朱 艳 陈学东 南方医科大学珠江医院，广东省广州市 510280

分析2010—2018年8篇关于24h尿不同保存方法对生化检测结果影响的文献，在是否需加防腐剂保存的问题上存在一定的争议[1-8]。本文对收集24h尿液室温保存是否添加防腐剂对常规生化检测项目结果的影响进一步探讨，希望能够为临床检测24h尿生化提供安全、操作简便的尿液保存方法。

1 对象与方法

1.1 实验对象 从2018年10月18日—12月1日收集了30例珠江医院肾内科患者24h尿液样本，其中男16例，女14例，年龄12～72岁。

1.2 仪器与试剂 仪器为深圳迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪，试剂除项目mTP为中山标佳试剂外，其他项目试剂均为深圳迈瑞检测试剂盒及配套校准品质控品。本次研究尿液生化检测项目有钾(K)、钠(Na)、氯(Cl)、钙(Ca)、无机磷(P)、尿素(UREA)、肌酐—苦味酸法(CREA-J)、肌酐—酶法(CREA-S)、尿酸(UA)、尿总蛋白(mTP)、尿蛋白定量(TPUC)、尿微量白蛋白(mALB)、葡萄糖(GLU)。

1.3 实验方法

1.3.1 样本收集：患者早上7点排空尿液后开始收集至第2天早上7点排出的所有尿液，将同一时间收集的尿液样本混匀后等份分于加防腐剂与不加防腐剂的6L收集容器中，室温保存(22～26℃)，收集完24h尿液后，将两个容器内的尿液充分混匀，分别取5ml于试管内离心后取上清液检测。

1.3.2 检测方法：K、Na、Cl检测方法为离子选择电极法，Ca检测方法为偶氮胂Ⅲ法，P检测方法为磷钼酸法，UREA检测方法为紫外—谷氨酸脱氢酶法，CREA检测方法为苦味酸法和酶法，UA检测方法为尿酸酶—过氧化物酶法，mTP检测方法为邻苯三酚红钼法，TPUC检测方法为邻苯三酚红钼法，mALB 检测方法为免疫透射比浊法，GLU检测方法为己糖激酶法。分析加防腐剂和不加防腐剂两种不同保存方法收集24h尿液样本检测生化常规项目结果的一致性。

1.4 统计学方法 采用SPSS20.0统计软件进行相关性和配对t检验分析。相关性分析P<0.01为两组数据显著相关，配对t检验分析P<0.05为两组数据差异有统计学意义。采用Analyse-it统计软件进行Bland-Altman分析，两组结果差异位于95%一致性界限内，且最大差值和最小差值在临床可接受范围内，认为两组检测结果间具有较好的一致性。为保证结果的准确性，剔除线性范围下限的数据。

2 结果

2.1 配对t检验分析 24h尿室温保存加防腐剂与不加防腐剂两种不同的保存方法，以下1～12组数据比较差异均无统计学意义(P>0.05)。 GLU样本例数少， 统计结果仅作为参考。见表1。

表1 配对样本t检验统计结果

2.2 相关性分析 24h尿室温保存加防腐剂与不加防腐剂两种不同的保存方法，以下1～12组数据均具有显著相关性(P<0.01)。见表2。

表2 相关性统计分析结果

2.3 Bland-Altman测量结果一致性分析 从图1可以看出，1～12个项目存在1个(3.3%)～3个(10.3%)不等的点落在95%一致性界限外；在一致性界限范围内差值的最大值和最小值(见图中的黑色实心点和表 3中相差百分比)，以卫生部室间质评总允许误差来判断，均在允许误差范围内(表3)；从统计图上看，各图代表差值均数的实线都非常接近代表差值均数为0的虚线。因此12个项目两种保存方法测试结果具有较好的一致性。

图1 Bland-Altman测量结果一致性统计图

表3 Bland-Altman测量结果一致性统计表

3 讨论

24h尿液样本的生化检测项目是临床上用于诊断和参考的重要指标，如24h尿蛋白检测是美国肾脏基金会—肾脏病预后质量倡议(NKF-KDOQI)2002制定的慢性肾脏疾病的临床实践指南推荐的诊断蛋白尿的金标准[9]。2012年国际肾脏病组织“肾脏病：改善全球预后”(KDIGO)制定的慢性肾脏疾病(CKD)临床实践指南推荐将24h尿白蛋白排泄率(AER)作为CKD患者尿蛋白分级的依据[10]。美国国家医学院和泛美卫生组织(PAHO)都建议将24h尿钠排泄量作为评估钠摄入量的金标准[11-12]。24h尿液标本如室温保存需要选择适当的防腐剂，尿液生化项目检测常用的防腐剂为甲苯或二甲苯，其作用机理是通过浮于液面而隔绝空气，进而起到防腐作用[13]。防腐剂在用量上有严格的规定(每0.1L尿液加入0.5ml甲苯)，临床上很难掌控其用量，而且防腐剂本身也具有一定的毒性，使用时存在安全隐患。

本研究显示24h尿液室温保存加防腐剂与不加防腐剂(二甲苯)两种保存方法，12组检测项目结果配对t检验分析比较差异均无统计学意义(P>0.05)，相关性分析检测结果间具有显著相关性(P<0.01)，以及Bland-Altman一致性分析显示检测结果间具有较好的一致性，可以使用室温(22～26℃)保存不加防腐剂收集24h尿液样本的方法检测本研究中的12项生化项目。该方法安全，操作更简便，方法可行，建议在本院临床推广使用。

12组配对t检验分析差异无统计学意义(P>0.05)，且加防腐剂与不加防腐剂各组数据均具有高度相关性，相关系数r值均在0.9以上，这与文献[1-6]报道的常温不加防腐剂保存24h尿液可在临床推广使用的结果一致。但是也有研究表明，未加防腐剂标本24h前后比较，结果发现24h后测定均值明显低于即刻测定均值(P<0.01)，可能是细菌分解尿蛋白造成[7-8]。我国地域广阔，各医院临床室温控制条件不尽相同，应根据当地的实际情况综合考虑，为临床推荐可行、安全、简便的24h尿液收集保存方式。

尿Cl组检测结果的t检验分析P值为0.086，接近P<0.05差异有统计学意义的判断准则，但从Bland-Altman两种方法一致性分析数据来看，在一致性界限内的相对偏差点均匀地分布于差值均值的两侧，且均在可接受范围内，可认为该组数据检测结果间具有较好的一致性。

尿GLU组，从Bland-Altman测量结果一致性分析看，在一致性界限范围内差值的最小值(-27.7%)已超出卫生部室间质评总允许误差(±20%)，且从统计图上看，代表差值均数的实线(-7.88%)与代表差值均数为0的虚线距离较远，检测结果间一致性较差。由于本次研究采集的样本并非针对糖尿病肾病患者，大部分样本的尿糖低于线性范围下限(0.6mmol/L)，有效数据仅有8例，统计结果仅作为参考。