姬明杰 武军 孙丽君 左金玲

[摘要] 目的 分析基质金属蛋白酶（MMPs）与子痫前期发病的相关性。 方法 随机选取2016年2月～2018年2月河北省唐山市妇幼保健院子痫前期患者51例为研究对象，根据其病情严重程度将其分为重度组（n = 22）和轻度组（n = 29）;将同期正常足月妊娠妇女纳入对照组（n = 30）。比較三组血清MMP-2、MMP-9水平，分析血清MMP-2、MMP-9水平与子痫前期发病的相关性，评价MMP-2、MMP-9水平对重度子痫前期的预测价值。 结果 重度组血清MMP-2、MMP-9水平低于轻度组和对照组，轻度组血清MMP-2、MMP-9水平低于对照组（均P < 0.05）。Spearman相关分析显示，血清MMP-2、MMP-9水平与子痫前期发病及病情严重程度呈负相关（r = -0.839、-0.747，P < 0.001）。血清MMP-2水平预测重度子痫前期的临界值为54.89 pg/mL，敏感度、特异性分别为0.818、0.828;血清MMP-9水平预测重度子痫前期的临界值为175.62 pg/mL，敏感度、特异性分别为0.818、0.897。 结论 血清MMP-2、MMP-9水平与子痫前期发病及病情严重程度密切相关，对重度子痫前期有一定预测价值。

[关键词] 基质金属蛋白酶2;基质金属蛋白酶9;子痫前期;相关性

[中图分类号] R714.244          [文献标识码] A          [文章编号] 1673-7210（2020）04（c）-0101-04

Correlation between matrix metalloproteinases and onset of preeclampsia

JI Mingjie   WU Jun   SUN Lijun   ZUO Jinling

Department of Obstetrics， Tangshan Maternal and Child Health Hospital， Hebei Province， Tangshan   063000， China

[Abstract] Objective To analyze the correlation between matrix metalloproteinases （MMPs） and onset of preeclampsia. Methods From February 2016 to February 2018， 51 cases with preeclampsia patients in Tangshan Maternal and Child Health Hospital of Hebei Province were randomly selected for the study. According to the severity of disease， they were divided into severe group （n = 22） and mild group （n = 29）. Women with normal term pregnancy at the same time were included in control group （n = 30）. The levels of serum MMP-2 and MMP-9 were compared among three groups. The correlation between serum levels of MMP-2， MMP-9 and onset of preeclampsia was analyzed. The predictive value of MMP-2 and MMP-9 levels on severe preeclampsia was evaluated. Results The levels of serum MMP-2 and MMP-9 in severe group were lower than those in mild group and control group， and the levels serum MMP-2 and MMP-9 in mild group were lower than those in control group （all P < 0.05）. Spearman correlation analysis showed that serum MMP-2 and MMP-9 levels were negatively correlated with onset of preeclampsia and disease severity （r = -0.839， -0.747; P < 0.001）. The cut-off value of serum MMP-2 level was 54.89 pg/mL in predicting severe preeclampsia， and the sensitivity， specificity were 0.818， 0.828. The cut-off value of serum MMP-9 level was 175.62 pg/mL in predicting severe preeclampsia， and the sensitivity， specificity were 0.818， 0.897. Conclusion The levels of serum MMP-2 and MMP-9 are closely related to the onset of preeclampsia and severity of preeclampsia， which has certain predictive value for severe preeclampsia.

[Key words] Matrix metalloproteinase-2; Matrix metalloproteinase-9; Preeclampsia; Correlation

子痫前期是严重威胁母婴身体健康和生命安全的妊娠期特发疾病，该病在发展中国家的发病率为1.8%～16.7%，我国发病率为2.81%～4.82%[1]。按其病情严重程度可分为轻度或重度子痫前期，重度子痫前期孕妇常需娩出胎儿以消除母体症状，但过早终止妊娠对围生儿预后不利[2]。随着研究的深入，目前普遍认为滋养细胞侵袭异常、血管内皮损伤等情况是导致子痫前期发病的关键环节[3]。相关研究[4-5]显示，基质金属蛋白酶（MMPs）如MMP-2、MMP-9等与血管生成和滋养细胞的侵袭能力密切相关，可能与子痫前期发病有一定相关性。对此，本研究观察子痫前期患者血清MMP-2、MMP-9水平变化情况，分析上述指标与子痫前期发病的相关性，现报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

