胡文香，黄艺璇

（赣州市妇幼保健院产前诊断科，赣州 341000）

胎儿染色体异常在出生缺陷中占比较大，一旦胎儿发生染色体异常影响巨大，会导致孩子智力低下，生长发育迟缓，先天性畸形等，并且大多数异常都不可逆，缺乏有效的治疗措施[1]。基于此，为了减少染色体异常导致的缺陷儿出生率，羊水穿刺应用于产前筛查无创高风险病例之中尤为重要。染色体异常的产前检查是为了准确评估患者携带染色体异常胎儿的风险，而在产前诊断当中最常见的就是染色体异常，有染色体数目异常、染色体结构异常和微结构异常等，数目异常中13号、21号、18号以及X、Y染色体异常最为常见[2]。本文研究羊水穿刺在产前筛查无创高风险病例中染色体异常的产前诊断价值，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019年03月至2021年03月我院收治68例产前筛查无创高风险病例。病例的年龄在21~44岁之间，平均年龄（36.78±5.76）岁；病例孕周13~21周，平均孕周为（17.99±4.97）周；初产妇38例，经产妇30例。本次研究经过我院伦理委员会审核与批准，孕妇已明确知晓羊水穿刺的流程，目的与风险，签署了知情同意书。

纳入标准[2]：按照正常规律自愿接受产前孕检的病例；唐氏筛查结果提示为高风险的病例；自愿接受羊水穿刺的病例；符合随访的病例。单胎妊娠。排除标准：明确拒绝行羊水穿刺的病例；无法获得临床随访的病例；精神异常存在认知功能障碍的病例；严重凝血功能障碍的病例；存在先兆流产症状的病例；合并妇科炎症或肿瘤的病例。

1.2 方法 常规NIPT检测：抽取所有患者早晨空腹状态下静脉血5毫升，以一万rpm离心10分钟处理后提取其中游离DNA，建库、测序，经PCR扩增，利用新一代高通量测序技术实现覆盖度测序，分析遗传信息可得到每种染色体的Z值。正常来说，13、18、21号染色体Z值置于-3.0~3.0区间内为低风险，高于该区间为高风险[3]。

羊水穿刺—核型分析：NIPT检测高风险者知情同意和咨询后，在其孕18~30周实施羊膜腔穿刺术。取出羊水约20毫升，装入两个无菌离心管中，常温下2000 rpm离心处理7分钟，保留1毫升左右的羊水细胞层放置于无菌T形培养瓶内接种，把培养基与细胞液均匀混合后，放置培养箱内培养，环境保持37℃、5%CO2，每9天更换一次新培养基，在细胞繁殖旺盛期提取羊水细胞，经消化、低渗、预固定、固定处理后滴片，G显带，镜下观察，记下二十个分散较好的中期分裂相，随机挑选其中4个进行研究，以人 类 细 胞 遗 传学国际命名体制标准实现核型分析。入组孕妇穿刺前均核查血型，若为Rh阴性，而其配偶为Rh阳性，介入性产前诊断穿刺后应立即注射抗RhD免疫球蛋白[4]。

1.3 观察指标 采取电话随访或查阅产科病例资料的方法，对全部患者在预产期后进行信息确认，记录并统计所有染色体异常的胎儿。

1.4 统计学处理 采取SPSS 21.0统计软件来计算与分析本文的统计结果。计量资料格式为（±s），不同组别的数据对比利用样本t验证；计数数据采用[n（%）]代替，与之实现χ2校验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 随访结果确认情况 68例产前筛查无创高风险病例，临床随访染色体异常有46例（67.65%），其中13-三体综合征1例（2.17%），18-三体综合征4例（8.69%），21-三体综合征25例（54.35%），性染色体异常16例（34.79%）。见表1。

2.2 羊水穿刺分析检出各种三体综合征状况与灵敏度、准确度、特异度 68例随访确认与羊水穿刺-核型分析检出各类型染色体异常情况对比，详见表1；以确认的临床结果为准，羊水穿刺-核型分析判定各种染色体综合征的灵敏度、准确度、特异度对比，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

表1 羊水穿刺-核型分析检出各种三体综合征状况（n=68）

表2 羊水穿刺-核型分析诊断不同染色体异常的效能

2.3 羊水穿刺 核型分析判定总染色体异常状况随访确认的总染色体异常46例，无染色体异常22例；羊水穿刺分析判定总染色体异常43例，无染色体异常17例。见表3。

表3 羊水穿刺-核型分析判定总染色体异常状况

3 讨论

人类具有23对（46条）染色体，其中22对常染色体，1对性染色体，男为XY，女为XX。当染色体数量增加、减少，或染色体结构出现异常，那么极有可能就会出现染色体异常疾病，严重程度与异常程度有关，染色体异常越严重，疾病的表现也就会越重[5]。而染色体异常检查应该基于充分和准确的信息提供之后，由患者自主选择，每个病例都有权进行或拒绝产前遗传筛查和诊断性检查，这一点是毋庸置疑的，本次研究在合法合规的背景下进行，在产前筛查无创高风险病例中染色体异常的产前诊断中行羊水穿刺[6]。无创性胎儿染色体非整倍体检测（NIPT），也称无创产前DNA检测，采集孕妇外周血，提取DNA，采用新一代高通量测序技术，再结合生物信息学分析得出胎儿患染色体疾病风险。但是但由于NIPT筛查结果受到孕多因素影响，准确率降低，因此对于NIPT高风险人群，最好是再次行羊膜腔穿刺术做进一步诊断[7]。“羊膜腔穿刺术”俗称羊水穿刺，是有创介入性产前诊断技术，应用广泛，在超声介导下，用一根细长针穿过孕妇肚皮、子宫壁之后进入羊膜腔，按照规范抽取羊水获得胎儿细胞或DNA，经实验室处理发送报告，从而进行遗传学检查，以此来判断胎儿是否存在染色体异常或者是染色体相关疾病[8]。

13三体综合征（Patau综合征），体细胞基因组额外多出一条13号染色体所引起。18-三体综合征（爱德华兹综合症），是患者多了1条18号染色单体。 21-三体综合征（唐氏综合征），是常规染色体中增加了一条21号染色体。性染色体异常综合征指的是性染色体x或y发生数目异常或结构畸变[9]。

刘慧等[10]认为，对NIPT高风险人群，行羊水穿刺对于染色体异常具有较高诊断价值，可以为优生优育、遗传咨询提供可靠的理论依据参考。于艳[11]等研究，将患者分为羊水穿刺组和NIPT组，羊水穿刺是具备产前诊断指征孕妇首选的诊断方法，能够及时发现染色体异常，慎用NIPT。卜秀芬[12]等认为，染色体微阵列分析对于无创产前检测具有诊断价值，也可作为产前诊断方案。周月云[13]等探讨产前不同诊断指征与孕妇羊水穿刺胎儿核型的关系，研究认为可以为产前诊断提供遗传咨询。在本次结果中，对孕妇实施产前筛查羊水穿刺，总染色体异常的灵敏度93.47%，特异度77.27%，准确度88.24%。故本可看出，用羊水穿刺-核型分析可以有效检出异常核型，能够帮助孕妇选择性分娩健康的胎儿。

综上所述，羊水穿刺对NIPT高风险人群染色体异常诊断价值高，是产前诊断起着重要作用的一种技术，值得临床推广。