刘润丽

【摘要】 目的：探討吉西他滨联合依立替康对宫颈癌患者血管生成与侵袭能力的影响。方法：选取2018年4月-2019年10月本院收治的宫颈癌患者76例，按照抽签法分为对照组（n=38）与研究组（n=38）。对照组实施单一依立替康治疗，研究组在对照组的基础上联合吉西他滨治疗。比较两组治疗效果、侵袭能力、血管内皮生长因子（VEGF）、肿瘤微血管密度及不良反应发生情况。结果：研究组治疗总有效率明显高于对照组（P<0.05）。两组病灶组织的细胞外因子蛋白（Wnt）1、Wnt3a、Wnt8、β-链蛋白水平、VEGF与肿瘤微血管密度均明显高于健康组织（P<0.05）;研究组病灶组织Wnt1、Wnt3a、Wnt8、β-链蛋白水平、VEGF与肿瘤微血管密度均低于对照组病灶组织（P<0.05）。两组不良反应发生率比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论：吉西他滨联合依立替康治疗宫颈癌患者效果显著，可改善VEGF水平，降低癌细胞的侵袭能力，且安全性较高，值得推广应用。

【关键词】 吉西他滨 依立替康 宫颈癌 血管生成

Effect of Gemcitabine Combined with Irinotecan on Angiogenesis and Invasive Ability of Patients with Cervical Cancer/LIU Runli. //Medical Innovation of China， 2020， 17（15）： 0-053

[Abstract] Objective： To investigate the effect of Gemcitabine combined with Irinotecan on angiogenesis and invasive ability of patients with cervical cancer. Method： A total of 76 patients with cervical cancer treated in our hospital from April 2018 to October 2019 were selected. They were divided into control group （n=38） and study group （n=38） according to the lottery method. The control group was treated with Irinotecan alone， and the study group was treated with Gemcitabine on the basis of the control group. The therapeutic effect， invasive ability. vascular endothelial growth factor （VEGF）， tumor microvascular density and adverse reactions were compared between the two groups. Result： The total effective rate of treatment in the study group was significantly higher than that in the control group （P<0.05）. The levels of Wnt1， Wnt3a， Wnt8， β-chain protein， VEGF and tumor microvascular density of focus tissues in the two groups were significantly higher than those in the healthy tissues （P<0.05）. The levels of Wnt1， Wnt3a， Wnt8， β-chain protein， VEGF and tumor microvascular density of focus tissues in the study group were lower than those of focus tissues in the control group （P<0.05）. There was no statistically significant difference in the incidence of adverse reactions between the two groups （P>0.05）. Conclusion： Gemcitabine combined with Irinotecan has a significant effect in the treatment of cervical cancer patients， which can improve the level of VEGF and reduce the invasion ability of cancer cells and has a high safety. It is worth of promoting its application.

[Key words] Gemcitabine Irinotecan Cervical cancer Angiogenesis

First-authors address： Jiamusi University Grand Hospital， Jiamusi 154002， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2020.15.013

目前，宫颈癌在妇科恶性肿瘤中已十分常见，在早期临床上主要采用手术切除的方法对其进行有效治疗，而单纯的手术治疗后易出现复发的情况，因此需进行放疗、化疗等辅助治疗，不仅可以促进肿瘤体积缩小，还可以使癌细胞增殖能力明显降低，有效控制疾病的复发[1]。目前，对于宫颈癌的早、中期患者来说，临床主要采用手术病灶切除联合放化疗进行治疗[2]。随着医疗技术水平的发展进步，出现了新型的化疗药物，使宫颈癌治疗效果有了进一步提高的希望。吉西他滨就是新型抗代谢类抗癌药物之一，是治疗胰腺癌和非小细胞癌的一线药物，同时是治疗宫颈癌的二线药物。吉西他滨对胰腺癌、肝癌、非小细胞肺癌患者体内的β-链蛋白和血管内皮生长因子（VEGF）具有明显的调控作用，除此之外还可以对细胞增殖及肿瘤血管生产进行有效阻碍[3]。国内外对吉西他滨治疗宫颈癌的相关研究较少，其具体机制目前还未明确。本研究对宫颈癌患者采用吉西他滨联合依立替康进行治疗，探讨其对患者血管生成及侵袭能力的影响，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018年4月-2019年10月本院宫颈癌患者76例。纳入标准：（1）经临床确诊为宫颈癌;（2）术后病理确诊为早、中期宫颈癌;（3）神志清醒，具有一定文化水平，可进行正常沟通交流。排除标准：（1）合并肾脏或其他严重疾病;（2）依从性较差或拒绝参与本次研究;（3）非第一次进行放、化疗或手术;（4）妊娠期或哺乳期妇女。按照抽签法分为对照组（n=38）与研究组（n=38）。所有患者及家属均知情同意并签署知情同意书，本研究已经医院伦理委员会批准。

