刘涛

（山西省朔州市朔城区人民医院 妇产科，山西 朔州 036002）

0 引言

宫颈癌对于妇女是最为常见的恶性肿瘤，位居妇科恶性肿瘤的首位，其发病率非常高，死亡率高，对妇女的生命健康危害居于次位，而我国宫颈癌的患病及死亡占全世界的30%[1,2]。在临床流行病学分析和生物手段监测中，宫颈癌病变的爆发很大程度上与HPV 感染密切相关。故此在日常的体检对于妇女来说，尽早及时筛查hrHPV 对于降低妇女患有宫颈癌的几率大大降低，做到早预防早治疗的目的，可以极大的降低其对人体的危害程度[3,4]。此研究主要是利用超薄液基细胞学检测（TCT)和基因杂交捕获技术（HC2-HPV-DNA）进行筛查朔州地区1000 名妇女,同时运用电子阴道镜下检测技术进行病理活检。研究妇女hrHPV 感染与宫颈癌变的相关性，这对宫颈癌的检测和预防有一定的现实意义。

1 资料与方法

1.1 材料

为了更好的研究HPV 感染与宫颈病变，因此本实验主要在朔州地区选取1000 名在妇科门诊就医的患者，并且对患者的年龄进行一定的筛选，年龄区间在25～60 岁，其中平均年龄集中在40.2 周岁。在这些经过年龄筛查后，将就医的患者细胞首先进行TCT 的检测，在一定的时间后从新获取细胞在接受HC2-HPV-DNA 的检测，排除长时间对检测结果的影响，这两项检查中只要其中一项检查结果异常就给予以活检。

1.2 方法

1.2.1 hrHPV-DNA 检测

对于用此方法来检测，其是目前被公认的检测手段，HC2-HPV-DNA 是世界卫生组织批准认可的一项权威检测手段，被视为HPV 检测的“金标准”。目前公认的13 种HPVDNA 高危亚型被Digene 公司利用杂交捕获试验（HC2)方法已经检测。

1.2.2 采样

采样注意的事项，首先在采样前对患者应进行筛选要保证阴道口没有进行药物处理，同时也不能进行消毒处理；用特定的细胞收集装置收集宫颈管外口的细胞组织，将其放在特定的缓冲液中，储存于4℃冰箱。

1.2.3 检测试剂

本实验检测采用HC2-HPV-DNA 检测试剂盒，并严格按其说明书提供的操作步骤进行操作检测样本。

1.2.4 检测结果的判断

根据样本的读数与阴性值的比值即（RLU/CO），当其比值大于1.0 时代表检测结果为阳性。当其比值小于等于1 时表明为阴性，其HPV-DNA<1pg/mL。

1.2.5 TCT 检查分析

首先用特制的毛刷采集宫口阴道内壁的细胞，然后将收集的细胞组织立即保存在特定的装置中，用特定的处理装置对样品处理，采用TBS（2005）分级系统对收集的细胞组织进行诊断。

1.2.6 病理学检查

首先观察找出病变较严重的地方进行多点采样，观察是否有差异，如果没有明显的差异，则采取常规取样规则按第2、5、8、11 点4处采样检测，结果最终以病检结果为准。

1.3 统计学处理

2 检测结果

2.1 细胞HPV 检测结果

采用HC2-HPV-DNA 方法对13 种高危型HPV 进行检测，检测结果显示：1000 名患者中，100 名为阳性，其阳性率为10%（100/1000） ，900 名为阴性，阴性率90%（900/1000）。结果分析发现，年龄组在40～55 周岁的患者HPV 感染较其他年龄段的多，其P<0.05 差异具有统计学意义。不同年龄段的检测结果如表1。

表1 HPV 在不同年龄段的感染情况（n，%）

2.2 病理诊断结果

检测结果中，将HC2-HPV-DNA 呈阳性的数量与病理检测的阳性结果做比较 ，发现其阳性率为84.5%；而将TCT 检测呈阳性的数量与病理检测结果呈阳性的比较，其阳性率为82.4%。两者检测结果差异不明显，通过计算其P值发现大于0.05，故此其差异无统计学意义。分析病理组织学检查结果发现：在98 例病理诊断为阳性结果中，CIN(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、)、宫颈鳞癌、宫颈腺癌的患者共56 例。其中HC2-HPV-DNA检测结果呈阳性患者为48 例，敏感性为85.71%（48/56)。TCT 检测结果呈阳性患者为50 例，敏感性为89.2%（50/56)。宫颈鳞癌、腺癌的患者3 例，HC2-HPV-DNA 结果2 例为阳性，敏感性为66.7%（2/3)，TCT 结果均为阳性，敏感性为100.0%（3/3）。（表2）

