黄泰奇 杨濮溶 黄明浩 冉金龙 张哲 张刘强 杨书香

摘 要 对湖北省4个地区的博落回叶片中血根碱、白屈菜红碱及原阿片碱进行定性、定量分析。采用薄层色谱法鉴别博落回中的血根碱、白屈菜红碱，高效液相色谱法测定血根碱、白屈菜红碱及原阿片碱含量。结果表明，湖北省4个地区的博落回叶片中均含有血根碱和白屈菜红碱，且血根碱、白屈菜红碱含量及原阿片碱含量均符合标准规定或高于文献报道值。因此湖北省内这4个地区的野生博落回资源具有开发利用的价值。

关键词 博落回;血根碱;白屈菜红碱;湖北省

中图分类号：R956 文献标志码：A DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2021.32.002

博落回（Macleaya cordata）别名号筒杆、山号筒，是罂粟科博落回属多年生直立草本植物，基部具乳黄色浆汁。生于山坡及草丛中，喜温暖、湿润的环境，喜肥、怕涝，有较强的耐旱力和抗寒力，对土壤要求不严，但在肥沃的土壤中长势健壮。适宜的生长温度为22～28 ℃[1]。博落回具有改善土壤条件、防止土壤流失及修复土壤重金属污染等生态价值[2-3]。博落回味苦，辛，性寒，温，大毒;具有散瘀、祛风、解毒、止痛、杀虫等功能;主治痛疮疔肿、臁疮、痔疮、湿疹、蛇虫咬伤、跌打肿痛、风湿关节痛、龋齿痛、顽癣、滴虫性阴道炎及酒糟鼻，其兽药加工品的抗菌效果良好[4]。博落回的根、茎、叶及果中均含有多种生物碱，其中主要的生物碱有4种：原阿片碱、别隐品碱、血根碱和白屈菜红碱[5]。目前，湖南省、贵州省的部分地区已经大面积种植博落回，且部分地区通过博落回种植顺利脱贫，而作为同样适合博落回生长的湖北省尚无人工大面积种植博落回的先例[6]。因此通过薄层色谱法、高效液相色谱法对取自湖北省4个地区——鄂州市汀祖镇、咸宁市通山县黄沙铺镇、黄石市大冶市茗山乡及黄冈市麻城市乘马岗镇的博落回叶片中生物碱类成分进行定性、定量分析，以确定湖北省内这4个地区的野生博落回资源具有开发利用的价值。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

1.1.1 仪器

KQ-100DE超声波清洗机，购自昆山市超声波仪器有限公司;ME104E分析天平，梅特勒-托利多;手持式紫外分析仪，北京君意东方电泳设备有限公司;硅胶G薄层板，青岛海洋化工厂;e2695型高效液相色谱仪，美国沃特世公司。

1.1.2 试剂

血根碱标准品，西安天宝生物科技有限公司;白屈菜红碱标准品、原阿片碱，成都埃法生物公司;盐酸、甲醇、二甲苯、氯仿、氨水、三乙胺及磷酸等试剂，均为国产分析纯。

1.2 供试材料

博落回叶，于2021年6月取自鄂州市汀祖镇（样品1）、咸宁市通山县黄沙铺镇（样品2）、黄石市大冶市茗山乡（样品3）及黄冈市麻城市乘马岗镇（样品4），共计39个样品。

1.3 方法

1.3.1 薄层色谱法

1）博落回叶供试品溶液的制备。取博落回叶粉末0.500 0 g，加入25 mL提取液，其中提取液为甲醇与1%盐酸水溶液按1∶1体积比配制而成，然后超声处理1 h，过滤，滤液作为供试品溶液。

2）标准品溶液的制备。分别取血根碱和盐酸白屈菜红碱对照品，加提取液25 mL，制成单位为1 mg·mL-1的溶液，作为对照品溶液。

3）测定。吸取血根碱和盐酸白屈菜红碱对照品溶液及4个地区的博落回叶供试品溶液1 µL，点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿、二甲苯、甲醇及氨水按50.0∶10.0∶1.0∶0.1的体积比配制液为展开剂，展开、取出、晾干，在254 nm荧光下显色。

