滕海媛 张天澍 常晓丽 顾浩天 王冬生 袁永达

摘要 ：为了筛选对梨瘿蚊幼虫具有高毒性并对天敌异色瓢虫安全的杀虫剂，采用浸渍法测定了7种杀虫剂对梨瘿蚊幼虫的毒力;采用滤纸接触法测定了7种杀虫剂对天敌异色瓢虫1龄幼虫和成虫的毒力，并评价这些药剂对异色瓢虫的安全性。结果表明，药剂处理48 h后对梨瘿蚊幼虫毒力从大到小依次为2.5%高效氯氟氰菊酯EW（5.540 mg/L）>5%氯虫苯甲酰胺SC（10.015 mg/L）>60 g/L乙基多杀菌素SC（33.224 mg/L）>2.2%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐ME（214.644 mg/L）>45%毒死蜱EC（231.876 mg/L）>150 g/L茚虫威EC（401.490 mg/L）>10%虫螨腈SC（404.147 mg/L）。药剂处理24 h后，7种杀虫剂对天敌异色瓢虫1龄幼虫和成虫的毒力测定结果基本一致，60 g/L乙基多杀菌素SC毒力最低，2.2%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐ME、2.5%高效氯氟氰菊EW和45%毒死蜱EC的毒力均高于其他4种杀虫剂。结合益害毒性比和安全系数，5%氯虫苯甲酰胺SC和60 g/L乙基多杀菌素SC对梨瘿蚊毒力高而对异色瓢虫毒力低，适合应用于梨瘿蚊的化学防治和生物防治相结合的防治策略。

关键词 ：杀虫剂; 梨瘿蚊; 异色瓢虫; 毒力; 安全性评价

中图分类号：

S 482.3

文獻标识码： B

DOI： 10.16688/j.zwbh.2020016

Toxicity of seven insecticides on Dasineura pyri and safety

evaluation to predator Harmonia axyridis

TENG Haiyuan， ZHANG Tianshu， CHANG Xiaoli， GU Haotian， WANG Dongsheng*， YUAN Yongda*

（Eco-Environmental Protection Research Institute， Shanghai Academy of Agricultural Sciences， Shanghai 201403， China）

Abstract

In order to screen insecticides with high toxicity to Dasineura pyri and safety to its natural enemy Harmonia axyridis， toxicities of seven insecticides to D.pyri and H.axyridis were evaluated by dipping method and filter paper contact test， respectively. The results showed that after treatment on D.pyri larvae for 48 h， the median lethal concentrations （LC50） values ranked as lambda-cyhalothrin 2.5% EW （5.540 mg/L）>chlorantraniliprole 5% SC （10.015 mg/L）>spinetoram 60 g/L SC （33.224 mg/L）>emamectin benzoate 2.2% ME （214.644 mg/L）>chlorpyrifos 45% EC （231.876 mg/L）>indoxacarb 150 g/L EC （401.490 mg/L）>chlorfenapyr 10% SC （404.147 mg/L）. After treatment for 24 h， the toxicities of seven insecticides to the 1st instar larvae of H.axyridis were consistent with those to the adults of H.axyridis， spinetoram 60 g/L SC was the lowest， emamectin benzoate 2.2% ME， lambda-cyhalothrin 2.5% EW and chlorpyrifos 45% EC were more toxic than the other four insecticides. Overall， taken both the toxicity ratio and safety coefficient into account， chlorantraniliprole 5% SC and spinetoram 60 g/L SC had high toxicity to D.pyri low ecological risk against Haxyridis， which are the recommended candidates for the integrated pest management against D.pyri.

