康乐，耿菁

宝鸡市中心医院皮肤科，陕西 宝鸡 721000

白癜风属于后天获得性皮肤病，主要以色素脱失斑为主要临床表现，目前该病发病机制与病因仍不明确。有学者认为，白癜风患者通常伴有其他免疫性疾病，认为白癜风的发病与患者自身免疫功能有一定关系[1]。免疫性疾病与人体T细胞功能失衡有着一定关系，T细胞在人体中主要起到识别、传递及处理抗原的作用，让人体各类细胞因子之间维持平衡，保持生理功能的正常运转维持自身免疫功能。有研究指出，T细胞与白癜风患者皮肤黑色素的破坏有着密切关系，且细胞免疫因素在白癜风的发病中可能起到相关作用，主要表现为患者外周血T 淋巴细胞亚群数量的变化，如比例失调等[2]。有研究指出，CD4+T在白癜风疾病中扮演重要角色，患者发病后该细胞会发生明显变化，而免疫性疾病患者自身性激素水平亦会因此显著改变[3-4]。临床有关CD4+T 及性激素与白癜风的关系研究虽有，但关于两者的相关性研究较少。本文旨在分析白癜风患者外周血CD4+T 和性激素水平的变化及两者间的相关性，以期为该病患者的诊断及治疗提供帮助。

1 资料与方法

1.1 一般资料 回顾性分析宝鸡市中心医院皮肤科2016 年10 月至2019 年7 月收治的62 例白癜风患者(观察组)的临床资料。 纳入标准：①资料完整；②年龄已满18 岁；③三个月内未系统服用过糖皮质激素、免疫抑制剂与免疫调节剂。排除标准：①患有严重系统性疾病与其他免疫性疾病者；②心、肝、肾存在严重疾病或功能异常者；③患有精神抑郁类疾病者或长期服用此类药物者。另选取60 例同期体检正常人群作为对照组。观察组中男性32例，女性30例；年龄22～68 岁，中位年龄35.8 岁；病程1～11 年，中位病程4.3 年。按照中国中西医结合学会皮肤性病专业委员会色素病学组修定的《白癜风诊疗共识(2018版)》中标准[5]，将观察组患者分为进展期28例，稳定期34例；寻常型白癜风48例(局限性16例、肢端性14 例、散发性15例、泛发性3例)，节段型14例。对照组中男性30 例，女性30 例；年龄23～69 岁，中位年龄36.2 岁。两组受检者的性别和年龄比较差异均无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 观察指标 (1)比较观察组和对照组受检者的CD4+T水平与性激素水平；(2)比较观察组不同性别、不同疾病时期与疾病类型患者的外周血CD4+T细胞和性激素水平；(3)分析CD4+T与性激素各项指标的相关性。

1.3 检测方法 (1)样本采集方法：采集所有入选对象清晨空腹静脉血3.0～4.0 mL 于采血管后混匀，共抽取2管。(2)CD4+T细胞检测方法：向样本中加入20 μL的CD4+T抗体，完成后再度加入50 μL的抗凝全血，盖上管盖充分振荡混匀，室温环境下避光进行孵育15 min。完成以上步骤后，向管中加入450 μL的溶血素，再度进行振荡混匀，完成后室温避光孵育15 min待检。使用流式细胞仪(品牌：美国贝克曼库尔特)与配套试剂盒检测CD4+T细胞比例，操作时严格按照说明书步骤进行。(3)性激素检测方法：常温环境下自然凝固后离心分离，将分离获得的血清，放置于-20℃的环境中保存，采用美国BECKMANCOULTER 公司的Uni CelDx I800 Access 免疫分析系统与配套试剂盒，以碱性磷酸酶标记抗体于抗原，磁性微粒子作为载体，Lumi-Phos 530 作为发光底物，使用化学发光法对促黄体生成激素(luteinizing hormone，LH)、促卵泡激素(follicle stimulating hormone，FSH)、睾酮(testosterone，T)、泌乳素(prolactin，PRL)、孕 酮(progesterone，Pg)、雌二醇(estradiol，E2)进行检测，操作时均按照说明书步骤进行。

1.4 统计学方法 应用SPSS22.0与GraphPad软件对数据进行统计学分析，计数资料比较采用χ2检验，计量资料符合正态分布，以均数±标准差()表示，采用独立样本t检验，CD4+T与性激素各项指标相关性采用Pearson相关性分析，相关性散点图采用GraphPad软件绘制；以P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组受检者的CD4+T 水平比较 观察组患者的CD4+T水平为(36.09±8.55)%，明显低于对照组的(39.22±1.93)%，差异有统计学意义(t=2.767，P＜0.05)。

