雷 燕

（浙江省丽水市农业农村局，浙江丽水 323000）

0 引言

中药材的安全性在国内外引起了越来越多的关注。作为汤剂和中成药的基本原料，其质量直接影响临床用药的安全性和疗效，加强其质量控制具有重要意义。中草药在种植、收获、运输、贮存过程中，由于方法不当，容易引起大量真菌生长和毒素积累，直接影响中草药的质量和疗效。目前，粮食、食品中真菌及其毒素的污染已引起广泛关注，并提出了防治措施、法规和限量标准。然而，对中药材真菌污染的系统研究还不够深入。

1 中药材中常见真菌毒素种类及污染状况

1.1 黄曲霉毒素

黄曲霉、寄生曲霉、生曲霉和拟酒石酸曲霉可产生黄曲霉毒素。是一类化学结构相似的二呋香豆素衍生物。目前已分离鉴定出12种化合物，包括AFB1、B2、G1、G2、M1、M2、P1、Q、H1、GM、B2A和有毒醇。4种主要的毒素包括AFB1、AFB2、AFG1和AFG2，可以直接污染食品、饲料和中药材。1993年，AF被世界卫生组织的癌症研究机构（IARC）划定为Ⅰ类致癌物，属于剧毒物质。在天然污染的食品中以AFB1最为多见，其毒性和致癌性也最强。研究表明，中药材中真菌毒素污染较为普遍，尤其是AF检出率很高。对当归、党参、黄芪等30多种中药进行了检测。在杏仁、龙胆、生煎曲、生麦芽和柴胡中均发现黄曲霉毒素。大量调查结果表明，国产中药AFB1的污染率为82%-100%，污染水平为0.12～202.00 µg·kg-1。其中，桔皮、麦冬、当归、椰壳、肥海、神曲污染报道较多。国外检测到19种中药，其中3种含有黄曲霉毒素，有的甚至高达28µg·kg-1。对意大利市场上的103份香料、香料、药用茶和药用植物样品进行了测试。发现7个含有黄曲霉毒素的样本。

1.2 单端抱霉烯族类毒素

单端丙烯醛毒素是镰刀菌真菌产生的一类化合物。根据其化学结构可分为T-2毒素和脱氧雪腐镰刀菌醇（DON）。T-2毒素是由禾谷镰刀菌、三丝镰刀菌和马镰刀菌产生的一种真菌毒素。主要影响血液、肝脏、肾脏、胰腺肌肉和淋巴细胞的功能。唐，又称呕吐毒素，主要由禾谷镰刀菌和黄镰刀菌产生。它能在人体内产生食物中毒性白细胞减少症。

2 中药材中真菌毒素分析方法概况

2.1 提取净化

提取即采用合适的提取液和提取方式，将目标成分如真菌毒素从样品中充分地转移到溶剂中并均质化的过程，为以后的净化和定量检测的前提。为了获得更高的选择性和灵敏度，通常需要进一步纯化提取物。净化是指在检测前去除提取物中的脂肪、蛋白质和色素等杂质，以避免干扰真菌毒素的检测。有些学者为减少基质效应和净化过程对目标成分造成损失，采取直接稀释法，样品用84%乙腈提取后，用甲醇溶解上清液，稀释4次，用LC-MS/MS直接测定，高、中、低浓度时赭曲霉素A的绝对回收率为89.6%～95.2%。在中药及其相关产品中多种真菌毒素同步检测研究中，将样品经甲醇-水-甲酸（79∶20∶1，v/v/v）提取后，上清液氮吹复溶，直接上LC-MS/MS检测，8种真菌毒素的回收率在71.0%～106.0%之间，线性相关系数（R2）为0.9977～0.9999。

2.2 检测方法

近年来针对真菌毒素的化学检测方法不断趋于完善，检测方法主要分为两类：快速筛选法和确认法。目前较为普遍使用的真菌毒素快速筛选法主要是酶联免疫法（ELISA）和胶体金标记技术。酶联免疫吸附试验（ELISA）适用于大量样品的快速筛选，但存在假阳性的缺点，不能准确定量。比较了酶联免疫吸附法和高效液相色谱法测定20种药材中AFB1的结果。酶联免疫吸附试验假阳性率为70%。阳性样品中AFB1的含量也与高效液相色谱法有显著差异。胶体金标记技术是一种新型的固相免疫标记技术，与ELISA法同属于免疫学方法，具有操作简单、快速、稳定性好、单个现场检测成本低等特点，为目前研究应用比较广泛的一种方法。等将己确定污染值的玉米、小麦样品制备为不同毒素含量的验证样品，对胶体金免疫层析法的准确性、误差范围等项目进行了验证实验，其检测结果与ELISA法基本一致。另外，基于免疫反应的生物感应技术和蛋白芯片技术也是近年来新兴的真菌毒素快速检测技术。

3 结语

中药是我国优秀文化遗产的一部分，在疾病预防、治疗及保健等方面做出了卓越的贡献。随着人们对中药的广泛应用，其安全问题也引起人们高度重视，真菌污染导致的中药霉变是影响中药质量与使用安全的主要问题之一。