李宛珈 黄志锋 廖陈喜 罗文婷 黄柳桥 孙宝清

(广州呼吸健康研究院，呼吸疾病国家重点实验室，国家呼吸临床研究中心，广州医科大学附属第一医院，广州 510120)

Ⅰ型变态反应性疾病是一类IgE介导的涉及多器官和多系统的全身性疾病，在过去30年，过敏性疾病发病率不断增长，已达全世界总人口的20%～30%[1，2]。如果患者的过敏原不明确，疾病可能久治不愈，甚至不断加重。因此，明确过敏原对采取积极的预防诊治措施具有重要意义。通常认为IgE是介导Ⅰ型过敏反应的主要抗体，而通过体外检测患者血清过敏原特异性IgE(specific IgE,sIgE)是明确过敏原的重要途径之一[3]。

既往对过敏原谱的分析研究多围绕儿童和青少年患者，对成年过敏性疾病患者的过敏原分析数据报道较少。呼吸疾病国家重点实验室(The Allergy Information Repository of the State Key Laboratory of Respiratory Disease,AIR-SKLRD)生物资源库是依托于广州医科大学附属第一医院建立的大型生物血清资源库，在过去十年中收集和储存了大量过敏性疾病患者的血清样本及其临床信息[4]。本研究基于此，分析广州地区过敏性疾病成年患者过敏原sIgE的致敏特点，为临床提供的相关流行病学数据。

1 资料与方法

1.1资料

1.1.1基本资料 选取2016年1月～2018年12月收录于AIR-SKLRD数据库、并进行本地区常见8种过敏原sIgE检测的过敏性疾病成人患者(年龄≥18岁)2 005例进行回顾性分析。其中男性1 104例，女性901例，年龄分布为50(35,63)岁(中值，四分位区间)，按照不同年龄段分为以下5个阶段：18～29岁290例(14.46%)、30～39岁344例(17.16%)、40～49岁344例(17.16%)、50～59岁390例(19.45%)，≥60岁637例(31.77%)。根据ARIA (The Allergic Rhinitis and its Impact on Asthma)指南和全球哮喘倡议指南(GINA guideline,http://ginasthma.org)诊断标准将就诊患者分为鼻炎组304例(15.16%)和哮喘组550例(27.43%)[5]；同时根据(The EAACI/GA2LEN/EDF/WAO Guideline)分为皮肤过敏组(含荨麻疹、特应性皮炎)290例(14.46%)[6]。其他可疑过敏性疾病组包括患者自述食物过敏、慢性咳嗽等924例(46.08%)。4组疾病患者的总IgE水平分别为136 (40,349)，80 (21,268)，111 (38,333)，61 (15,206) (kU/L)(见表1)。本研究及患者血清的使用经广州医科大学附属第一医院伦理委员会批准：GYYY-2016-73，所有患者均签署知情同意书。

1.1.2过敏原来源 过敏原购自Thermo Fisher Scientific,瑞典。

1.2方法 本研究采用Phadia 1000全自动荧光酶免疫检测系统(ImmunoCAP)对血清过敏原sIgE进行检测。所有患者均用含分离凝胶的真空采血管抽取静脉血5 ml，3 000 r/min离心10 min，取上层血清进行检测，剩余标本置于-80℃冰箱长期保存，避免反复冻融。检测项目为本院变态反应科实验室开展的成人过敏原筛查8项套餐项目，包括屋尘螨(d1)、猫毛(e1)、艾蒿(w6)、烟曲霉菌(m3)、蟑螂(i6)、小麦(f4)、大豆(f14)、虾(f24)。所有测试均按照过敏原试剂说明书进行。

1.3统计学分析 对于未稀释的血清样品，检测范围为0.01～100 kU/L。以0.35 kU/L作为阈值，sIgE结果≥ 0.35 kU/L则定义为血清致敏。按放射过敏原吸附试验 (radioallegrosorbent test,RAST)分级标准将sIgE阳性结果分为1～6级：级别1 (0.35～0.69 kU/L)，级别2 (0.70～3.49 kU/L)，级别3 (3.50～17.49 kU/L)，级别4 (17.50～49.99 kU/L)，级别5(50.00～99.99 kU/L)，级别6(≥100.00 kU/L)[7]。

