常桂林

（昆明医科大学第一附属医院，云南 昆明）

0 引言

当前，男性中不育症患者人数不断升高，这不仅给患者造成很大的伤害，而且甚至会影响一个家庭的幸福指数。据相关研究结果显示，若男性的精子DNA 受到损伤，那么就会严重影响男性的生育能力[1]，另外还会增加配偶的意外流产的概率，所以，一些业内人士认为精子DNA 损伤情况可以准确评价精子的质量，这样就可以很好地对不孕不育症患者提供可靠的治疗依据，进而提升妊娠几率，提高患者的幸福指数[2]。那么本次研究就来探讨一下，现将相关的情况汇报如下。

1 基础资料与方法

1.1 基本资料

纳入本研究的研究资料均为本院在2020 年全年收治的男性不育症患者120 例，这些患者均经过相关的检测确诊为不育症患者，在将患者纳入研究之前对全部患者均讲解了此次研究的目的、方法、意义等情况，在患者明确了相关研究情况之后，全部患者均签署同意书，其中包含DNA 损伤率＜25%的患者与DNA 损伤率≥25%的患者，分别为60 例与60 例，并以此分组。应用精子染色质扩散法（SCD 法）对男性精子DNA 的损伤率情况进行检测。将两组患者的资料做一比较分析，无显著的统计学意义（P＞0.05），符合本次研究的研究标准，具有较好的可比较性。

1.2 排除标准

曾经患过腮腺炎的患者；曾经患有隐睾症或无精子症疾病的患者；患有精索静脉曲张疾病的患者；存在性功能障碍的病人；患者不能积极配合研究工作等。若有上述情况者将予以排除在外。

1.3 干预方法

1.3.1 采集精液

在对患者进行精液采集之前，要向患者讲明采集精液的主要方法，让患者有一个心理准备。要严格依照WHO制定的精液采集标准对患者的精液进行采集，首先要嘱患者禁欲2-8 天，然后嘱其用手淫法采集精液，收集到合格的精液之后将其放在37℃恒温水浴箱内进行液化，然后测定精子的计数及动态、静态等参数情况[3]。

1.3.2 检测患者的精子DNA 损伤情况

1.3.2.1 首先取患者的精液并进行充分的稀释，稀释后得到的浓度为：5-10×106/ml，之后将60μl 精子稀释液加入到已融化的易熔胶管里并进行充分混合均匀，在37℃条件下实施孵育，待用。

1.3.2.2 DNA 的变性处理

在预冷的载玻片上放置上30μl 精子凝胶混合液包被，在2-8℃的环境下使其凝固[4]，之后移除盖玻片。将反应液A 滴入其中，在室温内反应7min，将载玻片加入反应液B 中予以充分浸泡，时间为25min，然后用清水反复冲洗载玻片1-3 次。

1.3.2.3 DNA 染色

应用浓度梯度不同的乙醇溶液将样本进行脱水处理，然后用瑞氏染色液覆盖，再加入瑞氏缓冲液，混合均匀后用清水冲洗1-3 次，然后进行干燥备用。

1.3.2.4 DNA 损伤统计

检测男性患者的精子DNA 损伤率情况应用SCD 检测法，依据光晕大小对男性精子损伤程度实施判别。

1.4 统计学处理方法

应用SPSS18.0 软件对相关数据进行统计学分析处理，计量资料应用（均数±标准差）表示，采用t 检验，使用χ2检验。若P＜0.05 则表示差异具有统计学意义。若P＞0.05则表示结果没有显著的统计学意义。

2 结果

见表1。

表1 两组精液指标情况对比

3 讨论

近年来，随着社会的不断发展与进步，人们在饮食习惯、作息习惯等方面具有显著变化，再加上人们的压力普遍增大，有很多因素会导致人们的不孕不育发病率显著升高，而且此病呈逐年升高的趋势，其中一些不育症是和精液质量不佳有紧密联系的。精液质量与男性生育能力息息相关，是评价男性生殖能力方面的重要内容之一，但是这项指标对于评价精子受精能力方面并不全面，局限性较大[5]。男性精子DNA 受损的机制相对较为复杂，据相关研究资料结果显示，导致精子DNA 发生损伤的主要因素主要包括：精子染色质包装发生异常；精子在产生过程中细胞发生凋亡；精子在运输过程中受到氧化自由基的不良影响。男性的生殖能力高低与精子的质量高低是有直接关系的，而DNA 受损会显著降低患者的精子质量，也就是能够直接损害患者的生殖能力[6]。

在本次研究，我们将收集到的不育症患者并将患者分为DNA 损伤率＜25%组别与DNA 损伤率≥25%组别两组，研究中我们对两组患者的前向运动精子、精子活动率、精子正常形态率等指标进行对比分析，通过检测分析并比较结果发现，DNA 损伤率＜25%组均显著好于DNA 损伤率≥25%组，两组结果比较具有显著的统计学意义（P＜0.05），这个研究结果表明，男性精子DNA 的损伤程度是与精子活动率、精子正常形态呈负相关关系的，研究结果显示，男性精子DNA 受损可能会导致男性患者的正常生殖能力显著降低[7,8]，在临床中，要改善患者的生殖解决，我们可以通过采用精子DNA 损伤小的精液精子和睾丸精子来受精，进而提升女方的怀孕率[9]。

总之，通过本次的深入研究与分析，我们认为精子DNA 损伤可能成为独立的精子质量评价指标，对患上不育症的男性患者及时进行精子DNA 损伤情况的检测[10]，及时了解患者的精子受损情况，可帮助筛选出DNA 损伤程度较低的精子，以此来改善患者的生殖的治疗结局，提高女方受孕率，是值得在临床中加强研究[11,12]。