Key words

insecticide; Dasineura pyri; Harmonia axyridis; toxicity; safety evaluation

梨瘿蚊Dasineura pyri （Bouche）属双翅目瘿蚊科，又称梨卷叶瘿蚊、梨芽蛆，是梨树的主要害虫之一。早期在英国、法国、德国、荷兰、挪威、瑞典、丹麦、瑞士、意大利、新西兰和美国均有梨瘿蚊的记录[12]。1981年在我国安徽省安庆、宣城、巢湖等地发现该虫且为害严重[3]。2000年以后该虫在我国为害范围和为害程度逐渐增加[46]，成为梨树栽培中急需解决的重要问题。

在梨瘿蚊的各种防治技术中，化学防治是速度最快、效果较好的一种防治方法。梨瘿蚊的化学防治常用药剂包括77.5%敌敌畏乳油、 40%毒死蜱乳油、5%高效氯氟氰菊酯乳油、3%啶虫脒可湿性粉剂、5%阿维菌素乳油、10%吡虫啉可湿性粉剂等[711]。传统农药施药量大、毒性高，对环境中的水土造成污染。因此，迫切需要筛选高效低毒对环境友好的可用于果树害虫防治的农药。

生物防治是害虫综合治理中的重要组成部分。高效利用天敌生物，可将害虫数量控制在经济阈值以下[12]。异色瓢虫Harmonia axyridis （Pallas）（鞘翅目：瓢甲科）是梨树上的重要捕食性天敌[1314]，也是梨园中梨瘿蚊的主要捕食者[14]。关于异色瓢虫捕食梨瘿蚊已有部分研究[15]，但是化学药剂对异色瓢虫的安全性评价方面的报道较少，新的防治梨瘿蚊杀虫剂对天敌安全性方面的研究比较欠缺，这也为生物防治在生产中运用带来了困难。

本研究选择的7种杀虫剂是可用于果园中害虫防治的药剂。本研究的目的是通过测定7种杀虫剂对梨瘿蚊和异色瓢虫的毒力，评价药剂对害虫的毒力水平和对瓢虫的安全性，筛选出对害虫高效、对天敌安全的药剂，从而有效控制害虫、减少化学品投入和对水土环境的影响。

1 材料与方法

1.1 供試虫源

1.1.1 梨瘿蚊

于2019年5月18日，在位于江苏省苏州市吴中区的梨园，随机采集梨树（‘翠冠梨）上的梨瘿蚊幼虫虫瘿。选择大小一致的幼虫作为供试虫源。

1.1.2 异色瓢虫

异色瓢虫卵购自北京阔野田园生物技术有限公司，将其在上海市农业科学院生态环境保护研究所养虫室内扩繁。异色瓢虫的养殖参照肖达等[16]的方法，略有修改。饲养过程为：种植大量蚕豆苗，将豆蚜Aphis craccivora Koch接于蚕豆苗进行扩大繁殖。将带有豆蚜的蚕豆苗放入一面是尼龙网（120目）的塑料盒（13.5 cm×23 cm×18 cm）中，同时将异色瓢虫卵块放入盒中。卵块孵化后直至成虫均在塑料盒中饲养。将养虫盒放入温度（26±1）℃，相对湿度为（60±5）%，光周期为L∥D=16 h∥8 h的养虫房，选择异色瓢虫1龄幼虫和1日龄成虫进行生物测定。

1.2 供试药剂

150 g/L茚虫威乳油（EC），5%氯虫苯甲酰胺悬浮剂（SC），美国杜邦公司;60 g/L乙基多杀菌素悬浮剂（SC），45%毒死蜱乳油（EC），美国陶氏益农公司;10%虫螨腈悬浮剂（SC），巴斯夫欧洲公司;2.2%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐微乳剂（ME），浙江海正化工股份有限公司;2.5%高效氯氟氰菊酯水乳剂（EW），先正达南通作物保护有限公司。

1.3 7种杀虫剂对梨瘿蚊的毒力测定

采用浸渍法[17]。将采集到的带有梨瘿蚊的新鲜叶片放在显微镜下，用昆虫针剔除叶片上其他害虫，保留虫体大小一致、龄期相近的梨瘿蚊低龄幼虫。将7种药剂用含0.1% Triton X-100（以促进杀虫剂活性成分均匀分布处理叶片）的蒸馏水分别稀释成6个系列质量浓度，用含0.1% Triton X-100的蒸馏水作为对照[18]。试验设置43个处理，每10片叶作为一个重复，每个处理重复4次。将带虫叶片浸入不同浓度的药液中30 s，取出晾干后放入有湿滤纸的培养皿中，置于温度（25±1）℃，湿度（60±5）%的培养箱中培养，处理48 h，在显微镜下检查幼虫存活情况，统计活虫数和死虫数。用昆虫针轻轻触碰虫体，不动者计为死亡。

