李 瑞，覃俊龙，张秀明

广东省深圳市罗湖区人民医院检验科，广东深圳 518001

随着国家医疗卫生体制改革的深入，为整合医疗资源，提升检验质量，实现检验结果互认互通，区域检验中心建设备受重视。本实验室为深圳市罗湖区成立的区域性医学检验中心，承担着全区6家医院和31家社区康复中心的临床检验任务。实验室配备了罗氏全自动的生化免疫分析流水线，前处理系统配备2个离心机，可同时离心120个标本，大量标本集中于12：00-16：00到达实验室，前处理系统需要完成绝大部分标本的离心和分拣任务，严重影响了实验室内标本流转时间(TAT)。因此需要探讨如何优化离心条件、缩短TAT，同时保证标本质量不受影响。

世界卫生组织推荐血清标本需在(1 300～2 500)×g下离心至少10 min[1-2]。研究表明缩短离心时间对大部分血清或血浆中生化和免疫分析物结果并无影响，但乳酸脱氢酶除外[3-6]。因此本研究的目的是在保证血清质量的条件下，寻找本实验室最佳离心条件的组合，使实验室内TAT达到最短。

1 资料与方法

1.1标本处理 实验室内标本来自罗湖医院集团旗下6家医院和31家社区康复中心，所有生化免疫项目均使用广州阳普分离胶-促凝管的真空采血管采血，标本送达实验室核收后，在罗氏前处理离心机模块(Cobas P671)进行离心，随后去帽，前处理系统(Cobas P612)按照检测项目进行分拣，上机检测。

1.2离心条件的设置 在50 d内，分别对罗氏前处理离心机模块的离心力、离心时间、离心温度进行设置，每组参数使用10 d。离心条件设置见表1。

表1 5组不同离心条件设置

1.3TAT统计 以标本送达实验室到结果发送作为实验室内TAT，通过LIS系统统计实验室内标本高峰时间段(12：00-14：00、14：00-16：00)生化标本的TAT中位数。比较离心时间分别为5、7、10 min的TAT中位数变化。生化项目目标TAT以3 h计算，统计各组生化项目TAT达标率。

1.4血清指数检测 所有进行生化分析的标本均采用罗氏配套试剂盒进行血清指数检测，可以半定量测定血清中脂血指数、溶血指数、黄疸指数。对稀释后标本进行双波长检测(溶血指数检测主波长570 nm，副波长600 nm；脂血指数检测主波长660 nm，副波长700 nm；黄疸指数检测主波长480 nm，副波长505 nm)。根据厂家声明，溶血指数的报告数值与血红蛋白水平大约一致，黄疸指数的报告数值与胆红素水平大约一致，脂血指数与血清浊度有关，与三酰甘油水平相关性很差。本实验室设定的脂血指数参考范围为0～30 mg/dL；溶血指数参考范围为0～60 mg/dL；黄疸指数参考范围为0～4 mg/dL。当溶血指数数值介于120～240 mg/dL时可判断为中度溶血，此时会对钾、羟丁酸脱氢酶、乳酸脱氢酶、乳酸脱氢酶-1、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶检测结果产生较大影响，这些项目结果不能发送；当溶血指数数值>240 mg/dL时判断为重度溶血，此时对更多检测项目结果产生较大影响，标本需直接拒收。

1.5统计学处理 采用SPSS19.0统计软件进行数据处理分析，计数资料以例数和百分率表示，组间比较采用χ2检验；计量资料以中位数表示，数据分布差异分析的小提琴图采用Graphpad Prism 8.0绘制。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1不同离心时间对实验室内TAT和TAT达标率的影响 离心时间从10 min降至7、5 min，实验室内TAT中位数总体呈下降趋势。离心时间从10 min降至7 min，实验室内TAT中位数节省了5～27 min不等；离心时间从10 min降至5 min，实验室内TAT节省了8～63 min不等。生化检测项目3 h，Ⅰ组TAT达标率为95.85%，Ⅱ组TAT达标率为97.62%，Ⅲ组TAT达标率为97.63%，Ⅳ组TAT达标率为97.80%，Ⅴ组TAT达标率为98.50%。

表2 不同离心时间的TAT中位数(min)

2.2不同离心力对血清指数的影响 保持离心温度和离心时间相同的条件下，离心力2 000×g时溶血指数中位数是4 mg/dL，离心力3 000×g时溶血指数中位数是5 mg/dL，差异有统计学意义(P<0.05)。黄疸指数和脂血指数比较，差异无统计学意义(P>0.05)。溶血指数的小提琴图分析结果显示，2组数据均存在较多离群值，溶血指数主要分布在0～10 mg/dL，在此范围内，离心力较高时溶血指数数据离散程度更高，溶血程度更明显，见图1。

图1 Ⅰ组和Ⅲ组溶血指数的小提琴分布图

2.3不同离心时间对血清指数的影响 保持离心温度和离心力相同的条件下，离心时间10 min时溶血指数中位数是5 mg/dL，离心时间5 min时溶血指数中位数是4 mg/dL，差异有统计学意义(P<0.05)。黄疸指数和脂血指数比较，差异无统计学意义(P>0.05)。溶血指数的小提琴图分析结果显示，2组数据均存在较多离群值，溶血指数主要分布在0～10 mg/dL，在此范围内，离心时间较长时溶血指数分布更加集中，但溶血程度更高一些，见图2。

