夏米斯巴奴·艾则孜， 巴依尔太， 孙 芸

(新疆医科大学1中医学院； 2图书馆， 乌鲁木齐 830011, China)

沙枣(ElaeagnusangustifoliaL.)为胡颓子科胡颓子属植物，又名银柳、桂香柳，七里香[1]，主要分布于伊朗、印度、俄罗斯等国，在我国主要生长在新疆等西北地区[2-4]。沙枣叶中主要含有多种微量元素、酯类和黄酮类等化合物[5-8]。沙枣叶味辛、涩，性凉，具有清热解毒、抗菌消炎、活血止血等功效，多用于细菌性痢疾、肠炎腹泻、慢性支气管炎、冠心病等疾病的治疗[9-10]。研究表明沙枣叶提取物还具有一定的抗氧化活性[11-12]。本研究采用性状鉴别、显微鉴别的方法对新疆不同产地沙枣叶叶片形态、粉末显微特征、上下表皮显微特征进行研究，采用理化鉴别的方法对新疆沙枣叶的化学成分进行预试验，采用TLC法对新疆沙枣叶的水提部位的没食子酸、鞣花酸成分进行薄层鉴别，现报道如下。

1 仪器与试药

1.1仪器HH-S4型数显恒温水浴锅(江苏金坛市医疗仪器厂)，KQ-5200DE型数控超声波清洗仪(昆山市超声仪器有限公司)，XS105型电子天平(梅特勒-托利多仪器有限公司)，DHG-9123A型电热恒温鼓风干燥箱(上海齐欣科学仪器有限公司)，FW177型高速万能粉碎机(北京市永光明医疗仪器有限公司)，荧光倒置显微镜(德国蔡司公司)，REPROSTAR 3型薄层色谱照相仪(瑞士卡玛公司)，ZF-2型三用紫外仪(上海市安亭电子仪器厂)。

1.2试剂没食子酸(成都曼斯特生物科技有限公司，批号MUST-15042910，质量分数99.04%)，鞣花酸(中国食品药品检定研究院，批号111959-201602，质量分数89.3%)；硅胶GF254高效板(青岛海洋化工分厂， 10 cm×10 cm)，无水乙醇(天津市致远化学试剂有限公司，批号2017080145)，石油醚(天津市风船化学试剂有限公司，批号20171008)，氢氧化钠(西安化学试剂厂，批号750126)，冰乙酸(天津市富宇精细化工有限公司，批号20171123)。

1.3药材新疆沙枣叶于2017年6月～8月采摘于新疆8个不同产地(1新疆伊宁市，2 新疆喀什市，3新疆哈密市，4新疆奎屯市，5新疆巴里坤三塘湖，6新疆克拉玛依白碱滩，7新疆和硕县乌什塔拉乡，8新疆吐鲁番沙漠植物园)，经新疆维吾尔自治区中医医院李永和主任药师鉴定为胡颓子科(Elaeagnaceae)植物沙枣(ElaeagnusangustifoliaL.)的干燥叶。

2 方法与结果

2.1新疆沙枣叶的性状鉴别观察不同产地新疆沙枣叶的形状、大小、表面(色泽与特征)、质地、断面、气、味等特征。新疆沙枣叶叶片单叶互生，薄纸质，扁圆状披针形，长3～7 cm，宽1～1.3 cm，全缘，先端尖，基部楔形；上表面具银白色圆形鳞片，下表面灰白色，密被白色鳞片，有光泽；叶上表面主脉多略凹陷，叶背面突出侧脉不甚明显。叶柄纤细长5～10 mm。干燥叶片搓之容易碎裂，带有轻微芳香味。不同产地采集的样品存在一些差异，如喀什产地沙枣叶，其叶片宽披针形或者卵圆形，叶片基部逐渐变得狭，部分叶片基部倾斜，部分叶片左右对称；伊宁产地沙枣叶，叶片薄如纸，矩线状披针形或者圆状披针形，叶片基部对称，见图1。

图1 新疆沙枣叶植物图

2.2新疆沙枣叶的显微鉴别将阴干后的新疆沙枣叶于水中浸泡备用，用镊子分别撕取新疆沙枣叶叶片的上、下表皮，滴加水合氯醛，酒精灯加热透化制成叶上、下表皮装片，置于光学显微镜下进行观察；将新疆沙枣叶药材研粉过筛后，取少许粉末于载玻片上，滴加水合氯醛并加热透化，后滴加稀甘油制成粉末装片。通过对新疆不同产地沙枣叶粉末的观察，新疆沙枣叶粉末大部分产地呈绿色，少数产地有差异，如1号粉末颜色偏黄色，5号粉末颜色偏墨绿色，见图2。通过对新疆不同产地沙枣叶上、下表皮装片的观察，新疆沙枣叶叶片表皮存在不定式气孔、鳞毛和较多星状非腺毛，见图3。通过对新疆不同产地沙枣叶粉末装片的观察，新疆沙枣叶粉末中存在螺纹导管和纤维，见图4。

