张雪婧，蒲万霞

(中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 中国农业科学院新兽药工程重点开放实验室甘肃省新兽药工程重点实验室，甘肃 兰州 730050)

2018年，全球原料奶产量约为8.27亿t，较2017年增长2%，主要增产贡献为亚洲[1]。养殖过程中，由于抗生素的大量使用，动物体内产生大量耐药菌。随着农业的发展，环境中的抗生素作为一类新型的污染物已成为国内外关注的焦点。大部分的抗生素不能在动物体内完全代谢，可通过动物的粪便或尿液排出体外，进入到环境中，从而影响环境中微生物群落结构[2-5]。已有研究发现，在土壤、水源、动物养殖环境介质中均检测到耐药基因[6-7]。本研究对全国大部分地区奶牛源抗生素耐药情况及耐药基因检出情况进行综述，旨在为了解奶牛源抗生素耐药情况及临床指导用药提供参考。

1 奶牛场中常见病原菌耐药情况

1.1 大肠埃希菌

奶牛乳房炎是奶牛养殖过程中发病率高的疾病之一。目前，抗生素治疗奶牛乳房炎仍然是最常用及最有效的方法，由于抗生素不合理及大量滥用，导致奶牛乳房炎病原菌产生耐药性，且耐药菌株呈不断增多趋势，甚至出现超级耐药菌株，给奶牛乳房炎的临床治疗带来了很大的挑战[8]。张咚咚等[9]对北京地区奶牛乳房炎细菌耐药情况调查发现，患病奶牛乳样中所分离的菌株对万古霉素、氧氟沙星等高度敏感，对青霉素、头孢曲松、头孢噻肟等高度耐药。Sakwinska等[10]发现，奶牛乳房炎患病奶牛乳样中分离菌株对青霉素高度耐药。章慧等[11]研究发现，上海地区奶牛乳房炎患病乳样中分离菌株对青霉素、氨苄西林耐药率达到100%，且存在多重耐药情况。吴明光[12]研究发现，山东地区分离的奶牛乳房炎源大肠埃希菌对氟苯尼考、头孢曲松、头孢他啶、恩诺沙星4种药物高度敏感;对新霉素等7种药物耐药。高健鹏等[13]对新疆地区研究发现，奶牛乳房炎对青霉素、链霉素、四环素等抗生素耐受。大部分地区奶牛场均存在奶牛乳房炎的病例，由于抗生素的不规范使用导致细菌耐受及多重耐药菌株的出现，对青霉素、头孢类抗生素耐药情况最为严重。

1.2 金黄色葡萄球菌

金黄色葡萄球菌是一种革兰氏阳性菌，是引起奶牛乳房炎的重要致病菌之一，感染率达50%以上[14]。赵艳坤等[15]通过对金黄色葡萄球菌耐药性及变迁情况研究发现，奶牛乳房炎对青霉素、氨苄西林抗生素耐药情况严重。高攀[16]对新疆地区奶牛乳房炎病例研究发现，金黄色葡萄球菌对青霉素、氨苄西林耐药严重。冯小慧等[17]发现，内蒙古地区金黄色葡萄球菌对青霉素、复方新诺明等高度耐药。王洪海等[18]发现，金黄色葡萄球菌对环丙沙星、庆大霉素和头孢他啶的敏感性高，无乳链球菌对头孢他啶、克林霉素的敏感性较高，停乳链球菌对庆大霉素、克林霉素的敏感性较高，对青霉素耐药。陕西某牛场中奶牛隐性乳房炎对链霉素、青霉素、阿莫西林、氨苄西林耐药率高[19]。天津地区奶牛场中奶牛对大环内酯类、林可酰胺类药物耐药率普遍较高[20]。金黄色葡萄球菌作为奶牛养殖中常见的致病菌，抗生素的广泛使用使其耐药情况比较严重，尤其以青霉素、氨苄西林等耐药严重，并且多重耐药现象普遍存在于各地区。

