付妮娜，范婧晖，钟 慧

（1.宝鸡市妇幼保健院检验科，陕西宝鸡 721000；2.陕西省核工业二一五医院妇科，陕西咸阳 712000）

卵巢癌是女性群体中第二大高发癌症，其死亡率位居妇科恶性肿瘤的首位。据统计数据分析，每年我国约有5.2万人死于卵巢癌，占全球总死亡人数的42%。卵巢癌因发病隐匿，缺乏明显症状和有效诊断指标等，因此约有70%的病人在就诊时已属晚期，5年生存率仅为25%～30%[1-2]。卵巢癌病人预后差、易复发、生存年限低，因此研究卵巢癌有效的临床诊断指标对于改善患者的生存质量具有重要意义[3-5]。

糖类抗原125(CA125)是目前国内外普遍认可和广泛应用的用于卵巢癌临床诊疗的标志物，但其特异度不高，在非卵巢癌(如子宫内膜癌、子宫腺肌瘤、卵巢囊肿等)中也具有一定的阳性率，这样会对临床鉴别诊断造成不小的干扰[6-9]。

人附睾蛋白4(HE4)与CA125相类似，也可用于卵巢癌的诊疗中且特异度较高[10]。基质金属蛋白酶7(MMP7)是一种与癌的转移、侵袭相关的蛋白[11]。关于上皮性卵巢癌（epithelial ovarian cancer，EOC）的临床研究学者大多会集中于单一指标的诊断价值分析，而对于多指标联合检测的价值分析报道较少。本文拟评估CA125，HE4和MMP7三者单独与联合使用在上皮性卵巢癌中的诊断价值。

1 材料和方法

1.1 研究对象 本研究纳入自2016年1月～2017年9月我院收治的243例卵巢癌住院患者。纳入标准：在我院接受治疗并证实为卵巢癌的患者且病理报告完整。排除标准：出现颗粒细胞癌或恶性畸胎瘤以及转移灶的肿瘤患者。对年龄在47～56岁之间的妇女进行更年期状态检查，定义为闭经一年。其中良性卵巢肿瘤140例(57.6%)，绝经前患者32例，平均年龄41.3±4.2岁；绝经后患者108例，平均年龄66.3±3.6岁。交界性肿瘤30例(12.3%)，绝经前患者17例，平均年龄40.3±3.6岁；绝经后患者13例，平均年龄64.8±4.3岁。EOC患者73例(30.0%)，绝经前患者14例，平均年龄44.3±3.9岁； 绝经后患者59例，平均年龄65.2±4.2岁。根据研究对象的临床病理将EOC进一步分为I型和II型肿瘤。I型包括低级（G1）浆液性，低级（G1）子宫内膜样，所有透明细胞、黏液和过渡（brenner）癌。 II型包括高级（G2-G3）浆液性，高级（G2-G3）子宫内膜样，未分化癌和恶性混合性中胚层肿瘤。其中EOC受试者中14例为绝经前妇女，I型7例，II型7例，59例为绝经后妇女，I型20例，II型39例。本研究经由医院伦理委员会批准，所有患者或其亲属均签署书面知情同意书。

1.2 试剂和仪器 高速离心机购于广州吉迪仪器有限公司；酶联免疫吸附实验试剂盒购自美国Immutopics公司；真空采血管购于广州兆康生物科技有限公司。

1.3 方法 根据国际妇产联合会(International Federation of Obstetrics and Gynecology，FIGO)的标准术后将EOC可分为I～IV期。其中，Ⅰ和Ⅱ期是EOC的早期阶段，Ⅲ和Ⅳ期是EOC的晚期阶段，Ⅰ和Ⅱ型肿瘤分别又可分为早期和晚期阶段（选取组织样本Ⅰ型和Ⅱ型肿瘤，剔除未分化组织样本4例），见表1。空腹采集患者静脉血3 ml立即将其置于真空试管内(无抗凝剂)，室温下静置30min，待自然凝固状送至检验科分析。使用酶联免疫法(ELISA)分别检测CA125，HE4和MMP7的浓度水平。

表1 I型和II型EOC类型分类

1.4 统计学分析 采用SPSS17.0和Stata 12.1统计软件进行数据统计分析。两组数据之间的比较使用t检验分析。组间或三个或更多个组的关系采用Kruskal-Wallis单因素方差分析。对各指标绘制受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve，ROC)，并计算曲线下面积(area under curve，AUC)值。针对I型和II型的个体标记及其组合，阳性预测值(positive predictive value，PPV)和阴性预测值(negative predictive value，NPV)计算敏感度和特异度，以P ＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 CA125，HE4和MMP7的表达水平在I，II型EOC中的诊断价值 I，II型EOC中的CA125均显著高于良性肿瘤组(P＜0.001)。I，II型EOC中的HE4均显著高于良性肿瘤组(P＜0.001)。MMP7在良性肿瘤中未发现，而在I，II型EOC中的阳性表达率分别为62.3%和70.6%。

