赵兴泉 钟渠 刘柯 顾珊珊 何武斌 王春艳

[摘要] 目的 探討地塞米松鼓室内注射对分泌性中耳炎外周血和中耳积液中辅助性T细胞（CD4+T细胞）、细胞毒性T细胞（CD8+T细胞）、白细胞介素2（IL-2）、白细胞介素4（IL-4）水平的影响。 方法 选取2018年4月至2020年6月在川北医学院附属第二医院就诊的分泌性中耳炎患者作为研究对象，其中急性患者作为研究A组60例，慢性患者作为研究B组60例，以同期正常体检的体检者60名作为对照组。A组、B组患者均给予地塞米松鼓室内注射进行治疗。记录并比较三组研究对象听力外周血和中耳积液中CD4+、CD8+T细胞、IL-2、IL-4水平。 结果治疗前，A、B两组患者CD4+、CD4+/CD8+及听力水平比较，差异无统计学意义（P>0.05）;但CD4+、CD4+/CD8+均明显低于对照组（P<0.05）。治疗后，A、B两组均明显提高（P<0.05），但CD4+、CD4+/CD8+仍明显低于对照组（P<0.05），CD8+指标在治疗前后均明显高于对照组（P<0.05）;治疗前，A组患者血清IL-2、IL-4水平明显高于B组（P<0.05），且均明显高于对照组（P<0.05）;治疗后，A、B两组均明显降低，但仍明显高于对照组（P<0.05）。 结论 分泌性中耳炎采用鼓室内注射地塞米松治疗，能明显改善患者的免疫力和听力水平，通过比较患者外周血和中耳积液中IL-2、IL-4水平差异，可作为诊断急性及慢性中耳炎的临床依据。

[关键词] 地塞米松;分泌性中耳炎;白细胞介素-2;白细胞介素-4;辅助性T细胞;细胞毒性T细胞

[中图分类号] R764.21          [文献标识码] A          [文章编号] 1673-9701（2021）36-0013-04

Effect of intratympanic injection of dexamethasone on levels of CD4+ T cells， CD8+ T cells， IL-2 and IL-4 in peripheral blood and middle ear effusion of secretory otitis media

ZHAO Xingquan1   ZHONG Qu1   LIU Ke2   GU Shanshan2   HE Wubin1   WANG Chunyan1

1.Department of Otorhinolaryngology， Sichuan Mianyang 404 Hospital， Mianyang   621000， China; 2.Department of Otorhinolaryngology， the Second Affiliated Hospital of North Sichuan Medical College， Nanchong   621000

[Abstract] Objective To explore the effect of intratympanic injection of dexamethasone on levels of CD4+ T cells， CD8+ T cells， IL-2 and IL-4 in peripheral blood and middle ear effusion of secretory otitis media. Methods Patients with secretory otitis media who were treated in the Second Affiliated Hospital of North Sichuan Medical College from April 2018 to June 2020 were selected as the research subjects， and outpatients with secretory otitis media who were treated in the Department of Otorolaryngology were selected as the research subjects. Acute patients were included in the study group A （60 cases）， chronic patients were included in the study group B （60 cases）， and normal physical examination subjects were included in the control group （60 cases）. Patients in group A and group B were treated with intratympanic injection of dexamethasone. The levels of CD4+ T cells， CD8+ T cells， IL-2 and IL-4 in peripheral blood and middle ear effusions of the three groups were recorded and compared. Results Before treatment， no significant differences were observed in CD4+， CD4+/CD8+ and hearing levels between group A and B（P>0.05）， but their CD4+ and CD4+/CD8+ were significantly lower than those in the control group（P<0.05）. After treatment， CD4+ and CD4+/CD8+ in group A and B were significantly lower than those in the control group（P<0.05）. The CD8+ index was significantly higher than that of the control group before and after treatment（P<0.05）， and significantly decreased after treatment， but still significantly higher than that of the control group. Serum IL-2 and IL-4 levels in group A were significantly higher than those in group B， and both of them were significantly higher than those in the control group（P<0.05）. After treatment， serum IL-2 and IL-4 levels in group A and group B were significantly decreased， but still significantly higher than those in the control group （P<0.05）. Conclusion The treatment of secretory otitis media with intratympanic injection of dexamethasone can significantly improve the patients' immunity and hearing level. By comparing the levels of IL-2 and IL-4 in peripheral blood and middle ear effusion of patients， it can be used as the clinical basis for the diagnosis of acute and chronic otitis media.