2.3新疆沙枣叶化学成分预试验

2.3.1 水提部位的制备及化学成分预试验 取干燥新疆沙枣叶粗粉适量，置具塞锥形瓶中，加入10倍量蒸馏水超声提取20 min，过滤即得供试品，供多肽、氨基酸、蛋白质等成分的检识。剩余的供试品溶液和滤渣60℃水浴加热60 min，过滤后的溶液用于糖、多糖、苷类、皂苷、鞣质、酚类和有机酸等成分的检识。结果新疆沙枣叶水提部位溶液中含有多肽、蛋白质、有机酸、酚类、鞣质、皂苷等成分，见表1。

图2 新疆沙枣叶粉末图

密被非腺毛的下表皮 不定式气孔 下表皮细胞 上表皮细胞

放射状非腺毛 星状非腺毛 纤维加导管 螺纹导管

表1 新疆沙枣叶水提部位化学成分预试验结果

注： +代表反应阳性结果； -代表反应阴性结果。

2.3.2 醇提部位的制备及化学成分预试验 取干燥新疆沙枣叶粗粉适量，置于具塞锥形瓶中，加入8倍量95%乙醇溶液，加热回流提取1 h，过滤。滤液等分成2份，1份作为醇提液，供黄酮类、蒽醌类、酚类、鞣质、甾体三萜类化合物等的检识；另1份浓缩至无醇味，加入5%盐酸10 mL，充分搅拌，过滤，供生物碱类化合物的检识。酸和水不溶部分加入乙酸乙酯10 mL溶解，用5%氢氧化钠洗涤2次，取乙酸乙酯部分，减压浓缩至干，残渣加95%乙醇溶解，供内酯、香豆素、强心苷的检识。结果新疆沙枣叶醇提部位溶液中含有酚类、鞣质、有机酸、黄酮、甾体、三萜类等成分，见表2。

2.3.3 石油醚提取部位的制备及化学成分预试验 取干燥新疆沙枣叶粗粉适量，置具塞锥形瓶中，加入适量的石油醚(沸程60℃～90℃)，密封，室温放置3 h，过滤，滤液用于挥发性油、甾体及三萜类化合物检识。结果新疆沙枣叶石油醚提部位溶液中含有甾体类成分，见表3。

表2 新疆沙枣叶醇部位化学成分预试验结果

注： +代表反应阳性结果； -代表反应阴性结果。

表3 新疆沙枣叶石油醚部位化学成分预试验结果

注： +代表反应阳性结果； -代表反应阴性结果。

2.4新疆沙枣叶水提部位没食子酸、鞣花酸成分薄层色谱鉴别随机选取3个不同产地沙枣叶粉末适量，加入蒸馏水水浴加热回流提取1 h，过滤，用乙醚萃取2次，合并乙醚液蒸干，残渣加甲醇溶解，得到供试品溶液1-3。称取没食子酸、鞣花酸对照品适量，加甲醇溶解制成混合对照品溶液。分别吸取8 μL点于同一硅胶GF254高效薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(6∶4.5∶2)为展开剂展开,取出晾干,置254 nm紫外灯下检视。结果供试品色谱中在与混合对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的斑点，见图5。

图5 新疆沙枣叶水提部位中没食子酸、鞣花酸TLC图

3 讨论

新疆不同产地的新疆沙枣叶叶片及粉末性状特征存在一定的差异，这可能与环境因素有关，比如喀什产地气候较干旱，强烈的日光照射使得植物光合作用强、生长快速，导致该产地新疆沙枣叶片形态较其他产地大一些；伊宁产地新疆沙枣叶叶片粉末偏黄，可能与其地处盆地，气候为北温带大陆性气候，四季分明有关；巴里坤产地新疆沙枣叶叶片粉末墨绿色，可能与该产地光能资源丰富，光照充足，属于大陆性冷凉干旱性气候，四季不分明有关。但在观察新疆沙枣叶显微特征时，不同产地新疆沙枣叶粉末及上、下表皮差异性不大，所有产地粉末中均含有较多星状非腺毛和放射状非腺毛，因此多样的非腺毛可以作为新疆沙枣叶显微鉴别的主要特征。在新疆沙枣叶化学成分预试时，检识结果可能会因药材溶出浓度高低不同及相关成分之间相互干扰得到其它结果，故只能初步判定新疆沙枣叶中所含成分，为后期深入研究提供依据。在新疆沙枣叶水提部位没食子酸、鞣花酸成分薄层色谱鉴别时，随机选取了3个产地的样品，从薄层色谱图中可以观察到与对照品相应位置斑点颜色深浅不一，可能与不同产地样品中没食子酸、鞣花酸含量有差异有关，所以在后期研究中可以定量研究不同产地之间没食子酸、鞣花酸含量的差异。本研究方法操作简便，科学可靠，可行性强，可用于新疆沙枣叶的性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别及薄层鉴别。