林启凰，张 娜，叶廷秀，陈仲巍，张 岗

（厦门医学院药学系，福建 厦门 361000）

天胡荽Hydrocotyle sibthorpioidesLam.［H.rotundifoliaRoxb.］为伞形科天胡荽属植物，广泛分布于安徽、福建、台湾、云南、贵州、广东、广西等地，其全草入药，具有清热利湿、解毒消肿等功效［1］，是主流品种之一［2］，临床上常用于治疗胆囊炎、肝炎病毒感染、带状疱疹、牛皮癣等疾病［1］。现代研究表明，天胡荽含有挥发油［3］、三萜皂苷［4-5］、黄酮［6］及其他酚类化合物［7］，提取物具有 抗HBsAg［8］、抗肿瘤［9］、免疫调节［9］、抗菌［10］等作用。为了继续挖掘该植物的潜在价值，课题组对其进行了系统的化学成分研究，从水提物中分离、纯化并鉴定得到7 种化合物，其中，化合物7 首次从伞形科植物中分离得到，化合物5 首次从天胡荽属植物中分离得到，化合物1～2 首次从该植物中分离得到。

1 材料

Advance AV-600 核磁共振波谱仪（瑞士Bruker 公司）；Agilent 1260 高效液相色谱仪（美国Agilent 公司）；UV-1800 紫外分光光度计（日本岛津公司）；Nexera UHPLC LC-30A 超高效液相色谱仪、LC-MS 8050 三重四极杆质谱仪联用系统（日本岛津公司）；超纯水机（美国Thermo 公司）。

Sephadex LH-20 填料（美国GE 公司）；反相ODS 色谱填料、Semi-HPLC 色谱柱（日本YMC 公司）；AB-8 大孔吸附树脂（陕西博晖生化科技有限公司）；柱色谱用硅胶（200～300 目）、硅胶GF254薄层板（青岛海洋化工厂）；柱色谱用聚酰胺（30～60 目）、薄层层析用聚酰胺薄膜（浙江台州市陆桥四甲生化塑料）。色谱用甲醇、乙腈（美国Thermo Fisher 公司）。

药材于2016 年6 月采自福建厦门，经厦门医学院鲍红娟副教授鉴定为伞形科植物天胡荽Hydrocotyle sibthorpioidesLam.［H.rotundifoliaRoxb.］，标本保存于厦门医学院药物分析教研室，编号为THS-201606。

2 提取与分离

将天胡荽（2 kg）于60 ℃下干燥后粉碎，分别用8 倍量纯化水加热回流提取2 次，滤过，合并滤液，使之缓缓通过AB-8 大孔树脂，待化合物完全吸附后，先用2 倍柱体积的纯化水洗柱，弃去水洗脱液，再用3 倍柱体积的75%乙醇洗脱，洗脱液于40 ℃下减压浓缩，将浓缩液上样于装有30～60目聚酰胺（500 g）的色谱柱中，以乙醇-水系统梯度洗脱，聚酰胺薄层色谱检视，合并相同组分，回收溶剂，将样品分为6 个洗脱组分F1～F6。其中F6（1.2 g）组分通过硅胶柱和Sephadex LH-20 凝胶柱，得化合物6（7 mg）；通过反复硅胶柱和Sephadex LH-20 凝胶柱纯化F5（6.5 g）组分，得化合物3（3.7 mg）、4（3.5 mg）；F4（18.2 g）组分上样于反相ODS 柱后，由甲醇-水系统梯度洗脱，聚酰胺薄层检视，合并相同组分，回收溶剂，又将样品分为6 个洗脱组分（F4-1～F4-6），通过Sephadex LH-20 凝胶柱纯化F4-3 组分，最后经Semi-HPLC 制备，得化合物5（3.5 mg）；F4-4 经Semi-HPLC 制备，得化合物7（4.2 mg）；经反复硅胶柱和Sephadex LH-20 凝胶柱纯化F3（1.5 g）组分，得化合物2（2.4 mg）；经反复Sephadex LH-20 凝胶柱纯化F2（8.5 g）组分，得化合物1（2.5 mg）。

