黄汉麟 郑镇森 黄凯涛

广东省汕头市潮阳区大峰医院消化内科 515154

肝硬化是慢性肝病发展的终末阶段，以肝细胞广泛坏死、肝小叶结构破坏、结节性再生、假小叶形成等为主要病理组织学改变。乙型肝炎肝硬化由长期乙肝病毒感染和复制破坏肝脏细胞所引起，患者早期无明显症状体征，以后随着肝脏代偿功能下降，会出现明显肝功能损害与门脉高压表现，并累及多系统，不易或不可逆转，是导致患者死亡的重要原因[1]。有研究指出，乙肝会引起复杂的免疫反应，VHC失代偿可导致全身炎性症状，会释放大量炎症因子，参与肝细胞损伤机制，加速病情恶化，抑制炎症因子释放对控制患者病程进展、改善预后具有积极作用[2]。现代研究发现，肠道菌群在人体营养吸收、新陈代谢、免疫功能等方面发挥着重要作用，一旦菌群稳态遭到破坏，可引起多种健康问题，也是研究认为的导致VHC发生与进展的“帮凶”[3]。本文对肠道菌群同VHC患者炎症因子与肝功能的关系进行研究，以期为本病临床治疗提供方向和思路。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2017年1月—2019年10月我院收治的VHC患者80例为研究对象。纳入标准：慢性乙型肝炎所致VHC，诊断符合中华医学会《肝硬化诊治指南》(2019)相关标准；年龄>18岁；对本研究知情同意。排除标准：合并其他肝脏疾病；合并感染性疾病或存在感染倾向；合并其他明确可以引起肠道菌群紊乱的疾病；近3个月内服用过影响肠道菌群的制剂。依据肝功能Child-Pugh改良分级结果不同分为三组。试验1组(A级，24例)：男13例，女11例，年龄39～75岁，平均年龄(56.2±10.9)岁。试验2组(B级，31例)：男17例，女14例，年龄35～78岁，平均年龄(55.8±12.1)岁。试验3组(C级，25例)：男14例，女11例；年龄38～76岁，平均年龄(56.0±11.4)岁。另根据一般资料相近原则，选取同期30例成年健康体检志愿者为对照组，排除标准同试验组。其中男18例，女12例；年龄36～77岁，平均年龄(55.9±11.3)岁。各组基线资料两两比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法 采集两组晨起粪便样本(干便)，常规送检试验室，取0.5g新鲜样本，加入4.5ml生理盐水中(换算匀浆比例10%)充分混匀，并以10倍连续稀释法继续稀释至10-9，分别取1ml稀释后的样本接种在培养基上，对具有代表性的乳杆菌、肠杆菌、梭菌、双歧杆菌、肠球菌进行培养和测定。肠杆菌和肠球菌为需氧菌，35℃孵育24h，乳杆菌、梭菌、双歧杆菌为厌氧菌，抽气换气培养法培养48h，采用全自动微生物鉴定系统鉴定细菌和计算细菌总量。另采集两组清晨空腹静脉血样，常规送检试验室，提取血清，以全自动生化分析及配套试剂测定炎症因子白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)以及肝功能指标血清总胆红素(TBil)与白蛋白(ALB)。基于测定的TBil、ALB水平，综合患者临床症状，依据Child-Pugh改良分级标准，将患者肝功能分为A、B、C三级(C级患者肝脏储备功能最差，A级最好)，分别纳入试验1、2、3组，结合对照组，比较观察各组指标差异，分析指标相关性。

1.3 统计学方法 以SPSS21.0软件统计分析所得数据，计量资料以均数±标准差表示，组间总体比较方差分析，多组间两两比较SNK-q检验，相关性采用Spearman秩相关分析检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 肠道菌群指标 各试验组乳杆菌、双歧杆菌水平均低于对照组；各试验组肠杆菌、梭菌、肠球菌水平均高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。且乳杆菌、双歧杆菌水平随肝功能的下降呈递减趋势，肠杆菌、梭菌、肠球菌随肝功能的下降呈递增趋势，组间两两比较差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 各组肠道菌群指标比较