1.4 7种杀虫剂对异色瓢虫的毒力测定

异色瓢虫幼虫毒力测定采用滤纸接触法[19]。根据预试验的结果，将各杀虫剂用含0.1% Triton X-100稀释成6个系列质量浓度，用含0.1% Triton X-100的蒸馏水作为对照。试验设置43个处理，每处理重复4次。取直径为9 cm的滤纸放入塑料培养皿中，将1 mL药液均匀滴在培养皿内的滤纸上（按每667 m2施药量100 L计算而得）。滤纸自然晾干后，取10头1龄异色瓢虫幼虫放入含有药液的滤纸上，盖上培养皿盖子，放入温度为（26±1）℃，相对湿度（60±5）%，光周期为L∥D=14 h∥10 h的人工气候培养箱中。24 h后检查异色瓢虫幼虫的存活情况，以试虫不能正常爬行视为死亡。

7种杀虫剂对异色瓢虫成虫的毒力测定方法与幼虫测定相同。

1.5 7种杀虫剂对异色瓢虫的安全性评价

以杀虫剂的田间推荐使用浓度与异色瓢虫致死中浓度LC50相比，求得安全系数，评估药剂对异色瓢虫的安全程度。以杀虫剂对异色瓢虫的致死中浓度LC50与对梨瘿蚊的致死中浓度LC50相比，求得益害毒性比[19]。

1.6 数据统计与分析

毒力测定中，幼虫死亡率、校正死亡率按以下公式计算：

死亡率=死亡虫数处理总虫数×100%;

校正死亡率=处理死亡率-对照死亡率1-对照死亡率×100%。

根据试验所得数据，利用POLO软件[20]计算出致死中浓度（LC50）及其95%置信区间和斜率，95%置信区间不重叠时表明参数之间差异显著。

2 结果与分析

2.1 7种杀虫剂对梨瘿蚊幼虫的毒力

7种药剂对梨瘿蚊幼虫的LC50（见表1），梨瘿蚊幼虫对7种杀虫剂的敏感性由高到低的顺序为：25%高效氯氟氰菊酯EW、5%氯虫苯甲酰胺SC、60 g/L乙基多杀菌素SC、2.2%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐ME、45%毒死蜱EC、150 g/L茚虫威EC、10%虫螨腈SC。梨瘿蚊幼虫对2.5%高效氯氟氰菊酯EW敏感性最强，LC50为5.540 mg/L，5%氯虫苯甲酰胺SC次之，LC50为10.015 mg/L，对10%虫螨腈SC的敏感性最低，LC50为404.147 mg/L。

从相对毒力指数可以看出，2.5%高效氯氟氰菊酯EW相对毒力指数最高，为4 185.49，其次是5%氯虫苯甲酰胺SC，相对毒力指数为2 315.29，60 g/L乙基多杀菌素SC相对毒力指数为697.92，2.2%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐ME相对毒力指数为108.03，其他两个药剂的相对毒力指数均低于对照药剂45%毒死蜱EC。

2.2 7种杀虫剂对异色瓢虫幼虫的毒力

7种杀虫剂中2.2%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐ME对异色瓢虫幼虫的毒力最高，LC50为0.043 mg/L，其次是2.5%高效氯氟氰菊酯EW，60 g/L乙基多杀菌素SC对其毒力最低，LC50为296.745 mg/L。相对毒力指数顺序为2.2%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐ME>2.5%高效氯氟氰菊酯EW>45%毒死蜱EC>10%虫螨腈SC>150 g/L茚虫威EC>5%氯虫苯甲酰胺SC>60 g/L乙基多杀菌素SC（表2）。

由表3可知，7种杀虫剂对异色瓢虫成虫的毒力大小顺序为45%毒死蜱EC>2.2%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐ME>2.5%高效氯氟氰菊酯EW>10%虫螨腈SC>5%氯虫苯甲酰胺SC>150 g/L茚虫威EC>60 g/L乙基多杀菌素SC。45%毒死蜱EC对异色瓢虫成虫的毒力最高，LC50为8.207 mg/L， 60 g/L乙基多杀菌素SC毒力最低，LC50为8 065.928 mg/L。