3 结构鉴定

化合物1：白色粉末，三氯化铁反应显阳性，易溶于甲醇。分子式C7H6O4，ESI-MSm／z：153.0［M-H］－。1H-NMR（CD3OD，600 MHz）δ：7.45（1H，dd，J＝8.0，1.8 Hz，H-6）；7.21（1H，d，J＝1.8 Hz，H-2），6.76（1H，d，J＝8.0 Hz，H-5）；13C-NMR（CD3OD，125 MHz）δ：122.5（C-1），117.2（C-2），142.7（C-3），151.8（C-4），114.0（C-5），122.7（C-6），167.7（C-7）。以上数据与文献［11］基本一致，故鉴定为原儿茶酸。

化合物2：淡黄色粉末，三氯化铁反应显阳性，易溶于甲醇。分子式C9H8O3，ESI-MSm／z：163.1［M-H］－。1H-NMR（600 MHz，DMSO-d6）δ：7.52（1H，d，J＝16.0 Hz，H-7），7.46（2H，d，J＝8.0 Hz，H-2，6），6.79（2H，d，J＝8.0 Hz，H-3，5），6.30（1H，d，J＝16.0 Hz，H-8）；13C-NMR（125 MHz，DMSO-d6）δ：127.7（C-1），130.5（C-2，6），116.1（C-3，5），159.9（C-4），146.3（C-7），115.5（C-8），174.5（C-9）。以上数据与文献［12］基本一致，故鉴定为对羟基桂皮酸。

化合物3：黄色粉末，盐酸-镁粉反应显阳性。分子式C15H10O5，UVλmax（nm）为269，334，ESI-MSm／z：269.1［M-H］－。1H-NMR（600 MHz，DMSO-d6）δ：7.85（2H，d，J＝7.8 Hz，H-2′，6′），6.90（2H，d，J＝7.8 Hz，H-3′，5′），6.18（1H，d，J＝1.8 Hz，H-6），6.55（1H，d，J＝1.8 Hz，H-8），6.75（1H，s，H-3）；13C-NMR（DMSO-d6，125 MHz）δ：94.2（C-8），99.0（C-6），102.2（C-3），103.4（C-10），115.8（C-3′，5′），120.5（C-1′），128.1（C-2′，6′），157.0（C-9），161.2（C-4′），161.7（C-5），163.5（C-7），163.9（C-2），178.1（C-4）。以上数据与文献［13］基本一致，故鉴定为芹菜素。

化合物4：黄色针晶，盐酸-镁粉反应显阳性。分子式C15H10O6，UVλmax（nm）为268，364，ESI-MSm／z：285.1［M-H］－。1H-NMR（600 MHz，DMSO-d6）δ：6.19（1H，d，J＝1.8 Hz，H-6），6.40（1H，d，J＝1.8 Hz，H-8），8.06（2H，d，J＝8 Hz，H-2′，6′），6.92（2H，d，J＝8 Hz，H-3′，5′-H）；13C-NMR（DMSO-d6，125 MHz）δ：148.4（C-2），137.1（C-3），177.5（C-4），161.7（C-5），99.4（C-6），165.2（C-7），94.5（C-8），156.7（C-9），104.6（C-10），122.3（C-1′），130.8（C-2′，6′），115.8（C-3′，5′），160.6（C-4′）。以上数据与文献［14］基本一致，故鉴定为山柰酚。

化合物5：黄色粉末，盐酸-镁粉反应显阳性。分子式C27H30O14，UVλmax（nm）为265，345，ESI-MSm／z：577.3［M-H］－。1H-NMR（600 MHz，CD3OD）δ：0.93（3H，d，J＝7.2 Hz，3-O-rha-CH3），1.26（3H，d，J＝7.2 Hz，7-O-rha-CH3），5.40（1H，3-O-rha-1-H），5.56（1H，7-O-rha-1-H），6.45（1H，d，J＝1.8 Hz，H-6），6.71（1H，d，J＝2.0 Hz，H-8），6.94（2H，d，J＝8.4 Hz，H-3′，H-5′），7.79（2H，d，J＝8.4 Hz，H-2′，H-6′）；13C-NMR（125 MHz，CD3OD）δ：157.9（C-2），136.3（C-3），179.6（C-4），161.6（C-5），99.6（C-6），163.3（C-7），95.4（C-8），159.6（C-9），107.3（C-10），122.2（C-1′），131.8（C-2′），116.4（C-3′），161.6（C-4′），116.4（C-5′），131.8（C-6′），100.3（3-O-rha-C-1），103.3（7-O-rha-C-1），72.9～71.1（8 个碳信号，3-O-rha-C-2～C-5，7-O-rha-C-2～C-5），17.4（3-O-rha-C-6），17.8（7-O-rha-C-6）。以上数据与文献［15］基本一致，故鉴定为山柰苷。