[Key words] Dexamethasone; Secretory otitis media; IL-2; IL-4; Th cell; Cytotoxic T cell

分泌性中耳炎（Secretory otitis media，SOM）是耳鼻喉科多见的中耳非化脓性疾病，临床表现主要有听力下降、耳闷胀感、鼓室积液及耳鸣等症状[1]。其可分为两种类型为急性和慢性，易发于成年人和儿童[2]。研究发现急性分泌性中耳炎患者的中耳黏膜中，可观察到肥大细胞、嗜酸性粒细胞及T淋巴细胞增多，以及Th2型细胞因子表达水平增高的现象[3-4]。若病程持续8周以上未痊愈者则考虑为慢性分泌性中耳炎，它是由急性分泌性中耳炎反复发作，慢慢不愈转化而来，但也有部分慢性分泌性中耳炎发生过程中不经过急性中耳炎[5]。相关研究表明急性分泌性中耳炎患者IL-12、TNF-α、IFN-B、IL-4等细胞因子受到细菌感染后有下降的趋势[6]。因此本研究通过探讨地塞米松对中耳炎患者外周血和中耳积液中CD4+、CD8+T细胞、IL-2、IL-4水平的影响，以探究其检测意义，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018年4月至2020年6月在四川绵阳四0四医院就诊的分泌性中耳炎患者作为研究对象，以耳鼻喉科接受治疗的分泌性中耳炎门诊和住院患者作为研究对象，其中急性患者60例作为研究A组;慢性患者60例作为研究B组;以同期正常体检的健康人群60名作为对照组。纳入标准：①符合中耳炎诊断标准者;②入院前10 d内未接受过相关治疗者;③精神良好，意识清醒者;④本人及家属知情同意并签署知情告知书者。排除标准：①服用过耳毒性药物或有家族遗传耳聋者;②患有化脓性中耳炎者;③有地塞米松药物禁忌证者;④不愿谨遵医嘱，无法配合完成研究者。其中对照组男33名，女27名，年龄18～55岁，平均（38.6±16.3）岁。研究A组男30例，女30例，年龄20～60岁，平均（40.5±20.2）岁，病程0.6～2.5年，平均（1.3±0.6）年;研究B组男28例，女32例，年龄18～65岁，平均（41.5±23.2）岁，病程1～2年，平均（1.5±0.5）年。两组患者在性别、年龄、病程比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。本研究经过医学伦理委员会批准，且在征得患者本人及家属的同意下进行。

1.2 方法

注射地塞米松：注射药物前先抽取患者鼓室内的积液，然后给予研究A组、研究B组患者进行鼓室内注射地塞米松（石药集团欧意药业有限公司，国药准字H20052358）5 mg/mL，完成注射后要求患者头向对侧45°方向转，保持30 min，每周治疗2次。治疗3周。治疗期间均给予患者1%麻黄素滴鼻，及抗生素治疗。

采集血样标本：①所有受试者于清晨空腹抽取静脉血5 mL，室温下静置约20 min，采用离心泵以3000 r/min的转速离心30 min后，放于试管中提取血清。②采用流式细胞仪（美国贝克曼公司，型号为FC500）检测受试者血清CD4+、CD8+及CD4+/CD8+。③采用酶联免疫吸附法（ELISA）试剂盒（上海酶联生物科技有限公司）检测外周血和中耳积液中的细胞因子IL-2、IL-4、水平。

1.3 观察指标

通过贝克曼FC500型流式细胞仪及运用酶联免疫吸附法（ELISA）研究分析分泌性中耳炎患者外周血及中耳积液中T细胞亚群（CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）和细胞因子（IL-2、IL-4）免疫相关指标表达的差异及患者听力水平的变化。

1.4 统计学方法

采用SPSS 25.0 统计学软件进行数据分析。计量资料以均数±标准差（x±s）表示，组间比较采用t检验，计数资料采用χ2 检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 治疗前后研究组患者与对照组免疫功能比较

治疗前，A、B研究组患者CD4+、CD4+/CD8+比较，差异无统计学意义（P>0.05），但均明显低于对照组（P<0.05），治疗后，A、B两研究组均明显升高（P<0.05），但仍明显低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），而CD8+指标在治疗前后均明显高于对照组（P<0.05），治疗后明显降低（P<0.05），但仍明显高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2.2 治疗前后研究组患者与对照组血清IL-2、IL-4水平比较

治疗前，研究A组患者血清IL-2、IL-4水平明显高于研究B组，差异有统计学意义（P<0.05），且均明显高于对照组（P<0.05），治疗后，A、B两研究组均明显降低（P<0.05），但仍明显高于对照组，差異有统计学意义（P<0.05）。见表2。