1.3 链球菌

田晓英等[21]调查发现，华北地区四省奶牛场中链球菌分离株对苯唑西林和青霉素完全耐药，对四环素类药物耐药性较高，对喹诺酮类和氨基糖苷类药物耐药性较低，华北地区链球菌总检出率较低，但多重耐药情况严重。向敏等[22]对湖北省奶牛场进行调查发现，链球菌对青霉素钠、头孢噻呋钠抗性强，但对穿心莲、鱼腥草等中药材比较敏感。杜琳等[23]对我国部分地区奶牛乳房炎致病菌进行研究发现，链球菌分离株数较少，分离出的革兰氏阳性菌对氨曲南的耐药率最高，革兰氏阴性菌对氨苄西林的耐药率最高。郭玉茹等[24]发现，辽宁某牛场中奶牛对头孢氨苄、磺胺类药物耐药率达到100%，对苯唑西林、林可霉素耐药率达到80%以上，并且多重耐药现象严重。昆明地区奶牛场对青霉素严重耐药，且出现7种药物同时耐药的情况[25]。链球菌存在于奶牛养殖环境中，但检出株数较少，链球菌的耐药率和多重耐药现象也很严重，在临床治疗中，可尝试选用中西结合或选用抗生素替代物，以降低抗生素的耐药情况。

2 奶牛场中耐药基因检测

耐药基因作为一种新型环境污染物，广泛存在于环境中，借助质粒、整合子、转座子等可移动遗传元件在细菌之间进行水平基因转移[26-27]。由于抗生素大部分会以原药形式排出体外，养殖场中的动物粪便中存有大量的耐药菌和耐药基因，危害到畜禽及人类健康。北京地区畜禽养殖场周边农田中蔬菜样品检测发现，磺胺类、四环素类抗生素耐药基因检出率达到100%，并检测出禁用多年的氯霉素耐药基因(cmlA)[28]。对广西地区畜禽产品检测发现，耐药基因qnrA检出率达到91.18%，blaTEM检出率达100%，并且多重耐药情况严重[29]。于长泳[30]对辽宁省奶羊场中磺胺类耐药基因进行检测发现，sul1基因检出率最高，与药敏试验结果中病原菌对磺胺类药物高度耐药结果相符。河北省7个地区的420份乳房炎奶牛乳样中，喹诺酮类(gyrA、qnrB)和大环内酯类(ermB)耐药基因检出率高[31]。宁夏地区畜产品中，磺胺类(sul1、sul2)和四环素类(tetE)耐药基因的检出率较高[32]。

3 小结

作为农业大国，畜产品的食品安全与人类健康息息相关。我国是世界上最大的抗生素生产国和使用国[33]，抗生素的不规范使用使得耐药菌、耐药基因大量产生。黄廷鹏[34]对甘肃省金昌地区奶牛抗生素的用药进行调研发现，由于长期单一地使用抗生素治疗牛病，导致奶牛个体出现不同程度的耐药。动物在养殖过程中抗生素的用量大，抗生素通过粪便、尿液等排出进入环境中，对土壤、水源等均造成不同程度的污染。从银川市规模奶牛养殖场粪便、污水和土壤中分离鉴定出429株细菌，条件致病菌占88.55%，主要以金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和托尔豪特链球菌为主[35]。奶牛养殖场中废物的排放对人和动物的健康存在潜在风险，若不经处理直接排放或还田施用，将对养殖环境和自然环境造成威胁。对各地区奶牛源抗生素使用情况调查发现，虽然各地区养殖环境、饲养方法等存在地域差异，但实际生产中抗生素种类大体一致，青霉素类、头孢类、四环素类等抗生素的耐药情况严重。耐药基因检出率与抗生素的耐药情况有关，但磺胺类、四环素类、β-内酰胺类耐药基因检出率高。在实际生产中，可选用中西药结合或以中药为主的治疗方案，降低药物的耐药和多重耐药现象。