化合物6：黄色粉末，盐酸-镁粉反应显阳性。分子式C15H10O7，UVλmax（nm）为249，372；ESI-MSm／z：301.1［M-H］－。1H-NMR（600 MHz，DMSO-d6）δ：7.70（1H，d，J＝1.8 Hz，H-6′），7.60（1H，dd，J＝8.0，1.8 Hz，H-2′），6.85（1H，d，J＝8.0 Hz，H-5′），6.35（1H，d，J＝1.8 Hz，H-8），6.15（1H，d，J＝1.8 Hz，H-6）；13CNMR（DMSO-d6，125 MHz）δ：147.8（C-2），137.0（C-3），177.1（C-4），162.3（C-5），99.0（C-6），165.4（C-7），94.2（C-8），58.0（C-9），104.5（C-10），123.9（C-1′），115.5（C-2′），145.6（C-3′），148.6（C-4′），116.0（C-5′），120.8（C-6′）。以上数据与文献［14］基本一致，故鉴定为槲皮素。

化合物7：黄色粉末，聚酰胺薄膜上喷三氯化铝试剂后紫外下显黄绿色荧光。分子式C20H18O8，UVλmax（nm）为235，390［sh］，326，ESI-MSm／z：385.2［M-H］－。1H-NMR（DMSO-d6，600 MHz）δ：7.47（1H，d，J＝15.6 Hz，H-7），7.39（1H，d，J＝1.8 Hz，H-2），7.21（1H，s，H-7′），7.09（1H，dd，J＝1.8，7.8 Hz，H-6），6.65（1H，d，J＝7.8 Hz，H-5），6.47（1H，d，J＝15.6 Hz，H-8），7.34（1H，d，J＝1.8 Hz，H-2′），6.72（1H，d，J＝7.8 Hz，H-5′），7.05（1H，dd，J＝1.8，7.8 Hz，H-6′）；13C-NMR（DMSO-d6，125 MHz）δ：128.1（C-1），111.2（C-2），148.5（C-3），143.7（C-4），113.3（C-5），122.0（C-6），147.9（C-7），117.4（C-8），168.0（C-9），55.8（3-OCH3），124.5（C-1′），112.8（C-2′），147.3（C-3′），140.1（C-4′），115.4（C-5′），123.9（C-6′），147.8（C-7′），140.2（C-8′），164.8（C-9），55.8（3′-OCH3）。以上数据与文献［16］基本一致，故鉴定为8-O-4-dehydrodiferulic acid。

4 讨论

本研究从采自福建厦门的天胡荽水提物中分离得到7 个化合物，包括4 个黄酮类（3～6）、2 个苯丙素类（2、7）、1 个小分子酚酸类（1）。化合物7 为首次从伞形科植物中分离得到，化合物5 为首次从该属植物中分离得到，化合物1～2 为首次从该植物中分离得到。

大量研究表明，本实验所得化合物具有多种生理活性。原儿茶酸（1）具有较好的抗氧化作用，对MPP＋诱导的中脑多巴胺能神经元损伤具有保护作用［17］，对阪崎克罗诺肠杆菌有抑制效果［18］；对羟基桂皮酸（2）具有一定的抗菌［19］、抗炎［20］活性；芹菜素（3）、山柰酚（4）、槲皮素（6）为常见的黄酮类化合物，均具有不同程度的抗肿瘤、抗炎、抗菌、抗氧化、心脑血管保护等作用［21-23］；山柰苷（5）具有较好的降血糖活性［24］，也显示了抗炎［25］作用，对于揭示天胡荽清热利湿、解毒消肿等功效的药效物质基础具有一定意义。同时，上述结果为天胡荽的临床应用提供依据。