表2 HC2-HPV-DNA 和TCT 两种方法检测结果与病理结果的相关性（例）

2.3 CIN、ICC 与hrHPV 病毒载量的相关性

分析发现炎症组的载量明显低于CIN Ⅰ 、Ⅱ、Ⅲ级宫颈癌hrHPV 的载量，计算其P值小于0.01，数据具有显著差异性。对于病毒载量分析发现，其中的CIN Ⅱ、 Ⅲ级hrHPV 的载量相比于CIN Ⅰ具有很高的水平，同时其P值小于0.05 具有显著差异。计算宫颈癌hrH-PV 的病毒载量与 CIN Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级的病毒载量的P值，发现并差异无统计学意义，详细数据见表3。

表3 hrHPV 病毒载量与 CIN、ICC 关系（±s）

表3 hrHPV 病毒载量与 CIN、ICC 关系（±s）

病理结果 n RLU/CO（pg/mL）炎症组 41 116.2±63.5 CIN Ⅰ 22 293.1±49.1 CIN Ⅱ 19 339.2±58.6 CIN Ⅲ 13 372.2±78.9 ICC 3 306.5±57.9

3 讨论

在临床检测中，发现妇女最为常见的肿瘤是宫颈癌。其中据临床统计数据分析，其中宫颈癌患有将近98.9%的人群感染了HPV，这明显的增加了宫颈癌对于妇女的危害。生物细胞分析发现，HPV 是由双链DNA（8000bp）分子颗粒和衣壳蛋白组成的一种上皮性病毒。HPV 最为常见的传播途径是性传播，同时也可以是环境如医务性传播。据研究表明[5,6]，不同的类型可能还可以加大其他浸润性疾病的发病率，因此尽早的检测是否HPV 感染，对HPV 传播和进一步扩散具有重要意义，也同时可以避免妇女在生殖器官的进一步感染，降低风险避免癌症的进一步发生有着重要的意义。

本研究针对朔州地区的1000 名年龄在25～60 岁不同年龄段的患者进行了HPV 感染测试，对13 种（即16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59 及68）HPV-DNA 高 危 亚型进行检测，结果显示100 名呈现出阳性结果，其阳性率为10.0%（100/1000）。通过对不同年龄段的患者进行统计分析发现，年龄在40～55 岁的感染率明显高于其他年龄段，其比率占69%，计算其P值小于0.05 差异有统计学意义。在年龄段25～40 和55～60 范围内，在前者随着年龄的减小hrHPV 的感染率降低，而后者结果恰好相反。此结果表明中年患者易感染hrHPV，敏感度高、特异性低；并且与CIN 分级间有明显的相关性[7-8]，可以看出来我国宫颈癌变的发生逐渐趋于中年化。

研究显示HC2 对于HPV 是一个较为有效的检测方法，同时可以有效的预防宫颈病变的发生。HC2 检测具有相当高的敏感性，其主要是采用全长的RNA 探针进行检测。由表2可知，在100 名阳性患者中，其中患有CIN Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级以及宫颈腺癌和鳞癌的患者提高达56 例，其占比为56.0%；对应着CIN Ⅰ、CIN Ⅱ、CIN Ⅲ、宫颈鳞癌 、宫颈腺癌HPV 检测结果阳性患者为48 例，敏感性为85.71% （48/56）。与我国对HC2宫颈高度病变灵敏度高达 85%～100% 的研究结果相一致[9]。宫颈腺癌、鳞癌的检测呈阳性的有3 例，TCT 检测均为阳性，敏感性为100.0%（3/3),HC2-HPV-DNA 结果2 例为阳性，敏感性为66.7%（2/3)。

研究结果显示，细胞学诊断与高危型HPV 检测是临床检测较为有效快速的一种检测方法。HC2-HPV-DNA 呈阳性的数量与病理检测的阳性结果做比较,发现其阳性率为84.5%。而将TCT 检测呈阳性的数量与病理检测结果呈阳性的比较，其阳性率为82.4%， 两者检测结果差异不明显，通过计算其P值发现大于0.05，故此其无统计学意义，故此将两种方法结合起来共同检测可以提高检测准确率。

本研究通过对朔州地区1000 名妇女进行高危型HPV 感染与宫颈病变的关联性探究后发现：HC2-HPV-DNA 对于宫颈癌及癌前病变的检测是有效的，且这种方法可以有效的检测筛选出病变组织细胞，对预防癌症有很大的帮助。对于不同的年龄段25～40 和55～60 范围内，在前者随着年龄的减小hrHPV 的感染率降低，而后者结果恰好相反，患者主要集中在40～60 岁之间，不同年龄段hrHPV 感染会有不同；最终,运用HPV 检测的结果同时结合宫颈细胞组织进行联合病理检查，可以有效地应用于临床检测和防控和减小宫颈癌及癌的发生很有意义。