2.2 观察组不同疾病时期和不同疾病类型患者的CD4+T 水平比较 观察组中进展期患者的CD4+T水平为(27.68±2.77)%，明显低于稳定期的(43.02±4.41)%，差异有统计学意义(t=15.985，P＜0.05)。寻常型白癜风患者的CD4+T水平为(33.02±7.13)%，明显低于节段型的(46.61±2.41)%，差异有统计学意义(t=6.983，P＜0.05)。

2.3 两组受检者不同性别的性激素水平比较 观察组与对照组男性的LH、FSH、T、PRL水平比较差异均无统计学意义(P＞0.05)；但观察组患者的Pg、E2水平明显高于对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)，见表1。观察组与对照组女性的LH、FSH、T、PRL水平比较，差异均无统计学意义(P＞0.05)；但观察组患者的Pg、E2水平明显高于对照组，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表2。

2.4 观察组不同疾病时期和不同疾病类型男性和女性患者的性激素水平比较 观察组男性患者中，进展期13例，稳定期19例；寻常型23例，节段型9例。进展期和稳定期，以及寻常型和节段型患者的各项性激素水平比较差异均无统计学意义(P＞0.05)，见表3。观察组女性患者中进展期15例，稳定期15例；寻常型25例，节段型5例。进展期和稳定期患者的LH、FSH、T、PRL 水平比较差异均无统计学意义(P＞0.05)，但进展期女性患者的Pg、E2 水平明显高于稳定期，差异均有统计学意义(P＜0.05)；寻常型和节段型女性患者的各项性激素水平比较，差异均无统计学意义(P＞0.05)，见表4。

表1 两组受检者男性性激素水平比较()

表1 两组受检者男性性激素水平比较()

组别观察组对照组t值P值例数32 30 LH(mIU/mL)4.42±1.03 4.09±0.86 1.365 0.177 FSH(mIU/mL)6.75±1.79 6.68±1.66 0.159 0.874 T(ng/mL)3.75±0.80 3.99±0.72 1.239 0.220 PRL(ng/mL)9.26±1.44 9.18±1.37 0.224 0.824 Pg(ng/mL)0.93±0.25 0.55±0.10 7.761 0.001 E2(pg/mL)45.67±7.09 33.82±6.73 6.740 0.001

表2 两组受检者女性性激素水平比较()

表2 两组受检者女性性激素水平比较()

组别观察组对照组t值P值例数32 30 LH(mIU/mL)15.93±3.68 15.88±3.70 0.052 0.958 FSH(mIU/mL)46.93±8.74 47.13±8.82 0.088 0.93 T(ng/mL)0.40±0.09 0.43±0.10 1.221 0.227 PRL(ng/mL)10.22±3.05 10.15±2.82 0.092 0.927 Pg(ng/mL)10.28±1.82 7.02±1.05 8.498 0.001 E2(pg/mL)88.26±15.71 38.23±5.20 16.559 0.001

表3 观察组不同疾病时期和不同疾病类型男性患者的性激素水平比较()

表3 观察组不同疾病时期和不同疾病类型男性患者的性激素水平比较()

组别进展期稳定期t值P值寻常型节段型t值P值例数13 19 23 9 LH(mIU/mL)4.47±1.04 4.38±1.05 0.226 0.823 4.46±1.05 4.30±1.04 0.403 0.690 FSH(mIU/mL)6.67±1.79 6.81±1.83 0.208 0.837 6.67±1.81 6.96±1.83 0.401 0.691 T(ng/mL)3.73±0.79 3.76±0.83 0.111 0.912 3.78±0.80 3.67±0.83 0.364 0.718 PRL(ng/mL)9.32±1.43 9.22±1.48 0.204 0.840 9.22±1.44 9.67±1.57 0.260 0.797 Pg(ng/mL)0.92±0.56 0.94±0.25 0.296 0.769 0.94±0.25 0.90±0.26 0.442 0.662 E2(pg/mL)45.29±7.11 45.93±7.26 0.250 0.805 45.88±7.05 45.12±7.59 0.269 0.790

2.5 CD4+T 与性激素各项指标的相关性 经Pearson 相关性分析结果显示，CD4+T 与LH、FSH、T呈现正相关关系，与PRL、Pg、E2 呈现负相关关系，见图1～图6。

表4 观察组不同疾病时期和不同疾病类型女性患者的性激素水平比较

表4 观察组不同疾病时期和不同疾病类型女性患者的性激素水平比较

组别进展期稳定期t值P值寻常型节段型t值P值例数15 15 25 5 LH(mIU/mL)15.03±2.42 13.23±2.75 1.899 0.068 14.05±2.60 14.52±3.50 0.348 0.730 FSH(mIU/mL)46.62±3.14 42.95±6.32 2.013 0.054 45.42±4.27 41.64±8.68 1.501 0.144 T(ng/mL)0.41±0.08 0.39±0.96 0.413 0.683 0.40±0.09 0.40±0.10 0.000 1.000 PRL(ng/mL)11.94±2.51 10.10±2.54 1.997 0.056 10.66±2.74 12.84±1.03 1.740 0.093 Pg(ng/mL)11.23±1.62 9.33±1.51 3.341 0.002 10.26±1.69 10.36±2.61 0.106 0.916 E2(pg/mL)101.04±8.30 75.48±9.62 7.791 0.001 87.92±14.70 89.96±2.11 0.261 0.796