使用Excel2016和SPSS23.0进行数据分析。采用柱状图表示成人患者8项过敏原的致敏阳性率分布，组间阳性率差异采用卡方检验(理论频数出现<5则用fish确切概率法校准)，两两比较采用Bonferroni法调整显著性水平；以折线图表示不同年龄阶段各项过敏原的变化趋势以及屋尘螨过敏原与其他7项过敏原合并致敏情况；使用Spearman检验分析8项过敏原相关性。以P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1成人常见8项过敏原sIgE致敏阳性率分布特征 本研究入选的2 005例成人过敏性疾病患者中，屋尘螨的阳性率最高(34.41%)，其次为蟑螂(24.14%)，猫毛过敏原在所检测的8种过敏原中阳性率最低(3.14%)。成人患者中虾过敏原也具有相对较高的致敏阳性率(21.00%)。此外，8项过敏原的阳性样本中均以1～3级为主，并有16.47%的成人过敏患者的总IgE(tIgE)水平在100 kU/L以上(图1)；tIgE水平为98 (34,301) kU/L(表1)。

2.2不同年龄阶段中性别过敏原致敏差异 结果如图2，对于屋尘螨、猫毛、艾蒿、蟑螂和虾过敏原，不同性别的阳性率随年龄的增加均呈下降趋势，在18～29岁阶段为阳性率峰值，并在≥60岁年龄段处于较低值。烟曲霉菌过敏原的女性致敏阳性率在50～59岁时达到峰值(8.12%)；男性阳性率随年龄增长呈上升趋势，并在≥60岁时达到峰值(10%)。广州地区成人患者对于烟曲霉菌、小麦和大豆过敏原致敏阳性率与年龄增长的线性关系较差，且不同性别的致敏情况在各年龄阶段差异无统计学意义 。

图1 成人过敏性疾病患者的8项常见过敏原阳性率分布Fig.1 Positive rates of eight common allergens in adult allergic patients

图2 不同年龄阶段男女性别过敏原阳性率分布情况Fig.2 Distribution of allergen positive rate between male and female at different ages

卡方检验结果表明蟑螂过敏原在各年龄阶段中男性的阳性率均略高于女性，并在30～39岁和≥60岁年龄段中的差异具有统计学意义(39.77% vs 27.38%,19.49% vs 10.53%,P<0.05)；在≥60岁年龄阶段烟曲霉菌过敏原男女致敏率差异具有统计学意义(10.00% vs 4.05%，P<0.05)。对于虾过敏原，整体上在成人患者中男性阳性率略高于女性，但仅在≥60岁时差异具有统计学意义(19.49% vs 8.50%,P<0.05)。

2.3不同疾病成人患者过敏原致敏差异分析 由表2可知，4类疾病组的主要过敏原均为屋尘螨、蟑螂和虾，猫毛阳性率最低。卡方检验结果显示，屋尘螨、猫毛、蟑螂和虾过敏原在鼻炎组、哮喘组、皮肤过敏组和其他过敏性疾病组的阳性率差异具有统计学意义(χ2=72.103,χ2=21.839,χ2=25.722,χ2=10.849,P<0.05);两两比较显示皮肤过敏组的屋尘螨、猫毛和蟑螂过敏原阳性率低于鼻炎组和其他过敏性疾病组(P<0.05)，对于上述8项常见过敏原，鼻炎组和哮喘组的阳性率均无统计学差异。

图3 屋尘螨阳性患者合并其他过敏原致敏百分率Fig.3 Sensitization percentage of house dust mite positive patients complicated with other allergens

表1 入选患者基本信息和总IgE分布水平

表2 基于4种疾病组成人患者的各项过敏原阳性率分布

表3 8项过敏原sIgE浓度 Spearman相关性分析

2.4屋尘螨阳性患者合并其他过敏原致敏分析 本研究入选的成人患者中，屋尘螨阳性样本中有71.43%(275/385)合并了其他7项过敏原中至少1项过敏原共同致敏，主要合并蟑螂和虾共同致敏，而对于猫毛、艾蒿、烟曲霉菌、小麦和大豆过敏原的合并致敏情况不明显。当屋尘螨sIgE浓度水平为2级时，合并蟑螂和虾的百分率最高，分别为70.85%和68.84%；在4级时，合并蟑螂和虾的百分率最低，分别为37.38%和39.25%(图3)。