1.2 方法 对照组实施单一依立替康治疗。静脉滴注100 mg/m2的依立替康（生产厂家：上海创诺制药有限公司，批准文号：国药准字H20123191，规格：2 mL︰40 mg），第1～8天静脉滴注时间以1.5 h为宜。研究组在对照组的基础上联合吉西他滨进行治疗。依立替康的用法用量与对照组完全相同。静脉滴注100 mg/m2的吉西他滨（生产厂家：哈药集团生物工程有限公司，批准文号：国药准字H20113398，规格：1.0 g），第1～8天静脉滴注时间以1.5 h为宜。两组均治疗4个疗程，1个疗程21 d。治疗2个疗程后，两组施子宫切除术和盆腔淋巴结清扫术，切缘与肿瘤组织边缘间距1.5 cm以上。在治疗期间为了缩小治疗结果的误差，两组严禁使用其他治疗药物及方法。保持患者周围环境及衣物的干净整洁，饮食上以清淡易消化为主，多吃高蛋白高纤维的食物，多吃水果、蔬菜。在患者出现负性情绪时要适当给予心理安慰及疏导。

1.3 观察指标与判定标准 （1）比较两组治疗效果。以国际抗癌联盟实体瘤疗效为依据对两组治疗效果进行评估。完全缓解（CR）：经治疗临床症状完全消失，病灶及癌细胞完全消失;部分缓解（PR）：临床症状得到明显缓解，病灶体积缩小35%及以上;稳定（SD）：临床症状无明显缓解，病灶体积缩小35%以下或无增加;进展（PD）：临床症状明显严重，病灶体积增加或出现新病灶[4]。总有效=CR+PR。（2）比较两组侵袭能力。包括细胞外因子蛋白（Wnt）1、Wnt3a、Wnt8与β-链蛋白水平。（3）比较两组VEGF与肿瘤微血管密度。将两组病灶及病灶周围健康组织进行局部切除并实施免疫组化染色，对CD34+表达数进行测定，作为肿瘤微血管密度。将切片用常规石蜡进行包埋，在进行脱蜡处理使用水和磷酸缓释液进行冲洗，在微波热修复，使用灭活内源性过氧化物（3.0%过氧化氢），山羊血清封闭，滴加一抗，取1/50浓度为宜，稀释液选用磷酸缓释液，将温度设为4 ℃孵育过夜，随后用磷酸缓释液冲洗，滴加二抗，浓度以1/100为宜，进行15 min的孵育温度为37 ℃，二氧基联苯胺显色，阳性：苏木精复染为棕色。在低倍镜下取5个着色理想区域，高倍镜下计数，着色区不管是否存在管腔均视为1条新生血管，最终结果为总新生血管数/5。术中切除的两组病灶及病灶周围健康组织按照1︰9质量比混入0.9%氯化钠注射液中，电动匀浆，离心后取上清液，采用全自动生化分析仪同时选用配套的试剂盒，用酶联免疫吸附测定VEGF、Wnt1、Wnt3a、Wnt8与β-链蛋白水平[5-6]。（4）比较两组不良反应发生情况，包括胃肠道反应、局部疼痛及骨髓抑制。

1.4 统计学处理 采用SPSS 24.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（x±s）表示，组间比较采用独立样本t检验，组内比较采用配对t检验;计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组一般资料比较 对照组年龄34～64岁，平均（48.4±3.1）岁;病程3个月～3年，平均（1.7±0.4）年;其中鳞癌31例，腺癌7例。研究组年龄33～64岁，平均（48.6±3.2）岁;病程3个月～3年，平均（1.9±0.3）年;其中鳞癌29例，腺癌9例。两组一般资料比较，差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

2.2 两组治疗效果比较 研究组治疗总有效率明显高于对照组，差异有统计学意义（字2=5.684，P<0.05），见表1。

2.3 两组侵袭能力比较 两组健康组织的Wnt1、Wnt3a、Wnt8与β-链蛋白水平比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。两组病灶组织的Wnt1、Wnt3a、Wnt8与β-链蛋白水平均明显高于健康组织，差异均有统计学意义（P<0.05）。研究组病灶组织的Wnt1、Wnt3a、Wnt8与β-链蛋白水平均低于对照组病灶组织，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表2。