2.3 两组研究组患者治疗前后听力水平比较

治疗前，A、B两研究组患者听力水平差异无统计学意义（P>0.05），治疗后，两组患者其听力水平均明显提高，差异有统计学意义（P<0.05）。见表3。

3 讨论

分泌性中耳炎的病理特征主要由于外界空气不能顺利进入中耳，其原因为咽鼓管出现功能障碍，而中耳内之前所存气体被粘膜不断吸收，导致中耳腔内形成相对性负压，打破了原有中耳腔内气压的平衡[7]。因此治疗分泌性中耳炎，其根本在于保证咽鼓管通气顺畅，使中耳腔内气压恢复至平衡状态。目前治疗分泌性中耳炎主要有药物治疗、手术治疗及物理治疗[8]。常用的药物治疗包括：抗生素（如哇诺酮类药物、大环内酯类药物等）、促表面活性物质合成剂（盐酸氨澳索口服液、片剂或胶囊）、抗过敏药物（地塞米松或泼尼松口服）及中西医结合治疗等。手术治疗主要用于急性分泌性中耳炎，其手术方式较多，主要包括激光鼓膜造孔术、鼓膜穿刺抽液、鼓膜切开置管术及鼓室成型术等。物理治疗主要包括耳内微波治疗、耳正负压治疗及鼓室内给氧等，但其治疗时期较长，要求患者密切配合，但对儿童而言，其耐心差，治疗效果不佳[9-10]。虽然治疗分泌性中耳炎的方法较多，但想要取得良好的治疗效果，单一的治疗方式均不能达到预期，因此临床上常采用多种方式联合治疗。可是，治疗的前提是有准确的诊断依据。随着医学的进步，对分子生物学、免疫学的研究也有了一定的进展，从而对中耳炎免疫方面的认知加深，逐渐接受了中耳是一种免疫防御系统，且是独立的。在其黏膜上皮存有较多的淋巴组织，主要包含在不同发育阶段的T淋巴细胞、浆细胞、B淋巴细胞、树突状细胞及吞噬细胞等，具有与外周淋巴器官相似的免疫调节机能，对各种变应原能发挥体液免疫和细胞免疫作用[11]。

相关研究发现[12]，T淋巴细胞亚群在分泌性中耳炎患者体内表达异常，而T细胞想要发挥其免疫功能必须由CD4+、CD8+共同完成。CD4+具有体液免疫和辅助细胞免疫的作用，而CD8+能有效地抑制T细胞的增殖及抗体的合成分泌，两者的相互作用共同维持机体的正常免疫反应，另CD8+细胞具有杀伤作用，因CD8+细胞增多可对机体的免疫应答产生影响。因此可根据CD4+、CD8+、CD4+/CD8+指标变化来诊断分泌性中耳炎类型[13]。另有患者耳积液中的细胞因子IL-2、IL-4具有免疫激活功能，它不仅与分泌性中耳炎的发病有关，同时有研究发现T细胞亚群和细胞因子的变化可用于诊断分泌性中耳炎的分类[14]。

地塞米松属于肾上腺皮质激素类药物，它能抑制巨噬细胞对抗原的吞噬和处理，从而破坏淋巴细胞，阻止细胞免疫和体液免疫反应使病情得到缓解[15-16]。分泌性中耳炎其发病的基础是免疫反应，本文通过鼓室内注射地塞米松进行治疗，直接抑制了中耳免疫反应的诸多环节，以达到治疗的目的[17]。

本研究通过探讨地塞米松对中耳炎患者外周血和中耳积液中CD4+、CD8+T细胞、IL-2、IL-4水平的影响，以探究其检测意义。研究结果表明，治疗前，急性分泌性中耳炎和慢性分泌性中耳炎患者CD4+、CD4+/CD8+相比差异无统计学意义，但均明显低于健康体检者，治疗后，急性分泌性中耳炎和慢性分泌性中耳炎患者均明显升高（P<0.05），但仍明显低于健康体检者，差异有统计学意义，而CD8+指标在治疗前后均明显高于健康体检者，治疗后明显降低，但仍明显高于健康体检者，差异有统计学意义;治疗前，急性分泌性中耳炎患者血清IL-2、IL-4水平明显高于慢性分泌性中耳炎患者，差异有统计学意义（P<0.05），且均明显高于健康体检者，治疗后，急性分泌性中耳炎和慢性分泌性中耳炎患者均明显降低（P<0.05），但仍明显高于健康体检者，差异有统计学意义（P<0.05）。治疗前，急性分泌性中耳炎和慢性分泌性中耳炎患者听力水平无明显差异，治疗后，两组患者其听力水平均明显提高，差异有统计学意义（P<0.05）。

综上所述，分泌性中耳炎患者采用鼓室内注射地塞米松进行治疗，能提高患者的免疫力和听力水平，通过对比患者外周血和中耳积液中IL-2、IL-4水平差異，可作为诊断急性及慢性中耳炎的临床依据。临床意义大，值得推广应用。

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（收稿日期：2021-01-29）