潘新平 田立

（定西市人民医院肿瘤科 甘肃 定西 743000）

胃癌患者的早期症状并不显著，因此发现时大部分患者已是中晚期，化疗或放疗的治疗效果均较差[1]。目前胃癌的发生发展及转移的早期诊断及治疗的特异性指标尚未发现，因此寻找早期诊断及治疗的靶标是研究的热点。近些年研究者发现微小RNAs（miRNAs）与胃癌患者细胞分化、发育、增殖、凋亡等多种生物学过程相关[2]。因此本研究对胃癌与癌旁组织中存在差异性表达的miR-193a-3p 进行分析。观察其在胃癌与癌旁组织中表达量的差异与病理分期、病理类型等之间的关系，为胃癌的临床早期诊断提供参考。

1.资料与方法

1.1 一般资料

自2018 年4 月—2019 年5 月在本院收集38 例胃肠外科胃癌手术患者的肿瘤样本作为研究对象，所有标本均经术后病理确诊为胃癌。其中男性28 例，女性10 例，年龄27 ～69 岁，平均年龄为（56.6±15.2）岁。T 分期：T1 期22 例，T2 期12 例，T3 期3 例，T4 期1 例。临床分期：Ⅰ期22 例，Ⅱ期12 例，Ⅲ期3 例，Ⅳ期1 例。所有标本收集前均获得患者及家属的知情同意，并通过医院伦理委员会批准。

1.2 主要仪器和试剂

ABI 7500 实时荧光定量PCR 仪（美国ABI 公司）；美国Thermo 紫外分光光度计；RNA 提取试剂Trizol 试剂（美国invitrogen 公司）。

1.3 方法

1.3.1 总RNA 的提取 使用液氮研磨法将组织磨成粉末，按照说明书的步骤加入Trizol 试剂提取标本中的总RNA，使用紫外分光光度计测定其浓度，记录OD260 值，所提总RNA 放置于-80℃待测。

1.3.2 qRT-PCR 按照说明书的步骤操作。取1μl 总RNA 加入20μl 反应体系中，在PCR 仪上进行反转录，将反应体系设置为37℃ 60 min，95℃ 5 min，合成cDNA。以U6 snRNA 作为内参，引物序列（上海捷瑞生物工程有限公司）见表1。样品目的基因相对表达量采用ΔΔCT 方法计算，其中相对表达量=2-ΔΔCT。

表1 RT-PCR 特异性引物

1.3 统计学方法

采用SPSS19.0 软件对数据进行统计学分析，其中计量数据采用均数±标准差表示，采用t 检验进行两组之间的比较，采用四格表χ2检验分析miR 表达量和患者临床病理特征的关系。以P ＜0.05 为差异具有统计学意义。

2.结果

2.1 miR-193a-3p 在胃癌和癌旁组织中的表达情况

在胃癌患者癌组织和癌旁组织中miR-193a-3p 的相对表达量为（1.98±0.20）和（0.75±0.12），miR-193a-3p 在癌组织的相对表达量显著高于癌旁组织（P ＜0.05）。

2.2 胃癌及癌旁组织中miR-193a-3p 的表达差异与临床病理指标的相关性

以胃癌组织中miR-193a-3p 的表达量平均值作为分界，将38 例标本分为miR-193a-3p 低表达组和miR-193a-3p 高表达组。按照患者平均年龄54.2 岁为分界，分为≤54.2 岁组和＞54.2岁组，对患者的临床病理指标进行χ2检验。结果显示胃癌组织中miR-193a-3p 表达水平的高低与T 分期、临床分期相关，与患者性别、年龄无显著相关性，见表2。

表2 miR-193a-3p 表达水平和胃癌临床病理指标的相关性[n（%）]

3.讨论

miRNA 在胃癌等恶性肿瘤重起着重要作用，有研究显示胃癌组织中也存在miRNA 表达的异常[3]，miRNA 参与调控机体包括细胞增殖、分化和凋亡等的多种生理过程[4]。本研究对miR-193a-3p 在胃癌中的表达及临床意义进行探讨，以期服务于胃癌的临床诊断。

本研究结果显示miR-193a-3p 在胃癌者的癌组织中相对表达量显著高于癌旁组织，差异具有统计学意义（P ＜0.05）。胃癌组织中miR-193a-3p 表达水平的高低与T 分期、临床分期相关，与患者性别、年龄无显著相关性。结果提示miR-193a-3p 可能在促进胃癌发生发展中起重要作用，miR-193a-3p 有望成为早期诊断的新型标志物。