血清中CA125，HE4和MMP7临界值分别设定为 60.0 U/ml，70.0 pmol/L和67 ng/ml。

相较于I型EOC中单一和多指标联合的AUC值，II型EOC中多指标联合(CA125+HE4+MMP7)的AUC检测值较高，见表2。

表2 CA125，HE4和MMP7的表达水平诊断I，II型EOC的效能评价

2.2 CA125，HE4和MMP7在早晚期I，II型EOC中的诊断价值 早期I，II型EOC 患者CA125的M值显著低于晚期(P=0.000)。早期I，II型EOC 患者HE4的M值显著低于晚期(P=0.002)。早期I，II型EOC 患者中MMP7的M值与晚期差异无统计学意义(P=0.055)。

早期EOC 患者血清中CA125，HE4和MMP7临界值分别设定为 68.0 U/ml、93.0 pmol/L和25.5 ng/ml；晚期EOC 患者血清中CA125，HE4和MMP7临界值分别设定为 112.0 U/ml、136.0 pmol/L和48.2 ng/ml。

相较于早期I型单一和多指标联合和II型单一指标中的AUC值，II型EOC晚期患者中多指标联合(CA125+HE4+MMP7)的AUC检测值较高，见表3。

表3 CA125，HE4和MMP7的表达水平诊断早晚期I， II型EOC的效能评价

2.3 CA125，HE4和MMP7在 绝 经 前 后I，II型EOC的诊断价值 见表4。绝经前EOC患者血清中CA125，HE4和MMP7临界值分别设定为 33.0 U/ml，60.0 pmol/L和55.5 ng/ml；绝 经 后EOC患者血清中CA125，HE4和MMP7临界值分别设定 为 56.0 U/ml，87.0 pmol/L和48.2 ng/ml。相 较于I，II型EOC患者与良性肿瘤组，多指标联合(CA125+HE4+MMP7)在绝经后EOC患者的AUC检测值较高。

3 讨论

在过去的数十年间关于卵巢癌的研究已经取得了较大进展，但是由于该病相对较隐匿，患者一般发现时已处于晚期阶段，且其五年生存率仅为46.2%，因此对于卵巢癌的早期检测意义重大。CA125是目前国内外广泛应用的用于卵巢癌临床诊断和检测的肿瘤标志物之一，有研究报道指出当卵巢出现异常时，CA125的浓度水平就开始偏高[12-13]，但是也有研究认为血清中CA125升高仅会出现在40%～50%的早期卵巢癌患者中。HE4的敏感度与CA125相当并且特异度更高[14-15]。MMP7是基质金属蛋白酶家族中分子量最小的成员，其在肿瘤的发生、发展中发挥重要作用，研究认为其与癌细胞的转移、侵袭有关[16]。

表4 CA125，HE4和MMP7的的表达水平诊断绝经前后I, II型EOC的效能评价

本研究旨在评估生物标志物CA125，HE4和MMP7单独和联合应用对I，II型EOC患者的诊断价值。结果发现CA125，HE4和MMP7是II型EOC患者的高度代表性标志物。CA125+HE4+MMP7联合标记物在II型EOC患者中的检测值较高，尤其在晚期阶段。另外，CA125，HE4和MMP7单独或CA125+HE4+MMP7联合应用对I型EOC不具有良好的诊断能力。LU等[17]人以相同的分类方法分出I，II型EOC并测试分析14种血清标记物，结果发现CA125具备最大的诊断能力，II型EOC的AUC值为 0.93，I型EOC的AUC值为 0.89。这与本研究中报道结果相一致。

本研究基于FIGO的相关标准将EOC可分为I～IV期，使用ELISA分别检测CA125，HE4和MMP7的浓度水平。最新的分子生物学特性将EOC作为一种高度异质性疾病，基于形态学和分子遗传学，提出了一种新型的肿瘤起源和进展模型，将EOC分为I，II型肿瘤。I型肿瘤以懒惰的方式表现，有稳定的基因组和没有TP53 (Tumor protein, TP53)突变[18-19]。II型肿瘤有高度的遗传不稳定性，有大多数TP53突变[20]。

总体而言，分子生物学对于更好了解EOC的发病机制是至关重要的，其将有利于改善EOC患者的早期诊断和生存。本研究证实CA125，HE4和MMP7对II型EOC患者具有较好的诊断能力，尤其是晚期II型EOC。