胡咏梅

(广州市荔湾区人民医院，广东 广州 510370)

0 引言

分析前质量保证是临床实验室质量保证体系中最重要的环节之一，样本的正确采集是分析前质量保证的一个主要内容。而选用什么样的采血管是分析前样本采集中保证检验结果准确性的关键环节。

肌酸激酶(CK) 广泛存在人体组织中，其大部分分布在骨骼肌、心肌，CK 包括CKBB、CKMM 和CKMB 三种同工酶，其中CKMB 主要分布在心肌中，CKMB 升高是心肌损害的特异性指标之一，对早期急性心肌诊断价值高，已广泛运用于临床诊断。但由于CKMB 酶活性存在不稳定性，且抵抗干扰能力弱，对患者的真实水平反映不够灵敏、准确和稳定。CKMB 质量测定(以下简称CKMBmass)，可以不受CKBB、巨CK 以及腺苷酸激酶等的干扰[1]，特异性大大提高；胸痛发作的最初6 小时内，敏感性明显优于CKMB 酶活性测定法；检测CKMB 的质量浓度比检测CKMB 的酶活性更加适合心肌梗死患者[2]，对微小心肌梗死的诊断价值明显优于传统的活性检测。

CKMBmass 是心肌类疾病生化项目的新方法学[3]，本文旨在研究CKMBmass 分析前样本采血管的应用与选择，同时比较和讨论CKMB 和CK 分析前样本采血管的应用与选择，正确选用适合CKMBmass、CKMB 和CK 检测的采血管，让检测结果更接近人体的真实水平，为临床医生呈现检测者准确无误的机体指标水平。

本文采用促凝管、枸橼酸钠抗凝管、肝素抗凝管和EDTA-K2抗凝管检测CK-MB mass(酶质量)、CKMB(酶活性)和CK 酶活性)，并对检测结果进行两两比较，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

随机抽取本院 2020 年1-10 月健康体检人员160 例为对照组，其中男78 例，女82 例，年龄22-62 岁，45(34.0，51.7)岁。纳入标准：意识清晰，积极配合，肝肾功能正常。排除标准：合并严重感染性疾病患者；凝血功能障碍患者；先天性心脏病患者；近期接受药物相关治疗者等等。抽取本院临床上有血脂异常、肝病、肾病、心肌损伤疾病、血糖异常患者为疾病组(共160 例)，其中男75 例，女85 例，年龄24-72 岁，51.5(39，59)岁。为了本研究正常值水平和异常值水平的3 个指标不同水平浓度数值，故设对照组和疾病组。

1.2 仪器与试剂

选用东芝120-RF 生化仪，CKMBmass(胶乳免疫比浊法，北京九强生物技术股份有限公司)，CKMB 和CK(DGKC 优化比色法，上海执诚生物科技有限公司)，采血管选用促凝、枸橼酸钠、肝素和EDTA-K2 4种采血管(均为成都瑞琦医疗科技有限责任公司生产)。

1.3 方法

1.3.1 样本采集与检测

同时收集同一患者或体检人员的4 种采血管样本。将不同的样本在相同的条件下同时按照相关SOP 文件置生化仪检测。

1.3.2 统计学方法

采用 SPSS 23.0 进行统计分析。采用Shapiro—Wilk 方法判断数据是否为正态分布，非正态分布的数据用中位数P50(P25，P75)来表示；组间数据采用非参数多个相关样本比较的 Friedman M 检验，以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

对照组和疾病组中各样本类型的中位数结果如表1所示。

表1 不同抗凝管血液样本检测结果的比较中位数P50(P25，P75)

各组的数值差异两两比较结果如表2 所示，具体表述如下：

表2 组间数据两两比较差异，以P＜0.05 为差异有统计学意义

(1)每个两两比较组与生化指标对应的对照组和疾病组的结果P值均为一致性，即对照组和疾病组的结果均P值＞0.05 或P值＜0.05；

(2)CKMBmass 检测结果在枸橼酸钠和EDTA-K2 管中存在差异，在其它两两比较组别均无差异；

(3)CKMB 检测结果在促凝-枸橼酸钠组、枸橼酸钠-肝素组和枸橼酸钠-EDTA-K2 组均存在差异，在其它两两比较组别均无差异；

(4)CK 检测结果在促凝-枸橼酸钠组、枸橼酸钠-肝素组和枸橼酸钠-EDTA-K2 组均存在差异，在其它两两比较组别均无差异。

3 讨论

不同采血管分离的血液标本大致分为三类，分别为血清、血浆和全血，这三种标本有着明显的区别，血清是血液发生凝固后血凝块发生回缩析出的淡黄色透明液体，血浆是血液加抗凝剂后离心所得的无细胞上清液[4]。

血清经过凝固后，其原本含有的凝血因子、纤维蛋白原及少量参与血凝的其他血浆蛋白质会被消耗，并且凝固过程中可能对血细胞产生挤压，使细胞内的物质释放出来，还增添了少量血凝时由血小板释放出来的物质，从而影响检测结果。

肝素是一种含有硫酸基团的黏多糖，它和抗凝血酶Ⅲ相结合，促进其对凝血因子Ⅻ、Ⅺ、Ⅸ、X 和凝血酶活性的抑制作用，并有阻止血小板聚集等多种抗凝作用[5]；EDTA 盐和枸橼酸盐可以和血液中钙离子结合形成螯合物，从而使钙离子失去凝血作用，阻止血液凝固；从以上分析原理可以得知，肝素与其余2 种抗凝剂的抗凝机制完全不同。

本文研究显示，CKMBmass 在血清(促凝)和肝素管中的检测结果无差异，CKMBmass 为免疫比浊法，说明肝素基本上不干扰免疫比浊法的CKMB 质量检测；有报道称肝素可能对 CK、CKMB 测定有干扰，由于CKMB 采用免疫抑制法，其原理是用抗体结合CK 分子的M 亚基后测定B 亚基的活性，即认为是由于肝素干扰了此项测定方法，或是对B 亚基也造成抑制现象[6]。也有研究报道，在低浓度CK、CKMB 下，添加了肝素的样本显现出干扰效应，即由于采血困难及采血量不够等多种原因，使肝素锂浓度达到或超过31.25U/mL 时可使CK 及CKMB 结果严重偏低产负扰[7]。本研究未见肝素干扰CK 或CKMB 的检测；目前国内报道肝素对CK 或CKMB 的影响情况不一，王倩[8]等研究显示肝素对CK 检测有影响，张佳昌[9]与吴燕琴[10]等研究表明肝素对CK 无影响。

本研究显示，枸橼酸钠管中CKMB 和CK 的结果与其它3种采血管的结果有差异，这与2019 年赖巧斌[11]的报道相符，原因可能为枸橼酸钠容易使血液碱化，从而影响检测结果。

综上所述，本研究探讨4 种不同的采血管对CKMBmass、CKMB 及CK 检测结果的影响，结果的差异性与对照组和疾病组的分组无关。检测结果显示，CKMBmass 检测结果在枸橼酸钠和EDTA-K2 管中均存在差异，不建议采用枸橼酸钠和EDTA-K2 管检测CKMBmass；CKMBmass 检测结果在促凝管和肝素管中均无差异，可使用促凝管和肝素管检测CKMBmass；CKMB 和CK 检测结果均在促凝-枸橼酸钠组、枸橼酸钠-肝素组和枸橼酸钠-EDTA-K2 组存在差异，不建议采用枸橼酸钠和EDTA-K2 管检测；CKMB 和CK 检测结果在促凝管和肝素管中均无差异，可使用促凝管和肝素管检测CKMB 和CK。