2.4 两组VEGF與肿瘤微血管密度比较 两组健康组织的VEGF与肿瘤微血管密度比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。两组病灶组织VEGF与肿瘤微血管密度均高于健康组织，差异均有统计学意义（P<0.05）。研究组病灶组织VEGF与肿瘤微血管密度均低于对照组病灶组织，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表3。

2.5 两组不良反应发生情况比较 两组不良反应发生率比较，差异无统计学意义（字2=0.256，P>0.05），见表4。

3 讨论

在恶性肿瘤中有13%的患者为宫颈癌，在妇科临床中该疾病发生率略低于乳腺癌，位居第二位，是临床中较为常见的恶性肿瘤之一。对于宫颈癌患者来说化疗在治疗中十分重要[7-8]。相关研究结果显示，中早期宫颈癌患者在实施相关治疗后采用化疗进行辅助治疗可改善术后5年内的存活率[9]。

吉西他滨主要是由盐酸双氟脱氧胞苷组成，主要作用于DNA合成期，对癌症疾病的进展有明显的阻碍作用[10-11]。尤其在肿瘤中期患者中吉西他滨新辅助化疗较为常用，在抑制淋巴结扩散、减小肿瘤体积有显著效果，适用于由于各种原因无法接受手术治疗的患者，与放化疗联合使用临床效果较为突出[12-13]。本研究结果显示，研究组临床治疗总有效率明显高于对照组（P<0.05）。除此之外，该药物在对胰腺癌和肝癌、非小细胞肺癌及宫颈癌患者体内的VEGF和β-链蛋白，对肿瘤细胞侵袭转移和新生血管生成均有良好的抑制作用。

相关研究结果显示，吉西他滨可对宫颈癌细胞侵袭进行抑制，其主要原因是该药物可使miR-497表达得到增强[14];有研究学者指出，吉西他滨对宫颈癌组织局部抗/促凋亡因子方面有着调整作用，可加速癌细胞凋亡，但对于抗血管生成、抗细胞侵袭的关联性尚未给出统一结论[15]。肿瘤的形态学基础就是血管生成，对生物学行为正常发挥起到至关重要的作用[16]。VEGF对血管内皮细胞迁移、增殖、向新生血管转化有着促进效果，给肿瘤细胞增殖提供良好的微环境[17]。目前开发肿瘤血管生成抑制剂主要是以VEGF及其受体为靶点进行研发，并取得十分理想的效果[18]。肿瘤的与发生及进展直接受到Wnt信号通路的影响，也可以直接反映出肿瘤的侵袭情况及恶性程度，其中最为经典的通路为Wnt/β-catenin，被证实宫颈癌的侵袭和转移需要该通路的全程参与。β-catenin定位于染色体3p21-p22，也是目前调节Wnt信号通路最重要的因子，若β-catenin处于低表达状态，Wnt通路则是呈现关闭状态的，相反则Wnt通路呈开放状态。β-catenin以Wnt1、Wnt3a、Wnt8为启动因子。

本研究结果显示，两组病灶组织Wnt1、Wnt3a、Wnt8、β-链蛋白水平、VEGF与肿瘤微血管密度均明显高于健康组织（P<0.05）。研究组病灶组织Wnt1、Wnt3a、Wnt8、β-链蛋白水平、VEGF与肿瘤微血管密度均低于对照组病灶组织（P<0.05）。相关研究显示，肿瘤发生及进展过程主要是有细胞外因子蛋白信号通路的参与，从而表达出肿瘤恶性程度及侵袭性，其中最为典型的通路为β-链蛋白，该通路是导致宫颈癌转移和侵袭的主要通路[19-20]。

综上所述，吉西他滨联合依立替康治疗宫颈癌患者效果显著，可改善VEGF水平，降低癌细胞的侵袭能力，且安全性较高，值得推广应用。

参考文献

[1]陈宇杰，石志敏，李雪青.乌梅丸联合驻车丸灌肠防治宫颈癌放疗所致急性放射性直肠炎的临床观察[J].中华中医药杂志，2018，33（7）：2975-2977.

[2]贺桂芳，牟天龙，潘彦舒，等.DAPT抑制Notch信号通路在姜黄素介导光动力治疗宫颈癌裸鼠移植瘤的机制研究[J].中华医学杂志，2018，98（19）：1511-1516.

