雷春龙，李 娟，吴永胜，曹雨辰，邱时秀，陈亚迎，刘瀚扬，朱佳文，徐麒麟，许祯莹

（成都市农林科学院畜牧研究所，四川成都 611130）

桑树作为传统的“药食同源”植物，在中国具有悠久的栽种历史。桑叶中含有丰富的粗蛋白质、维生素、矿物元素及多种天然生物活性物质[1]。同时，桑叶中富含生物碱、黄酮和多糖类物质，对动物机体具较强的抗氧化等功效，特别是独特的生物碱1-脱氧野尻霉素（1-DNJ）具有显著的降血糖作用[2]。目前大多将桑叶加工成风干初粉作为饲料原料应用于畜禽养殖中，但初粉中粗纤维含量较高，且含有单宁、植物凝集素等抗营养因子[3]，使其在动物生产中的应用受到极大限制。运用现代植物提取工艺对桑枝叶提取后可有效降低其粗纤维含量，并可以较好保留其生物活性物质。本试验旨在研究桑枝叶提取物对蛋鸡生产性能、血清免疫指标与抗氧化能力的影响，为桑枝叶提取物作为一种新型蛋鸡饲料添加剂提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 材料 桑枝叶初粉来源于成都市农林科学院畜牧研究所科研基地。首先对矮化密植的灌木生长形态的桑树嫩枝（长度≤ 1 m）进行刈割：桑枝下端留茬30～40 cm，剩余上端部分（含叶）全部刈割，将刈割后的桑枝叶一起翻晒，均匀失水，干燥后粉碎成30～50 目的颗粒物，得到桑枝叶混合初粉，常温干燥环境下保存待提取，桑枝叶初粉的营养成分见表1。试验用桑枝叶提取物为上述桑枝叶初粉的乙醇浸提产物，提取得率约为10%，其提取产物干物质含量为92.36%， 粗蛋白含量为18.36%，粗纤维含量为4.6%，粗灰分含量为8.9%。

1.2 试验设计 采用单因素试验设计，将324 只47 周龄体重相近、健康、采食正常的罗曼粉蛋鸡随机分成4组，每组3 个重复，每个重复27 只鸡。对照组饲喂基础日粮，试验组分别在基础日粮中添加0.2%、0.4%、0.8% 的桑枝叶提取物。试验基础日粮参照中国产蛋鸡饲养标准（NY/T 33—2004）配制。试验基础日粮组成及营养成分见表2。

表1 桑枝叶初粉的营养成分（风干基础） %

表2 试验基础日粮组成及营养成分（风干基础）

1.3 饲养管理 试验在四川省成都市大邑县韩场镇成都华昌禽业有限公司养殖场进行。试验预试期7 d，正试期57 d。试验鸡饲养方式为3 层阶梯式笼养，每笼3 只鸡，自由采食，每日喂料2 次，自由饮水，每日13:30 收集鸡蛋并记录，每日观察鸡只的精神状态，食欲和排粪情况。

1.4 测定指标与方法

1.5.1 生产性能 以每日为单位记录产蛋数、次蛋（沙皮蛋、软壳蛋、薄壳蛋、双黄蛋、破壳蛋）数、采食量和平均蛋重，并计算产蛋率、平均日采食量、料蛋比和次蛋率。

1.5.2 血清免疫与抗氧化指标 试验期第63 天晚上停止喂料，第64 天早上每组随机选取15 只（每个重复5 只）健康蛋鸡，翅静脉采血，采集完的血液静置3～4 h 待血液凝固后，3 000 r/min 离心10 min，收集血清，装入EP 管中，于-20℃保存备用，用于测定血清免疫与抗氧化指标。血清测定指标包括免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）、白细胞介素-1（IL-1）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子（TNF-α）、补体C3、补体C4 以及总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）均采用北京奇松生物有限公司的酶联免疫试剂盒进行测定，其标准品线性回归与预期浓度相关系数R≥0.99。

1.5 统计分析 采用Excel 2007 和SPSS 19 软件对数据进行单因素方差分析和LSD 多重比较。所有结果均以平均值±标准差表示。P＜0.05 为差异显著。

2 结果与分析

2.1 不同添加水平桑枝叶提取物对蛋鸡生产性能的影响 由表3 可知，与对照组相比，各添加组蛋鸡的日采食量无显著差异，但各添加组蛋鸡的次蛋率分别降低36.30%、57.30% 和63.70%（P＜0.05）。 同 时，0.4%组和0.8%组蛋鸡的产蛋率较对照组显著提高，料蛋比显著降低。

2.2 不同添加水平桑枝叶提取物对蛋鸡血清免疫指标的影响 由表4 可知，与对照组相比，各添加组的蛋鸡血清补体C3 和补体C4 无显著差异，但各添加组血清IgG 均显著提高，其提高比例分别为3.09%、8.24%和10.42%。同时，0.4% 组和0.8% 组蛋鸡血清IgA、IgM、IL-6 和TNF-α 较对照组均显著提高，对应提高比 例 分 别 为9.24% 和19.50%、27.61% 和31.98%、20.70%和36.97%、19.34%和22.77%。此外，0.8%组蛋鸡血清IL-1 较对照组显著提高。

