张微 刘宗文 李旭峰 黄艳华 唐浩勋 李波 耿荣

急性呼吸道感染（acute respiratory tract infection，ARTI）是儿童时期的常见病和多发病，可引发急性上呼吸道感染、支气管炎和肺炎等病症。肺炎是5 岁以下儿童死亡的主要原因[1]，严重威胁儿童健康。呼吸道病毒、肺炎支原体及肺炎衣原体是引起儿童ARTI 的重要病原体。为了解北京市顺义区儿童呼吸道感染的病原学特点，本研究对2018年8月～2019年8月我院收治的1 730 例患儿呼吸道标本进行7 种常见病原体检测，结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 一般资料选取2018年8月～2019年8月我院呼吸道感染住院患儿1 730 例，其中男994 例，女736 例，年龄0 天～16 岁。其中，上呼吸道感染137例，支气管炎134 例，肺炎1 335 例，其他疾病124例。诊断标准参照第八版《诸福棠实用儿科学》[2]。

1.2 方法

1.2.1 标本采集 1 730 例患儿入院的当天或次日，由专职医护人员用一次性咽拭子迅速擦拭患者两侧腭弓、咽及扁桃体。其中73 例重症肺炎行纤支镜灌洗患儿留取肺泡灌洗液，将拭子插入装有1ml 1×PBS 缓冲液或生理盐水的采集管中，折断并弃去咽拭子尾部，旋紧管盖，注明标本采集时间并及时处理送检。未检测样本可在4℃存放72h。

1.2.2 检测方法 采用双扩增技术（DAT）检测咽拭子采集的脱落细胞中的七种呼吸道病原体RNA，包括甲型流感病毒（FluA）、乙型流感病毒（FluB）、呼吸道合胞病毒（RSV）、人副流感病毒（PIV）、腺病毒（ADV）、肺炎支原体（MP）和肺炎衣原体（CP）。具体操作按试剂盒说明书进行，试剂由武汉中帜生物科技股份有限公司提供。

1.3 统计学方法应用SPSS 25.0 统计软件进行统计学分析，计数资料用百分比表示，采用卡方检验进行比较分析，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 病原体检出情况1 730 例送检标本进行七项呼吸道病原体RNA 检测示阳性标本777 例，总阳性率44.91%。其中MP 阳性率最高，为22.37%（387/ 1730），其次为RSV，阳性率为9.08%（157/1730），FluA、FluB、PIV、ADV、CP 阳性率分别为4.45%、1.50%、6.36%、3.76%和0.40%。病毒感染率25.14% （435/1730），非典型性病原体感染率22.77%（394/ 1730），混合感染率2.95%（51/1730），其中病毒混合感染25 例（1.45%，25/1730），病毒和非典型性病原体混合感染26 例（1.50%，26/1730）。见表1、2。

2.2 病原体感染与性别的关系男性患儿病原体阳性率为45.98%（457/994），女性患儿病原体阳性率为43.48%（320/736），两者差异无统计学意义（χ2= 1.07，P＞0.05）。见表2。

表 1 呼吸道病原体混合感染情况

表2 不同性别呼吸道病原体RNA 检出情况[n（%）]

2.3 病原体感染与年龄的关系将送检标本分为＜1 岁、 1～3 岁、4～6 岁、7～16 岁四个年龄组，病原体检出率分别为40.19%（86/214）、40.65%（365/898）、48.98%（192/392）和59.29%（134/226），不同年龄组间差异有统计学意义（χ2=30.05，P＜0.05）。RSV和PIV 感染率随患儿年龄增长而下降，在＜1 岁组检出率最高。肺炎支原体检出率随患儿年龄增长呈升高趋势，7～16 岁组检出率最高。见表3。

2.4 病原体感染与季节的关系春、夏、秋、冬四季病原体检出率分别为35.58%（137/385）、44.21%（214/484）、54.32%（220/405）和45.18%（206/456），四季间差异有统计学意义（χ2=28.14，P＜0.05）。FluA、FluB、RSV、PIV、MP 四季间差异有统计学意义，ADV 和CP 四季间差异无统计学意义。MP全年均可发生，夏秋季节发病率显著高于冬春季，FluB 在今年春季有一定流行。见表4。

表3 不同年龄呼吸道病原体 RNA 检出情况[n（%）]

表4 不同季节呼吸道病原体 RNA 检出情况[n（%）]

2.5 病原体感染与疾病的关系1 730 例患儿中，肺炎患儿占比高达77.17%（1335/1730），上呼吸道感染和支气管炎患儿占比相当，分别为7.92%（137/1730）和7.75%（134/1730）。七种病原体在肺炎中检出率最高为49.66%（663/1335），其次为支气管炎32.09%（43/134）、其他疾病30.65%（38/124），均高于上呼吸道感染24.09%（33/137）。七种病原体在不同疾病中的检出率差异有统计学意义（χ2=55.30，P＜0.05）。