2.2 炎症因子水平 各试验组IL-6、IL-8、TNF-α、TGF-β均高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。且IL-6、IL-8、TNF-α、TGF-β随患者肝功能的下降呈递增趋势，组间两两比较差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 各组血清炎症因子水平比较

2.3 肝功能指标 各试验组TBil均高于对照组，ALB均低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。且TBil随肝功能下降呈递增趋势，ALB随肝功能的下降呈递减趋势，组间两两比较差异有统计学意义(P<0.05)，见表3。

表3 各组肝功能指标比较

2.4 相关性分析 经Spearman相关分析，乳杆菌、双歧杆菌与四项炎症因子指标呈负相关，肠杆菌、梭菌、肠球菌与四项炎症因子指标呈正相关，差异有统计学意义(P<0.05)。乳杆菌、双歧杆菌与肝功能指标TBil呈负相关，与ALB呈正相关，肠杆菌、梭菌、肠球菌与肝功能指标TBil呈正相关，与ALB呈负相关，差异有统计学意义(P<0.05)，见表4。

表4 VHC患者肠道菌群与血清炎症因子及肝功能的相关系数(r)

3 讨论

肠道菌群与肝脏健康关系密切。有研究指出，肠道吸收的营养成分经由肝脏代谢后合成人体所需物质，在这一过程中，肠道菌群中的益生菌参与肝细胞蛋白质代谢，可以帮助提高肝脏代谢能力，减轻肝脏解毒负荷，对肝脏具有保护作用[4-5]。如果肠道菌群失调，肠内营养物质代谢紊乱，会损伤肠道黏膜，使通透性增加，细菌及代谢物进入循环系统，会加重肾脏负担和损害，形成恶性循环[6-7]。反之，VHC患者肝功能损伤，肝脏代谢异常，对肠源性有毒物质的分解能力下降，也会引起肠道菌群紊乱。由此可见，肝脏与肠道是相互作用的，肠道菌群稳态、肠道屏障完整是保护肝脏健康的重要途径。

本次临床研究结果显示，乳杆菌、双歧杆菌与肝功能指标TBil呈负相关，与ALB呈正相关，肠杆菌、梭菌、肠球菌与肝功能指标TBil呈正相关，与ALB呈负相关，提示VHC患者肠道菌群紊乱与肝功能密切相关，紊乱程度越严重，肝功能水平越低。有学者在研究中指出[8-9]，肠道菌群紊乱是肝硬化患者肝功能下降的重要促发因素，在常规保肝治疗基础上，予以肝硬化患者三联活菌治疗，积极纠正肠道菌群失衡，结果显示肝功能指标得到显著改善，证明了肠道菌群失衡对肝硬化患者肝功能的影响，与本文研究结论相符。

VHC病理进展过程中有着复杂的免疫反应，亦会引起全身炎性症状，参与肝细胞损伤机制。现代研究发现，肠道菌群也与慢性炎症存在密切关联。目前，已有证据表明，改变肠道菌群能够增加炎症标志物[10]。另有研究指出，肠道菌群可能是炎症反应的驱动力，肠道菌群紊乱，肠屏障功能减弱，会加速毒素进入血液，引发炎症，而有些益生菌具有物理强化肠屏障的功能，其产生的短链脂肪酸也有助于减少促炎细胞因子的生成[11-12]。本研究比较观察VHC患者肠道菌群与炎症因子水平，结果显示菌群紊乱越严重，患者的血清炎症因子水平越高，考虑原因在于肠道菌群紊乱，有益菌遭到抑制，VHC患者炎症反应增加了胃肠道通透性，大量释放的炎性因子得以通过肠屏障进入血液，损伤肝脏，促使VHC进展。这使得肝脏的代谢与分泌功能进一步恶化，加剧了炎症因子释放与肠道菌群紊乱，最终导致恶性循环。

综上所述，肠道菌群失调与血清炎症因子及肝功能密切相关，维持乙型VHC患者肠道菌群平衡，对降低血清炎症因子水平，改善肝功能具有积极作用，应引起临床重视。