2.3 7种杀虫剂对异色瓢虫的安全性评价

从7种药剂对异色瓢虫幼虫的安全系数看（表4），60 g/L乙基多杀菌素SC的安全系数最高，对异色瓢虫较为安全，而其他6种药剂对异色瓢虫的安全系数均较低，顺序为5%氯虫苯甲酰胺SC>150 g/L茚虫威EC>10%虫螨腈SC>2.5%高效氯氟氰菊酯EW、2.2%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐ME>45%毒死蜱EC。安全系数和益害毒性比的结果表明，60 g/L乙基多杀菌素SC对异色瓢虫较为安全。

从7种药剂对异色瓢虫成虫的安全系数看（表5），60 g/L乙基多杀菌素SC的安全系数最高，对异色瓢虫成虫较为安全，45%毒死蜱EC对异色瓢虫成虫的安全系数最低，其他杀虫剂的安全系数顺序为150 g/L茚虫威EC>5%氯虫苯甲酰胺SC>2.2%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐ME>10%虫螨腈SC>2.5%高效氯氟氰菊酯EW。7种杀虫剂的益害毒性比的顺序为：60 g/乙基多杀菌素SC>5%氯虫苯甲酰胺SC>2.5%高效氯氟氰菊酯EW>150 g/L茚虫威EC>10%虫螨腈SC>2.2%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐ME>45%毒死蜱EC。

3 讨论

在IPM计划中使用的最理想杀虫剂是对害虫有毒性，但对天敌无毒[21]。在没有这种杀虫剂的情况下，最好的选择是使用对捕食者选择性最低的杀虫剂。杀虫剂对天敌瓢虫的毒力作用，已有研究表明，氯虫苯甲酰胺对异色瓢虫2龄幼虫的LC50（36.67 mg/L）值低于防控田间靶标害虫时的推荐剂量，对异色瓢虫2龄幼虫毒性较高[22]。与本研究结果不一致，可能是与两者测定方法、虫龄、作用时间以及异色瓢虫种群来源不同有关。另外， DI VITANTONIO等[23]的研究显示，经短期和长期暴露于乙基多杀菌素残留物中（66.67 mg/L）后，異色瓢虫和二星瓢虫 Adalia bipunctata （Linnaeus）幼虫和成虫的死亡率与对照组相近，说明乙基多杀菌素对异色瓢虫的危害相对较小。张怀江等[24]报道，35%氯虫苯甲酰胺对七星瓢虫的直接杀伤作用在16%以下，毒性较小。这些均与本试验结果相近。在本试验测试的7种杀虫剂中，5%氯虫苯甲酰胺SC、60 g/L乙基多杀菌素SC对异色瓢虫幼虫和成虫的选择性均较低，是比较安全的杀虫剂。在应用这两种杀虫剂对梨瘿蚊幼虫进行防治时，可同时释放天敌异色瓢虫进行协同防治。

杀虫剂对瘿蚊科害虫防治中，毕海燕等[25] 的研究显示，40%毒死蜱EC和5%高效氟氯氰菊酯EC防效均达到80%以上，具有较好的防效。周慧等[17]报道6%乙基多杀菌素SC对康瘿蚊 Contarinia maculipennis Felt幼虫的毒力（LC50=26.28 mg/L）较高，有较好的防治效果，与本研究相似（LC50=3324 mg/L）。研究结果表明，可将新型杀虫剂氯虫苯甲酰胺和乙基多杀菌素应用在梨瘿蚊的防治中。由于本研究仅进行了杀虫剂室内生物测定，后续应对杀虫剂和天敌释放进行田间协调防治效果的研究，以全面评估其对梨瘿蚊的防治效果。

参考文献

[1] BARNES H F. Studies of fluctuations in insect populations， V. The leaf-curling pear midge， Dasyneura pyri （Cecidomyidae） [J].Journal of Animal Ecology， 1935， 4（2）： 244253.

[2] MUNDINGER F G. A newly observed insect pest in Hudson Valley pear orchards [J]. Journal of Economic Entomology， 1932（25）： 728729.

[3] 蔡平.梨瘿蚊研究初报[J].安徽农学院学报， 1984（1）：6065.

[4] 何子顺， 赵广， 李养义， 等. 梨瘿蚊在中国的蔓延与分析[J].北方果树， 2019（3）：14.