[3]段旭华，李凤尧，韩新巍，等.双肾造瘘联合输尿管阻断支架治疗宫颈癌放射治疗致膀胱阴道瘘的疗效[J].中华放射学杂志，2018，52（3）：218-222.

[4]史凡黎，王敏，尹宏岩，等.两种子宫颈锥切术治疗子宫颈癌前病变疗效及对保留生育功能影响研究[J].中国实用妇科与产科杂志，2019，35（6）：702-705.

[5]李灼非，邓兴明，李粤.血清及癌组织VEGF及其受体在结肠癌患者中的变化观察[J].中国医学创新，2019，16（4）：47-50

[6]张广民，陈鸿友，宋丽华，等.腹腔镜下保留盆神经丛的子宫颈癌根治术对改善排尿排便功能的相关研究[J].中国妇产科临床杂志，2019，20（2）：120-123.

[7]谢瑞霖，王慧，仝少冬，等.ⅠB2-ⅡB期宫颈癌新辅助治疗联合手术对比根治性同步放化疗疗效及安全性的Meta分析[J].中华放射肿瘤学杂志，2019，28（6）：428-431.

[8]李永斌，王燕玲，卓延红.图像引导放射治疗下宫颈癌真空袋固定与Orfit架联合热塑体膜固定的应用效果比较[J].中华肿瘤杂志，2017，39（6）：467-470.

[9]曲昂，孙海涛，姜伟娟，等.剂量学参数对CT引导125I放射性粒子植入治疗放疗后盆腔复发宫颈癌疗效的影响[J].中华医学杂志，2018，98（37）：3014-3016.

[10] Zheng J，Huang B，Zhou Y，et al.Concomitant chemoradiation followed by radical surgery for locally advanced cervical cancer patients：Preliminary results from a randomized，controlled trial[J].Chinese Journal of Evidence-Based Medicine，2017，17（1）：1-6.

[11]赵艳，张婷婷.新型肿瘤靶向纳米颗粒联合光動力治疗对人宫颈癌Hela细胞的体外杀伤作用[J].西安交通大学学报（医学版），2019，40（4）：542-548.

[12]曲昂，彭冉，姜玉良，等.3D打印共面坐标模板辅助125I放射性粒子植入治疗盆壁复发宫颈癌的剂量学研究[J].中华放射医学与防护杂志，2018，38（10）：756-760.

[13]刘采虹，刘利，曾曼婷，等.不同位置子宫颈癌三维与二维近距离放疗剂量学研究和最适治疗人群探讨[J].中华放射肿瘤学杂志，2018，27（11）：1004-1008.

[14]梁美蓉，韩斗星，江维，等.腹腔镜下以子宫深静脉及其属支为解剖学标志的C1型子宫切除术治疗宫颈癌的临床分析[J].中华肿瘤杂志，2018，40（4）：288-294.

[15]蒋佳佳，刘红，王玉净，等.宫颈癌术后盆腔复发患者放射治疗效果及预后的影响因素[J].中华放射医学与防护杂志，2019，39（3）：208-212.

[16]陈春林，李朋飞.从中国宫颈癌真实世界研究临床大数据看宫颈癌术前化疗存在的问题和对策[J].中国实用妇科与产科杂志，2018，34（11）：1185-1189.

[17] Derks M，Velden J V D，Kroon C D D，et al.Surgical Treatment of Early-Stage Cervical Cancer：A Multi-Institution Experience in 2124 Cases in The Netherlands Over a 30-Year Period[J].International Journal of Gynecological Cancer，2018，28（4）：1.

[18]陈瑜，刘俊，黄利红.miR-93-5p靶向MICA基因促進宫颈癌细胞活力并上调NK细胞Th1细胞因子表达[J].现代免疫学，2019，39（3）：201-205.

[19]张莹莹，靳莉莉，崔婷.六君子汤对宫颈癌辅助放化疗患者免疫功能、癌因性疲乏与生活质量的影响[J].中华中医药学刊，2018，36（7）：1721-1723.

[20] Arumugam S，Bandil K，Proksch P，et al.Effects of A.marina-Derived Isoquercitrin on TNF-Related Apoptosis-Inducing Ligand Receptor（TRAIL-R）Expression and Apoptosis Induction in Cervical Cancer Cells[J].Applied Biochemistry and Biotechnology，2017，182（2）：697-707.

（收稿日期：2020-03-10） （本文编辑：田婧）