图1 CD4+T与LH相关性散点图

图2 CD4+T与FSH相关性散点图

图3 CD4+T与T相关性散点图

图4 CD4+T与PRL相关性散点图

图5 CD4+T与Pg相关性散点图

图6 CD4+T与E2相关性散点图

3 讨论

白癜风患者常见表现为后天色素脱失，受累于黏膜与毛发。根据统计，在全球范围内该病发病率为1%～2%，在我国发病率为0.1%～2.7%，患者通常在儿童或青少年时期发病[6-7]。白癜风疾病虽不会对人体健康造成明显影响，但患病后皮肤外观会发生改变，对人的心理状态造成影响，甚至影响患者正常的社会交往，所以在患病后多数患者希望疾病的发展得到减缓，甚至于将该病治愈[8-9]。白癜风疾病病因至今仍不明确，无法做到针对性治疗，临床治愈率较低。目前关于白癜风发病机制的研究讨论较多，主要集中于人体免疫、黑色素细胞破坏、微量元素、遗传、神经化学因子等方面，但确切机制依旧不明。而近几年有学者提出，性激素作为神经内分泌激素的一种，不仅对机体免疫系统可造成影响与免疫性疾病也有着一定关系[10]。CD4+T 细胞作为人体免疫功能的代表性指标，临床中有关其与白癜风的研究较多，可临床中关于白癜风患者CD4+T水平与性激素水平相关性研究较少，对此进行研究可为临床中该病患者的治疗与发病机制的探讨提供相应帮助。

CD4+T 细胞主要以维持机体正常免疫功能为主，当T 淋巴细胞亚群数量与功能发生异常时，人体就可出现免疫功能紊乱及一系列病理变化[11]。目前国内有关于白癜风患者外周血CD4+T 细胞研究结果偏少。但国外研究分析显示：白癜风患者人体外周血CD4+T淋巴细胞亚群表达显著低于正常人[12]。CD4+T是一类不均一的细胞体，具有促进T淋巴细胞、B淋巴细胞增殖与分化的双重作用。研究指出，白癜风患者外周血中CD4+T 可出现明显减少趋势[13]。本研究中白癜风患者CD4+T淋巴细胞明显降低，表明白癜风患者细胞免疫功能为抑制状态，这主要是白癜风疾病导致体内T 淋巴细胞激活，进而导致具有抗原与接受信号传导能力的CD4+T 细胞被刺激分泌降低有关，这与CZARNOWICKI 等[12]研究结果相一致。本研究中观察组性激素Pg、E2 指标水平与健康人群存在显著差异；男性白癜风患者与正常对照组男性对象，进展期与稳定期女性性激素Pg、E2 指标存在明显差异。究其原因：性激素在人体中以游离状态被动扩散进入人体细胞中，在与特异性受体结合后，导致激素-受体复合物形成引起受体构象改变。Pg、E2 不同性别者会存在明显的不同，国外曾有报道白癜风患者采用性激素药物治疗后有效的结论[14-15]。但本研究白癜风患者男性、女性年龄分布幅度较大，且该研究为回顾性分析并未考虑患者是否患有其他会影响性激素水平的相关疾病，如生殖系统疾病、妇科疾病。所以该结果可能存在一定偏倚临床中还需后续进一步分析研究。本研究结果还显示：CD4+T 与LH、FSH、T 呈现正相关关系，表明CD4+T 的升高会导致LH、FSH、T 的升高；反之则下降；与PRL、Pg、E2 呈现负相关关系，表明PRL、Pg、E2 会随着CD4+T 的增高而下降，下降而增高。同时也表明CD4+T 与性激素之间可相互影响，作用于人体免疫与激素平衡功能。但CD4+T与性激素之间是何种相互机制下影响，且是否为导致白癜风患者发病的因素临床中并无研究，后续需进一步分析研究。

综上所述，白癜风患者细胞免疫状况存在明显异常，且不同疾病程度患者免疫状态亦不相同。白癜风患者性激素指标Pg、E2 之间存在明显差异，其中不同疾病程度女性Pg、E2 水平存在明显差异，CD4+T 与性激素各项指标间存在显著相关关系，但其是否相互影响以致白癜风患者发病还需临床进一步研究证实。