[5] 侯启昌， 崔改泵.中原地区梨瘿蚊的生物学特性及防治研究[J].植物保护， 2010， 36（5）：154156.

[6] 凌学林，吉海龙，王舒悦.昆山地区梨瘿蚊的发生及绿色防控技术[J]. 农业灾害研究，2018， 8（1）： 1718.

[7] OLTEAN I， GHIZDAVU I， PORCA M， et al. Researches regarding the chemical killing of Dasyneura pyri species [J]. Bulletin of the University of Agricultural Sciences and Veterinary Medicine， 2002， 57： 163165.

[8] 蒙华贞，杨翠芳. 梨瘿蚊的发生及防治试验初报[J].中国南方果树， 2004， 33（2）： 5758.

[9] 侯启昌. 中原地区梨瘿蚊的发生特点及防治[J]. 北方果树， 2009（5）：1213.

[10]范文忠. 不同药剂对梨卷叶瘿蚊的毒力测定和田问药效试验[J]. 北方园艺， 2010（1）： 180181.

[11]吴传伟， 胡琼， 张海松， 等. 梨花瘿蚊防治适期及药剂筛选试验[J]. 中国植保导刊， 2013， 33（2）：3334.

[12]SYMONDSON W O C， SUNDERLAND K D， GREENSTONE M H. Can generalist predators be effective biocontrol agents？ [J].Annual Review of Entomology， 2002（47）： 561594.

[13]江奇卿，张晓阳，金健， 等. 江西梨瘿蚊发生与综合防治技术[J]. 生物灾害科学， 2015（1）： 2730.

[14]杜浩，高旭辉，刘坤，等.异色瓢虫对梨瘿蚊幼虫的捕食功能反应及捕食偏好[J].中国生物防治学报， 2017， 33（6）：811816.

[15]费关键， 张默， 刘万峰. 梨树新虫害梨瘿蚊防治技术[J]. 陕西农业科学， 2013（1）： 278279.

[16]肖达， 郭晓军， 王甦， 等.三种杀虫剂对几种昆虫天敌的毒力测定[J]. 环境昆虫学报， 2014，36（6）： 951958.

[17]周慧， 李培征， 陈施明， 等. 6种杀虫剂对康瘿蚊幼虫室内毒力测定及田间药效试验[J].南方农业学报， 2015，46（2）： 260264.

[18]CHE Wunan， HUANG Jianlei， GUAN Fang， et al. Cross-resistance and inheritance of resistance to emamectin benzoate in Spodoptera exigua （Lepidoptera： Noctuidae） [J]. Journal of Economic Entomology， 2015， 108（4）： 20152020.

[19]王小藝， 沈佐锐. 四种杀虫剂对桃蚜和异色瓢虫的选择毒性及害虫生物防治与化学防治的协调性评价[J]. 农药学学报， 2002， 4（1）： 3438.

[20]LeOra Software. PoloPlus， a users guide to probit and logit analysis [DB]. LeOra Software， Berkeley， CA. 2003.

[21]PLAPP F W， BULL D L. Toxicity and selectivity of some insecticides to Chrysopa carnea， a predator of the tobacco budworm [J].Environmental Entomology， 1978（7）： 431434.

[22]娜娃兹. 氯虫苯甲酰胺和氟啶虫胺腈对捕食性天敌异色瓢虫的潜在影响研究[D].武汉： 华中农业大学， 2018.

[23]DI VITANTONIO C， DEPALO L， MARCHETTI E， et al. Response of the European ladybird Adalia bipunctata and the invasive Harmonia axyridis to a neonicotinoid and a reduced-risk insecticide [J].Journal of Economic Entomology， 2018， 111（5）： 20762080.

[24]张怀江， 仇贵生， 闫文涛， 等. 氯虫苯甲酰胺对苹果树主要害虫的控制作用及天敌的影响[J]. 环境昆虫学报， 2011， 33（4）： 493501.

[25]毕海燕， 朱晓锋， 阿布都克尤木·卡德尔， 等. 不同药剂对枣瘿蚊的防治效果评价[J]. 新疆农业科学， 2014， 51（5）： 915919.

（责任编辑：田 喆）