随机选取2016年2月～2018年2月河北省唐山市妇幼保健院子痫前期患者51例为研究对象，根据病情严重程度将其分为重度组（n = 22）和轻度组（n = 29）。纳入标准：①符合《妇产科学》（第8版）[6]中子痫前期诊断分类标准者;②年龄20～40岁;③单胎妊娠;④临床资料完整;⑤自愿签署知情同意书。排除标准：①妊娠前或孕期20周前发生高血压者;②有其他确诊并发症和合并症者。将同期正常足月妊娠妇女纳入对照组（n = 30），排除伴糖脂代谢紊乱者;伴并发症和合并症者;资料不全者。

1.2 方法

收集三组年龄、产次、孕龄、体重指数等一般资料。三组受试者入组时采集清晨空腹静脉血4 mL，离心分离血清，-70℃冰箱保存;采用酶联免疫法检测血清MMP-2、MMP-9水平，试剂盒均来自上海润裕生物科技有限公司（生产批号：151244、151149）。检测方法：检测前20 min将试剂盒从冰箱取出，平衡至室温后（20～25℃），取出板条;在酶标板上设标准孔10孔，第1、2孔各加标准品100 μL，再向第1、2孔各加标准品稀释液50 μL，混匀;从第1、2孔中各取100 μL分别加入第3、4孔，再向第3、4孔分别加标准品稀释液50 μL，混匀;从第3、4孔各取50 μL弃去，再各取50 μL分别加入第5、6孔，再往第5、6孔分别加标准品稀释液50 μL，混匀;从第5、6孔中各取50 μL分别加入第7、8孔，再往第7、8孔中分别加标准品稀释液50 μL，混匀;从第7、8孔分别取50 μL加入第9、10孔，再向第9、10孔分别加标准品稀释液50 μL，混匀后从第9、10孔各取50 μL弃去。在酶标板上待测样品孔中先加样品稀释液40 μL，然后再加待测样品10 μL;将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀后，用封板膜封板后置37℃温育30 min。小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 s后弃去，重复5次，拍干。除空白孔外各孔加酶标试剂50 μL，封板膜封板后置37℃温育30 min，再次洗涤。每孔依次加入显色剂A、B各50 μL，轻微震荡混匀，37℃避光显色15 min。各孔加终止液50 μL，终止反应，此时蓝色立即转黄色。以空白孔调零，450 nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度，再乘以稀释倍数。

1.3 观察指标

比较三组受试者一般资料及血清MMP-2、MMP-9水平差异;分析血清MMP-2、MMP-9水平与子痫前期发病的相关性。评价MMP-2、MMP-9水平对重度子痫前期的预测价值。

1.4 统计学方法

采用SPSS 19.0统计学软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，多组间比较采用单因素方差分析，两组间比较采用t检验;计数资料用百分率表示，组间比较采用χ2检验;相关性分析采用Spearman相关分析;绘制ROC曲线分析评价MMP-2、MMP-9水平对重度子痫前期的预测价值，以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组一般资料比较

三组年龄、产次、孕龄、体重指数等一般资料比较，差异无统计学意义（P > 0.05），具有可比性。見表1。

表1   三组一般资料比较（x±s）

2.2 三组血清MMP-2、MMP-9水平比较

重度组血清MMP-2、MMP-9水平低于轻度组和对照组，轻度组血清MMP-2、MMP-9水平低于对照组（均P < 0.05）。见表2。

表2   三组血清MMP-2、MMP-9水平比较（pg/mL，x±s）

注：与对照组比较，aP < 0.05;与轻度组比较，bP < 0.05。MMP：基质金属蛋白酶

2.3 Spearman相关分析结果

血清MMP-2、MMP-9水平与子痫前期发病及病情严重程度呈负相关（r = -0.839、-0.747，P < 0.001）。

2.4 ROC曲线结果

血清MMP-2水平预测重度子痫前期的临界值为54.89 pg/mL，曲线下面积（AUC）为0.845，敏感度、特异性分别为0.818、0.828;血清MMP-9水平预测重度子痫前期的临界值为175.62 pg/mL，AUC为0.845，敏感度、特异性分别为0.818、0.897。见图1。