表3 不同添加水平桑枝叶提取物对蛋鸡生产性能的影响

2.3 不同添加水平桑枝叶提取物对蛋鸡血清抗氧化能力指标的影响 由表5 可知，与对照组相比，各添加组的蛋鸡血清SOD 无显著差异，但随着桑枝叶提取物添加量的增加蛋鸡血清SOD 有逐渐升高的趋势。同时，0.4% 组和0.8% 组蛋鸡血清T-AOC 较对照组均提高（P＜0.05），其提高比例分别为9.11% 和17.25%。此外，0.8%组蛋鸡血清GSH-Px 较对照组提高（P＜0.05），血清MDA 降低（P＜0.05）。

3 讨 论

3.1 桑枝叶提取物对蛋鸡生产性能的影响 本试验蛋鸡为47 周龄，属于产蛋高峰后期阶段，不同桑枝叶提取物添加量对产蛋高峰后期的日采食量均无显著影响，但各添加组的次蛋率均显著降低，同时0.4%和0.8%添加量可显著提高产蛋率，显著降低料蛋比。兰翠英[4]研究发现，添加桑叶粉会造成蛋鸡采食量降低，认为与桑叶粉中粗纤维含量较高而代谢能较低有关。赵春晓[5]研究发现，添加不同比例桑叶粉会造成蛋鸡产蛋量和饲料效率出现一定程度的降低，并且发现在饲喂桑叶粉的前5 d 其采食量会有所降低，初期之后逐步适应。王军等[6]研究发现，在罗曼蛋鸡日粮中添加2%桑叶粉其采食量明显减少，但产蛋量和蛋重均有提高，蛋壳破损率显著降低。邱时秀等[7]也有类似的研究结果。本试验中桑枝叶提取物对增强蛋鸡产蛋率和降低次蛋率的效果与上述研究具有一致性。黄静等[3]研究发现，桑叶中含有单宁、植物凝集素等抗营养因子，大量添加桑叶会导致畜禽生产性能下降。本试验采用桑枝叶风干初粉的乙醇浸提产物，桑枝叶粗纤维含量有效降低，而桑枝叶中的营养成分和有益生物活性物质得到较好保留。可见，桑枝叶提取物对蛋鸡的生产性能提升具有较好效果，特别是对产蛋高峰后期保持产蛋率的稳定性具有较好的作用，同时对降低次蛋率有显著效果。因此，这为桑枝叶提取物作为一种新型蛋鸡饲料添加剂提供了参考依据。

3.2 桑枝叶提取物对蛋鸡血清免疫指标的影响 本试验表明，蛋鸡日粮中添加桑枝叶提取物均在不同程度上提高了血清免疫指标的含量。与对照组相比，3 个添加组的鸡蛋血清IgG 均显著提高，0.4%组和0.8%组IgA、IgM、IL-6 和TNF-α 均显著提高。许祯莹等[8]研究发现，桑枝叶干粉可一定程度提高蛋鸡血清免疫球蛋白和白细胞介素的含量。苏海涯等[9]研究发现，桑叶的天然活性物质对畜禽具有免疫保健作用，可提高畜禽的抗病力，并能够防止禽流感的发生。研究发现，多糖类物质可提高动物机体的淋巴细胞转化率，促进淋巴细胞数量增殖[10]。此外，桑叶蛋白中富含动物机体必需和半必需的氨基酸，其中蛋氨酸、赖氨酸以及谷氨酸是维系肠道免疫功能的重要原料[11]。可见，桑枝叶提取物富含的多糖成分可有效调节增强蛋鸡的免疫功能，同时其氨基酸成分对维系蛋鸡肠道免疫具有保健功效，但桑枝叶提取物提高蛋鸡免疫功能是一个复杂的综合生理效应，其详细机理有待进一步研究。

表4 不同添加水平桑枝叶提取物对蛋鸡血清免疫指标的影响

表5 不同添加水平桑枝叶提取物对蛋鸡血清抗氧化能力指标的影响

3.3 桑枝叶提取物对蛋鸡血清抗氧化能力指标的影响本试验表明，与对照组相比，各个添加组均不同程度提高了蛋鸡血清T-AOC、GSH-Px 和SOD 含量，降低了蛋鸡血清MDA 含量。许祯莹等[8]研究发现，在日粮中添加桑叶干粉，蛋鸡血清SOD 呈现升高趋势，而MDA有降低趋势，但GSH-Px 未呈现升高趋势；添加6%桑叶粉显著地提高了蛋鸡血清T-AOC。黄静等[3]在胡须鸡饲粮中添加桑叶粉，发现胡须鸡血清T-AOC 和GSHPx 均有增加趋势。张敏[12]研究发现，桑叶粉可显著降低链脲佐菌素糖尿病模型大鼠血液MDA 含量。本试验与上述研究具有一致性，但由于试验动物不同，因此显著性效果有差异。Doi 等[13]从桑叶中分离出多种类黄醇生物活性物质，进一步研究发现黄醇具有清除机体脂质过氧化物和自由基等作用。同时，有学者发现黄酮类和多糖类物质本身就是天然的强抗氧化剂，可直接清除机体内脂质过氧化物和超氧离子自由基，特别是对清除酶类物质不能清除的羟自由基具有良好效果[14]。因此，桑枝叶提取物对提高蛋鸡血清抗氧化能力具有的良好效果原因可能是由于其富含的类黄醇、黄酮类和多糖类等生物活性物质发挥良好的清除氧自由基的生理效应。

4 结 论

本试验结果说明，日粮中添加0.4% 和0.8% 桑枝叶提取物均可提高蛋鸡的总体生产性能，可以显著降低次蛋率，同时对蛋鸡机体的免疫功能和抗氧化能力均有一定的增强效果。考虑到添加成本，建议蛋鸡日粮中桑枝叶提取物最佳添加量为0.4%。