2.6 不同样本类型的病原体检出情况1 730 例患儿中，样本类型为肺泡灌洗液（BALF）的检出率为 80.82%（59/73）且均为MP 阳性，显著高于样本类型为咽拭子（Oropharyngeal swab，OPS） 的检出率 41.50%（718/1730），（χ2=44.16，P＜0.05）。

3 讨论

病原体可引起多种临床表现，同一临床表现可由多种病原体引起，全面、早期、精准的病原学诊断对于临床及时合理用药有重要意义。

本研究显示，七项病原体总阳性率为44.91%，MP 是引起患儿呼吸道感染的最主要病原体，与北京[3]、武汉[4]、湖南[5]、安徽[6]、亚洲地区[7]的报道一致，感染率居首，本研究MP 的检出率为22.37%，与安徽、亚洲地区报道相近（21.3%～23.5%），低于北京、武汉、湖南等地（39.0%～56.78%）。这可能与检测使用的方法相关，北京近郊区等地区采用血清学方法检测IgM 抗体，IgM 抗体一般在初次感染1 周内开始升高，2～3 周达到高峰，4 周下降，2～3月降至最低[8]，在体内持续时间长，检测无法有效区分是近期感染还是现症感染的阳性结果，导致阳性率偏高。本研究检测MP RNA，RNA 随病原体死亡而降解，检测结果与MP 感染严重程度相关性好，阳性结果可确诊早期现症感染[9]，对于感染转归和药物疗效的评价更有指导意义。

本研究中病毒以RSV 检出率最高（9.08%），其次分别为PIV、FluA、ADV、FluB，排序与谢正德等[10]、李权恒等[11]研究一致。其中RSV 和PIV 在3岁以下婴幼儿中多见，感染率随患儿年龄增长而下降，在＜1 岁组检出率最高，分别为16.82%、12.62%，病毒检出率在6 岁以上儿童中显著下降，与既往研究一致[4，6，10]。肺炎支原体检出率随患儿年龄增长呈升高趋势，不同年龄组间有显著差异，＜1 岁婴儿组最低（5.14%），7～16 岁学龄儿童组最高（53.98%），与郭文卉等[3～5]报道一致。ADV 和FluB 在不同年龄组中检出率无显著差异。

本研究中FluA 在冬春季节高发，FluB 在今年春季流行，4月达到发病高峰，检出超过FluA 和RSV。以往报道[10，12]中RSV 主要在冬春季流行，本研究则发现RSV 以秋冬季流行为主，主要流行于10月至次年3月，也有国内外研究李权恒等[11]、Finianos 等[13]与本研究结果一致，可能是由于RSV亚型更替对流行造成的显著影响，Yu 等[14]发现北京地区儿童RSV 感染具有鲜明的季节性流行特征，RSV 季节通常开始于每年10月中旬，结束于次年五月中旬，A、B 亚型交替流行，每隔两年转换一次，A 亚型高流行的年份RSV 季节会提前3～5 周，推测与RSV 亚型更替密切相关，FluB 的暴发流行也有一定影响。MP 全年散发流行，夏秋季节感染率显著高于冬春季，与上海[15]的研究一致，MP 感染一年四季均可发生，每3～7年有一次流行高峰[16]，掌握病原体的流行特征可为临床诊疗和疾病防控提供依据。

本研究中肺炎患儿的病原体检出率最高为49.66%，其次为支气管炎32.09%，明显高于上呼吸道感染。在不同样本类型的病原体检测中，BALF检出率为80.82%且均为MP 阳性，仅有1 例为MP和FluA 混合感染，显著高于OPS，OPS 的病毒检出率28.12%、MP 检出率19.79%。张新星等[17]研究显示，上呼吸道样本的病毒检出率高于BALF，BALF 的MP 检出率明显高于上呼吸道样本，联合检测可提高病原检出率。本研究结果与此一致，但由于BALF 组和OPS 组入组患儿不同，推测可能是采集BALF 的患儿均属病情较重的下呼吸道感染而导致MP 检出率高，或者BALF 中的MP 拷贝数更高，OPS 的病毒检出率高可能是感染的主要靶部位在鼻咽部，或者呼吸道感染早期以病毒感染为主，为细菌定植提供条件，进而引起下呼吸道的严重继发感染，这时以细菌和非典型性病原体为主，有待于进一步研究证实。

综上所述，本研究通过对2018年8月～2019年8月我院呼吸道感染患儿的病原体检测，对本地区呼吸道病原体流行特征有一定认识，为疾病的临床诊断和治疗提供可靠的依据，可有效防止医院感染及抗菌药物的滥用。