MMP：基质金属蛋白酶

图1   ROC曲线结果

3 讨论

子痫前期是妊娠期特发疾病，患者主要表现为不同程度的高血压、蛋白尿、水肿，严重时出现抽搐、昏迷等，严重影响母婴身体健康和生命安全[7-9]。该病的确切病因及机制尚未阐明，相关研究[10]显示，其与子宫螺旋动脉重构障碍、血管内皮细胞受损、胰岛素抵抗、遗传等多方面因素有关。MMPs是一组具有重塑和改造细胞外基质成分特性的锌、钙依赖性的内肽酶。有研究[11]发现，MMP-2和MMP-9参与胎盘和子宫螺旋动脉的重塑，可能与子痫前期发病有一定相关性。

胎盘滋养细胞对子宫蜕膜侵入不足所致的胎盘浅着床将引起子宫螺旋动脉重塑障碍、小动脉痉挛等一系列病理生理改变，目前研究认为上述过程是导致子痫前期发病的关键环节[12]。滋养细胞分泌的MMP-2是一种可降解Ⅳ型胶原的特殊蛋白水解酶，活化的MMP-2定位于细胞穿透基质的突出部位，可在酶解基底膜Ⅳ型胶原及细胞间基质成分中发挥“钻头”作用，与滋养细胞侵入能力密切相关[13]。血管内皮功能障碍亦是子痫前期的主要病理改变，MMP-2是血管重建和血管生成的主要介导物[14-15]。本研究结果显示，重度组血清MMP-2水平低于轻度组和对照组，轻度组MMP-2水平低于对照组（均P < 0.05）;Spearman相关分析显示，血清MMP-2水平与子痫前期发病及病情严重程度呈负相关性，提示血清MMP-2水平降低可反映子痫前期加重。何西彦等[16]研究发现，当MMP-2表达不足时，胎盘滋养细胞缺乏足够的动力穿透子宫蜕膜，与子痫前期发病密切相关，与本研究基本一致。

本研究结果显示，重度组血清MMP-9水平低于轻度组和对照组，轻度组血清MMP-9水平低于对照组（均P < 0.05）;Spearman相关分析显示，血清MMP-9水平与子痫前期发病及病情严重程度呈负相关性。MMP-9是一类由滋养细胞、内皮细胞等细胞分泌Zn2+依赖的肽链内切酶，主要功能是水解细胞外基质[17]。在滋养细胞侵袭过程中，MMP-9发挥着重要的作用，其可以水解胶原组织，对基质结构进行重塑，利于胚泡的着床[18]。妊娠20周前滋养细胞侵袭能力的下降是引起子痫前期发生的关键因素，而MMP-9蛋白表达水平随着子痫前期孕妇胎盘组织中滋养细胞侵蚀能力的明显下降而降低[19-20]。动物实验显示，MMP-9基因敲除大鼠胎盘植入受限，最终发展为子痫前期表现[21]。Orlovic等[22]、Rahimi等[23]研究发现，子痫前期患者血清MMP-9水平显著低于健康孕妇，MMP-9于子痫前期发生及轻重程度均有密切相关性，与本研究基本一致。

ROC曲线结果显示，血清MMP-2水平预测重度子痫前期AUC为0.845，临界值为54.89 pg/mL;血清MMP-9水平预测重度子痫前期的AUC为0.845，临界值为175.62pg/mL。提示血清MMP-2、MMP-9水平对子痫前期患者病情严重程度预测具有一定价值。

综上所述，血清MMP-2、MMP-9水平随子痫前期发病及病情加重逐渐升高，与子痫前期发病密切相关，检测上述指标有助于观察和判断患者病情变化，为指导医师及时采取防治措施提供参考。

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（收稿日期：2019-09-29  本文编辑：刘明玉）