曾怀跃，邢凡凡，刘永棠

(香港大学深圳医院临床微生物及感染控制科，广东深圳 518053)

蝇蛆，苍蝇幼虫感染活体动物称之为蝇蛆病，蝇蛆感染人体头部鲜有报道。成虫苍蝇将卵产于活组织之中，孵化出幼虫，幼虫以活组织为食，经过4个发展阶段：1龄幼虫，2龄幼虫，3龄幼虫，最后变成成虫。

1 资料与方法

1.1一般资料 患者，女，78岁，汉族，2017年11月因患有右额基底细胞癌，头皮有溃烂未做任何治疗，突然发现有虫子从头部爬出，前来本院就诊。用镊子将虫子取出，送实验室检验，鉴定为蝇蛆，经去虫、手术清创、抗感染、植皮等治疗，情况改善后出院。

1.2仪器与材料 解剖显微镜：雷卡(LEICA M60),放大倍数为10×2。隔水式恒温培养箱(上海一恒科技仪器有限公司)：35 ℃。材料：无菌瓶、血培养琼脂(购自法国梅里埃公司)、福尔马林、玻片、空普通平皿。

1.3实验过程与方法 将取自患者头部的6只蛆虫，分别置于6个无菌瓶之中，其中2只各加入10%的福尔马林1～2 mL，浸泡8 h，取出放在玻片上，在10×2倍的解剖镜下观察。4只加血平板内的琼脂(小块)至瓶内一半高度，盖好盖子后，拧松以便有空气进入，其中2只放入35 ℃隔水式恒温培养箱中培养，每天观察,温箱内的水盘要加水，以保证适当的湿度，另外2只放置室温(24 ℃)培养，每天观察。加福尔马林的2只蛆虫，经解剖显微镜镜检可见口钩，后气门，见图1。幼虫长度为9 mm,体分13节，一对口钩，气门环较厚，3个气门裂排列在一起，略弯曲，气门钮在气门环下方开口处。

注：A表示口钩；B表示后气门

图1显微镜检验结果(10×2)

2 结 果

4只加血琼脂的幼虫中，2只幼虫在35 ℃恒温培养，取食活跃，经培养4.0 d后变成了蛹，见图2A；蛹经培养3.0 d后变成了成虫，见图2B。2只幼虫在室温下培养，整个变化过程与35 ℃温箱培养的幼虫一样，只是延迟了2.0 d完成全变态过程，变成成虫，可见培养温度对蝇蛆的演化过程快慢是有影响的。经解剖显微镜检验的幼虫，明显可见口钩，后气门，见图1，气门环较厚，3个气门裂排列在一起，略弯曲，气门钮在气门环下方开口处。常见蝇类成熟幼虫(蛆)形态及幼虫气门，经对比鉴定为蛆症金蝇。

经解剖显微镜镜检明显可见蝇幼虫的口钩及后气门，经培养幼虫变成了蛹，蛹变成了成虫苍蝇，经对比鉴定为蛆症金蝇。确诊患者为蝇蛆感染。

注：A表示蛹；B表示成虫

图2培养结果图

3 讨 论

蝇是全变态生物，生活史包括卵、幼虫、蛹、成虫，发育过程受温度、湿度明显影响，卵产出6～12 h后孵化，若遇低温，则时间更长。幼虫发育可在3.0～5.0 d内完成，不利环境可能需要7.0～10.0 d，温度较低时甚至需要24 d；蛹在温度较高时需要3～5 d，较冷的情况下需要7.0～14.0 d。从虫卵发育到成虫的时间随着温度而异，如16 ℃时49.0 d，20 ℃时25.0 d，25 ℃时16.0 d，30 ℃时10.0～12.0 d，35 ℃时需8.0～10.0 d，很少会短于7.0 d[1]。幼虫有3个龄期：1龄幼虫体长1～3 mm，仅有后气门。蜕皮后变为2龄幼虫，长3～5 mm，有前气门，后气门有2裂。再次蜕皮即为3龄幼虫，长5～13 mm，后气门3裂。蝇蛆体色，1～3龄由透明、乳白色变为乳黄色，直至成熟、化蛹[2]。据国外文献报道，第1幼虫发育需要约1.8 d，第2幼虫发育约需2.5 d，第3幼虫发育需4.0～6.0 d[3]。从上可推断出本研究取出用于观察的幼虫就为3龄初期幼虫，可见口钩和后气门3裂，在35 ℃温箱内，经4.0 d变成蛹，再经3.0 d羽化为成虫。在此过程中，笔者用福尔马林固定，解剖显微镜观察，清晰可见幼虫的特征性结构，体长9 mm，体分13节，一对口钩，气门环，气门裂，气门钮特征明显，判断为蝇蛆，与蛆症金蝇口钩及气门比对，为蛆症金蝇，经35 ℃温箱培养，证明诊断是正确的。

在我国，较少有蝇蛆病报道，该病多发生在农村、牧区，儿童多见，以皮肤蝇蛆病为主，头部少见，皮肤蝇蛆病的临床表现与蝇蛆对患者的机械刺激有关。蝇蛆在皮下移行时患者可感到皮下痛痒感、异物感、移行感等，有时皮下可见蝇蛆移行后遗留的痕迹。由于蝇蛆体表常带有细菌，可能引起皮下感染。少数过敏体质的皮肤蝇蛆病患者发病后可出现荨麻疹样皮肤损害，甚至出现弛张热，严重者可引起休克、死亡。皮肤蝇蛆病患者嗜酸细胞百分比升高[4]；创伤性蝇蛆病常见有金蝇、绿蝇等[5]。国内病例报道以临床病症报道为主，没有病原体的详细实验室诊断证据，说服力不佳；国外曾有1例阴道阴唇蝇蛆病报道，报道病例情况全面，对实验室病原体诊断清楚，形成有力证据[3]。

国外报道的实验室鉴定方法：将取到的蝇蛆浸入沸水之中60 s，然后浸入90%的乙醇中，用无菌刀片将含有后气门的蛆体末段切开，浸入5%的氢氧化钾之中，轻柔加热至100 ℃ 5 min，冷却，用蒸馏水清洗，然后转移到玻片之上用10倍放大的光学和解剖显微镜观察[3]。美国临床微生物学综述在幼虫保存与鉴定一节中则写明：将蝇蛆浸入非常热(足以产生蒸汽)但不是沸水之中30 s，这样可防止腐烂又可维持蛆的自然颜色，然后保存在有70%～95%的乙醇之中，可最好保持幼虫的长度和形态；不应使用福尔马林溶液，因为它会使幼虫组织过度硬化，从而造成处理困难。而我国教材检查蝇蛆的方法是：将蝇蛆置于10% 氢氧化钠溶液中浸泡4～8 h，用水洗数次后镜检[5]。培养的方法是：必要时，可将获得的幼虫置泥土中培养为蛹和成虫，以便进一步鉴定，该方法不易控制实验条件、温度、湿度，笔者没有采用。而笔者实验时仅用福尔马林浸泡蛆虫，用解剖显微镜检查可清楚看到口钩和后气门，用血平板内琼脂，切成小块，在瓶子内进行培养，培养出成虫苍蝇，证明笔者的鉴定方法是正确的、可行的。但是笔者认为，应该结合国内外的方法，制订出一个更加科学合理的方法。实验中需要注意控制温度、湿度，瓶盖要松开适当，以便空气流入；要每天观察，以防幼虫死亡。