毒有害物质的基本功能[30-31]。试验中常用肝脏指数来衡量肝脏功能情况[32]，本试验中E9、E12、E15组的肝脏指数显著低于E0组，这可能是肝脏内脂肪代谢调控发生了变化进而对血浆生化指标和胸肌脂肪酸的组成造成了影响。

3.2.2 饲粮中添加不同添加水平的膨化亚麻籽对北京油鸡血浆生化指标的影响

秦蕾等[33]设计了2.0%、3.8%和5.7%的膨化亚麻籽饲喂肉鸡，研究结果表明随着时间延长和增加膨化亚麻籽的添加量，血浆TC的含量显著降低。本试验中E9、E12、E15组血浆AST活性显著低于E0组，ALT活性略升高，表明添加膨化亚麻籽并未损伤肝脏功能造成不良影响。血浆TG、TC含量是反映血脂水平的重要指标，本试验中E9、E12、E15组试验鸡血浆TG含量略提高可能是因为添加膨化亚麻籽后提高了饲粮中脂肪含量，增加肝脏对TG的合成量。导致体内脂代谢功能下降，无法及时清除，造成TG含量蓄积。血浆TC含量有下降趋势，HDL-C、LDL-C含量无显著差异，这可能是亚麻籽含有n-3PUFA调节脂质代谢所致，这与前人的研究结果[34]相一致。

3.2.3 饲粮中添加不同添加水平的膨化亚麻籽对北京油鸡血浆抗氧化能力的影响

陈芳等[35]研究表明，鹌鹑饲粮中加入10%的亚麻籽饼，可显著增加血浆MDA的含量。武晓红[36]在肉鸡饲粮中分别添加2%、4%，添加时间为7、14和21 d的亚麻油，结果表明，屠宰前长时间且高水平添加亚麻油，会提高胸肌和腿肌中MDA的含量。本试验中膨化亚麻籽组血浆SOD活性相比于E0组显著降低，血浆MDA含量显著上升，这与大多数对于n-3PUFA的研究结果相一致。产生这一现象的原因可能是由于添加膨化亚麻籽后，增加了油鸡体内n-3PUFA的沉积量，其不饱和键更易受到自由基的攻击进而增强脂质过氧化作用，因而导致脂质氧化的MDA含量增加。

3.2.4 饲粮中添加不同添加水平的膨化亚麻籽对北京油鸡肌肉n-3PUFA沉积量的影响

余捷等[37]研究表明，在肉鸭的饲粮中添加3%的亚麻籽，增加了PUFA总量，并显著提高了n-3PUFA的含量。刘利晓[38]研究指出，基础饲粮中添加3%、5%亚麻油可提高PUFA总量，显著增加了n-3PUFA的含量。本试验中，E9、E12、E15组肌肉中C20∶4n-6含量显著低于E0组，可能是由于合成C20∶4n-6、C20∶5n-3和C22∶6n-3需要相同的酶体系，添加膨化亚麻籽后其中的C18∶3n-3限制C18∶2进一步生成C20∶4n-6。E9、E12、E15组与F9组n-3PUFA沉积量没有显著提高，这可能是因为机体n-3PUFA和n-6PUFA的合成存在竞争性抑制，C18∶3n-3/C18∶2的比值抑制了n-3PUFA的合成，而生成更多的n-6PUFA。且北京油鸡自身含有一定的C22∶6n-3可能抑制了C22∶6n-3的合成。随着增加膨化亚麻籽的添加量，E9、E12、E15组n-3PUFA沉积量没有显著提高，这与赵丹阳[6]的研究结果相一致，这可能是由于n-3PUFA在北京油鸡体内已经达到饱和状态，C18∶3n-3转化合成C20∶5n-3和C22∶6n-3的效率低，C18∶3n-3直接沉积在体内，很难进一步发生转化。

4 结 论

① 10周龄北京油鸡饲粮中添加膨化亚麻籽与添加9%亚麻籽相比，生长性能和屠宰性能无显著差异，并未显著增加鸡肉n-3PUFA的沉积量。

② 10周龄北京油鸡饲粮中添加9%～15%的膨化亚麻籽，对北京油鸡屠宰性能无显著影响，显著提高了平均日增重和平均日采食量，但显著降低了机体抗氧化水平，产生应激反应。因此综合生产工序及成本，不建议使用膨化亚麻籽作为生产富含n-3PUFA鸡肉的油鸡饲料原料。