图2 Ⅲ组和Ⅳ组溶血指数的小提琴分布图

2.4不同离心温度对血清指数的影响 保持离心时间和离心力相同的条件下，离心温度15 ℃时溶血指数的中位数是4 mg/dL，离心温度25 ℃时溶血指数中位数是3 mg/dL，差异有统计学意义(P<0.05)。黄疸指数和脂血指数比较，差异无统计学意义(P>0.05)。溶血指数的小提琴图分析结果显示，2组数据均存在较多离群值,溶血指数主要分布在0～10 mg/dL，在此范围内，离心时温度较低时溶血指数分布更加集中，但溶血程度更高，见图3。

图3 Ⅰ组和Ⅱ组溶血指数的小提琴分布图

2.5提高离心力，降低离心时间对血清指数的影响 离心力从2 000×g增加到3 000×g，离心时间从10 min缩短到5 min，溶血程度比较，差异无统计学意义(P>0.05)，见图4。

图4 Ⅰ组和Ⅳ组溶血指数的小提琴分布图

2.6不同离心条件溶血指数超过实验室接受标准的标本分布差异比较 以溶血指数≥120 mg/dL为判断标准，统计5组不同离心条件下溶血标本的分布差异，5种离心条件下溶血标本分布差异无统计学意义(P>0.05)，见表3。

表3 不同离心条件下的溶血标本构成差异比较(n)

3 讨 论

已有研究表明，不同离心条件对检测结果准确性有影响，CADAMURO等[4]研究了不同离心条件对包括离子、酶类、蛋白、血糖、激素、肿瘤标志物等在内的77种常用生化项目检测结果的影响，该研究纳入41例体检健康者，离心条件分别设置为2 000×g、10 min，3 000×g、7 min，3 000×g、5 min，结果显示除了游离血红蛋白外，其他项目检测结果比较，差异无统计学意义(P>0.05)。MOLLER等[3]将40份标本提高离心力、降低离心时间，比较常规生化检测结果，结果显示，提高离心力降低离心时间后除乳酸脱氢酶水平轻度升高外，对其他常规项目检测结果无影响。MONNERET等[5]比较了离心10 min和15 min对27种常见生化免疫分析物检测结果的影响，结果表明缩短离心时间后，乳酸脱氢酶水平会轻度升高，对其他项目检测结果无影响。基于上述研究，本实验室主要探讨了不同离心条件对血清质量的影响。

标本检验前阶段是整个检验过程中很重要的一部分，决定了标本质量是否能够满足临床检测的需要[7-8]。相关研究已经证实检验分析前阶段误差占检验过程所有误差的60%～70%，而溶血又占分析前阶段误差的40%左右[9-10]。

血清指数检测结果可提示溶血、黄疸和脂血程度对检测结果的干扰。其中溶血往往与不恰当的采血方法，采血容器和采血管运输及离心条件有关，对检验结果的干扰也最大，可造成多种细胞内检测物结果偏高或结果错误[11-12]。从肉眼可见的颜色来讲，溶血是指血清中的游离血红蛋白水平超过30 mg/dL,离心速度过高和离心时间过长都会导致体外溶血的发生。目前，常规生化免疫检测技术相对成熟，标本前处理通常只需要离心即可。不少实验室为了缩短实验室内TAT而改变离心时间或离心条件，但并不清楚不同离心条件对血清质量的影响。

本研究显示，离心力从2 000×g提高到3 000×g，标本总体溶血程度也相应升高；离心时间从5 min延长到10 min，标本总体溶血程度也相应升高，但溶血指数的中位数均≤5 mg/dL，在临床可接受范围内。本研究显示，提高离心力同时降低离心时间，溶血指数中位数不变，发生溶血的标本比例也基本一致，因此提高离心力至3 000×g，降低离心时间到5 min是可行的，实验室内离心条件的轻微改变，对溶血不会产生明显的影响，造成溶血的主要因素可能与标本采集环节和转运环节相关性更高[13-14]。

本实验室12：00-14：00是标本高峰时间，离心5 min的TAT中位数长于离心7 min的TAT中位数，几乎和离心10 min的TAT中位数相当，原因可能是虽然缩短了离心时间，但前处理分拣和分杯系统运行速度有限，高峰时段标本虽然已在离心机模块完成离心，但P612前处理系统还要进一步分拣、分杯一些非流水线项目标本，导致标本离心完成后不能及时进入仪器内，造成实验室内TAT的延长。

综上所述,14:00-16:00离心5 min时实验室内TAT最短，其他时间段离心7min TAT最短。增大离心力，延长离心时间，降低离心温度，溶血程度会升高,但在临床可接受范围内。考虑到在同一天的不同时间内改变离心条件难以实现，综合以上因素，在临床可接受的溶血指数范围内结合实验室内TAT，5个离心条件组合中，3 000×g、7 min、25 ℃为最佳离心条件。虽然脂血和黄疸均会对检测结果产生干扰，但溶血指数和黄疸指数与患者的病理状态相关性更高，如病理性黄疸和高脂血症，与标本前处理过程相关性不大，因此在文章中不做讨论。