2.58项常见过敏原血清sIgE相关性分析 屋尘螨、蟑螂和虾过敏原两两间呈显著的正相关，相关系数分别为0.823 (i6 vs f24)、0.801 (d1 vs f24)和0.737 (d1 vs i6，P<0.01)。艾蒿和其他7项过敏原也有较好的相关性，相关系数为0.538～0.785；此外，屋尘螨与猫毛相关系数为0.614 (P<0.01)，小麦和大豆相关系数为0.719 (P<0.01，见表3)。

3 讨论

世界卫生组织(WHO)数据表明目前全球有22%～25%的人患有过敏性疾病，在我国有超过两亿的过敏性疾病患者，并呈上升趋势[8]。常见的过敏性疾病包括过敏性鼻炎、过敏性哮喘、过敏性皮炎等。目前对于过敏性疾病的诊断主要根据患者临床症状、体内激发试验和体外过敏原sIgE检测，而体外过敏原sIgE检测因其不受患者皮肤、服药等因素干扰，可有效避免个体差异带来的不准确结果及患者不良反应的发生，使其在过敏性疾病预防诊治中占重要地位，现已在临床上广泛应用[9]。

Lou等[10]研究指出选择符合本地区特点的6～8种过敏原组可对96%以上的过敏性疾病患者做出正确的筛查诊断，并提倡各地区可以结合流行病学调查结果选择合适的过敏原组合进行临床筛查。本研究选择成人过敏性疾病患者筛查组合，包括屋尘螨、猫毛、艾蒿、烟曲霉菌、蟑螂、小麦、大豆、虾8项过敏原，结果表明本研究队列中超过40%的样本对上述8项过敏原的至少1项呈阳性。

与儿童和青少年过敏原分布特征相似，屋尘螨作为成人过敏患者最主要的吸入性过敏原，阳性率为34.41%[11]。在广州地区蟑螂是仅次于尘螨的常见吸入性过敏原(24.14%)，与中国其他地区报道基本一致[12]。既往研究也证实虾过敏原是广州地区最主要的食物过敏原，其在本研究中阳性率为21.00%[13,14]。衰老会显著影响免疫系统的相关功能，多项研究表明过敏患病率和IgE水平受年龄的影响[15-17]。本研究将患者年龄进一步划分为5个年龄阶段，结果显示，对于屋尘螨、猫毛、艾蒿、蟑螂和虾过敏原，不同性别的阳性率均随年龄的增加呈下降趋势，对于小麦和大豆过敏原，致敏阳性率与年龄增长的线性关系较差，且其不同性别的致敏阳性率在各年龄阶段差异均无统计学意义；屋尘螨、蟑螂和虾过敏原在各年龄段男性的致敏阳性率均高于女性，Boulet[18]等对3 371例呼吸道过敏疾病患者的研究中也发现男性比女性有更高的过敏指数，提示对于多数过敏原男性比女性更感敏。

对4组疾病的致敏阳性率进行分析，发现4个疾病组具有相似的致敏分布特征，均以屋尘螨为最主要的过敏原，猫毛致敏阳性率最低，与任华丽[19]报道的我国北京地区265例成人过敏性鼻炎患者sIgE检测结果一致。而对于主要的致敏过敏原，不同疾病患者的过敏原阳性率也不同，本研究结果显示，入院诊断为鼻炎的患者组比其他3组患者具有较高的阳性率，提示具有鼻炎相关临床症状的患者更多是由于过敏引起。多项研究已经报道原肌球蛋白作为屋尘螨、蟑螂和虾蟹的主要交叉变应原，可使屋尘螨阳性患者与蟑螂、虾蟹过敏原合并致敏，同时造成假阳性[20，21]；本研究观察到屋尘螨阳性样本中超过70%的患者合并了其他7项过敏原中至少1项过敏原共同致敏，其中以合并蟑螂和虾过敏原为主；相关性分析结果也表明屋尘螨、蟑螂和虾过敏原两两之间呈显著正相关。在屋尘螨致敏水平为2级和6级时，其合并蟑螂和虾共同致敏的概率最高，可能是由于由交叉反应蛋白(如原肌球蛋白)引起的阳性水平较低，而在致敏水平为6级时，则为真正的共同致敏，这需要采用组分诊断解决方案进一步深入验证。

总之，过敏原在成人过敏性疾病中仍是主要因素，并以屋尘螨、蟑螂和虾为最主要过敏原，且往往出现共同致敏现象；研究不同过敏性疾病患者过敏原致敏特征对过敏性疾病的预防诊治具有重要意义，可为临床诊断提供相关信息。