1.3.2 高效液相色谱法

1）色谱条件。色谱柱：Waters Symmetry C18

（4.6 mm×250 mm，5 μm）;流动相：A相为乙腈，B相为0.5%三乙胺缓冲溶液（pH=2.5，用磷酸调节pH）;线性洗脱浓度：0～14 min，B相保持75%;14～27 min，B相75%～40%;27～29 min，B相40%～75%;29～35 min，B相保持75%;流速：0.8 mL·min-1;检测波长：270 nm;柱温：35 ℃;进样体积：5 μL。

2）对照品溶液的制备。参照标准制备混合标准溶液[7]：取原阿片碱3.6 mg、血根碱4 mg、白屈菜红碱4 mg，分别加入到10 mL容量瓶中，用提取液定容到10 mL，制成濃度为0.4 mg·mL-1的血根碱和白屈菜红碱溶液，以及0.36 mg·mL-1的原阿片碱溶液。

3）试样品的制备。取博落回叶粉末过筛（60目）

0.5 g，塞入锥形瓶中，加入50 mL提取液，室温超声提取60 min，放冷至室温，用0.45 mm的微孔滤膜过滤，滤液转移至50 mL的容量瓶中，用提取液容至刻度。

4）测定。分别取制备的3种对照品溶液和样品溶液5 μL进样，并计算血根碱、白屈菜红碱、原阿片碱峰面积及含量，含量计算公式为：

（1）

式（1）中：m1为样品中生物碱（血根碱、白屈菜红碱、原阿片碱）峰面积（μV·s），m2为此生物碱标准品峰面积（μV·s），c为此生物碱标准品浓度（mg·mL-1），w为样品中此生物碱含量（%）。

1.3.3 博落回叶等级评价方法

博落回叶的分级标准为：血根碱和白屈菜红碱含量之和（按干燥品计算%）≥1.5的为一级;<1.5且≥1.0的为二级;<1.0且≥0.5的为三级。

2 结果与分析

2.1 薄层色谱结果

薄层色谱结果如图1，博落回叶供试品溶液在2种生物碱相同位置显相同颜色的斑点，说明4个地区的博落回叶片中均含有血根碱和白屈菜红碱。

2.2 高效液相色谱结果

3种生物碱标准品及样品液相色谱图分别如图2和图3。结果表明，血根碱、白屈菜红碱及原阿片碱标准品保留时间分别为13.8 min、8.3 min、5.2 min，且样品中3种生物碱保留时间与标准品一致。

2.3 样品中生物堿含量

根据博落回叶等级评价方法可知，4个地区采集的39个样品中仅2个样品中血根碱和白屈菜红碱含量之和未达到三级标准，且达到三级标准的有11个样品、达到二级标准的有7个样品、达到一级标准的有19个样品。其中，含量最高的是来自咸宁市的样品，血根碱和白屈菜红碱含量之和为12.40%。39个样品中，原阿片碱含量最低为4.05%，最高为22.43%，均高于文献[8]报道的值。4个地区样品原阿片碱含量、血根碱和白屈菜红碱含量之和的极值与平均值统计如表1。

3 结论与讨论

根据薄层色谱结果可知，取自湖北省4个地区的野生博落回叶供试品溶液均含有血根碱和白屈菜红碱。根据液相色谱检测结果可知，血根碱和白屈菜红碱含量之和基本达到标准[7]规定值，且原阿片碱含量高于已有研究报道的数值，说明湖北省野生博落回资源具有开发利用的价值。

参考文献：

[1] 孙伟，陈卫，王雅辉.博落回的栽培[J].特种经济动植物，2006（4）：10-12.

[2] 邹序安，龙正权.博落回的生物学特性与生态价值[J].福建林业科技，2009，36（3）：244-247.

[3] 聂坚.博落回对镉污染土壤的修复潜力及耐性机理探究[D].长沙：湖南大学，2016.

[4] 国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草[M].上海：上海科学技术出版社，1999：656.

[5] 陈燕乐，杨广民，唐昭山，等.博落回中四种生物碱的薄层鉴别研究[J].中国兽药杂志，2020，54（4）：30-35.

[6] 曾凡荣.点“叶”成金，助农增收[J].湖南农业，2021（4）：9.

[7] 长沙市农业农村局.博落回叶：DB43/T 498-2009[S].2009.

[8] 曾建国，刘华.博落回主要功能成分及其在动物生产中的应用[J].饲料工业，2019，40（7）：1-6.

（责任编辑：刘宁宁）