杨 琴，周永妍，丁艳谱，孙胜斌，姜国志

(1.神威药业集团有限公司技术部，河北 石家庄 051430； 2.河北省中药注射液工程技术研究中心，河北 石家庄 051430； 3.中药注射剂新药技术开发国家地方联合工程实验室，河北 石家庄 051430)

清开灵注射液是在中医著名古方“安宫牛黄丸”的基础上经过拆方改制而成的中药注射剂，具有清热解毒、化痰通络和醒神开窍的功效，收载于《中华人民共和国药典：一部》(2015年版)[1]。药品包装材料和包装容器是药品不可分割的一部分，在保证内在药物质量的稳定性、有效性和安全性方面发挥着至关重要的作用。药品与包装材料的相容性研究日益受到重视[2-8]，中药液体制剂与包装材料中被吸附、药物浓度不稳定等问题早已引起广泛关注[9-10]。玻璃具有化学稳定性好、可高温消毒等优势[11]，根据其化学组成和产品性能分为高硼硅玻璃、中性硼硅玻璃、低硼硅玻璃及钠钙玻璃。对于化学稳定性要求不高的药品，使用低硼硅玻璃安瓿已足够；但对于一些酸性、碱性较强的药品，低硼硅玻璃安瓿就很难满足药液稳定贮藏的要求。目前市场上的清开灵注射液多采用低硼硅玻璃安瓿，随着药品安全性倍受重视，低硼硅玻璃安瓿有逐渐被淘汰的趋势。中硼硅玻璃安瓿以其良好的材质、性能，特别是优异的化学稳定性和热稳定性被广泛应用于各类注射剂、血液及疫苗等药品的包装，是国际上大量使用的医药玻璃材料。虽然高硼硅玻璃安瓿具备优异的抗温度急变性和良好的化学稳定性，但软化点较高，要求封口时的火焰温度较高，用于盛装水针剂的安瓿封口比较困难，目前国际上这类产品甚少。故本研究依据YBB00142002-2015《药品包装材料与药物相容性试验指导原则》[12]及《化学药品注射剂与药用玻璃容器相容性研究技术指导原则》[13]，探讨中性硼硅玻璃安瓿与清开灵注射液的相容性，以评估中性硼硅玻璃安瓿作为中药注射液包装材料的适宜性，为后续其他中药注射液的相容性研究起到借鉴作用。

1 材料

1.1 仪器

1260型高效液相色谱仪(安捷伦科技有限公司)；YB-Ⅱ型澄明度检测仪(天大天发科技有限公司)；SHH-250SD型药品稳定性试验箱(重庆市永生实验仪器厂)；SHH-100GD型数显光照培养箱(重庆市永生实验仪器厂)；AE240型电子分析天平(梅特勒-托利多)；DELTA320型酸度计(梅特勒-托利多)；GWF-5JA型不溶性微粒检测仪(天河医疗仪器有限公司)。

1.2 药品与包装材料

清开灵注射液(神威药业集团有限公司，批准文号：国药准字Z13020880，批号：1505181、1505182、1505183、1505191和1505201)；中性硼硅玻璃安瓿(沧州四星玻璃股份有限公司，批号：20150223、20150224和20150225)。

2 方法与结果

2.1 样品制备及检测

2.1.1 考察安瓿：选取3批安瓿与同一批药液制剂得到3批注射液(批号：1505181、1505182和1505183)，进行高温、光照、冻融、加速及长期试验，并按照中性硼硅玻璃安瓿标准YBB00322005-2检查安瓿外观，测量三氧化二硼含量，砷、锑、铅及镉浸出量，121 ℃颗粒法耐水性及98 ℃颗粒法耐水性；按照《中华人民共和国药典：一部》(2015年版)中清开灵注射液项下方法检测药品可见异物、pH及不溶性微粒。

2.1.2 考察药品：选取3批清开灵药液与同一批安瓿制剂得到3批注射液(规格：1505181、1505191和1505201)，进行高温、光照、冻融、加速及长期试验，并按照《中华人民共和国药典：一部》(2015年版)中清开灵注射液项下方法检测药品性状、可见异物、pH、不溶性微粒、总固体、炽灼残渣、含量、有关物质(蛋白质、树脂、草酸盐、鞣质及钾离子)、重金属和有害元素残留量及异常毒性。

2.2 高温试验

3批样品(批号：1505181、1505182和1505183)在60 ℃条件下横放10 d，于第5、10日取样，按安瓿考察项检测，结果均符合标准要求，部分检测结果及比较分析见表1—3(统计分析时，“初”指“初始日/月”，“末”指“最末日/月”，“猪脱”指“猪去氧胆酸”，下同)。3批样品(1505181、1505191和1505201)在60 ℃条件下横放10 d，于第5、10日取样，按药品考察项检测，结果均符合标准要求，部分检测结果及比较分析见表4—6。

表1 高温试验安瓿考察部分检验结果Tab 1 Results of partial test of ampoule in high-temperature test

表2 高温试验安瓿考察配对t检验结果(成对样本统计量)Tab 2 Results of pair t test of ampoule in high-temperature test(Paired samples statistics)

注：“a”表明无法计算相关系数和t，因为差别标准误为0

Note：“a” means the correlation and t cannot be computed because the standard error of the difference is 0

表3 高温试验安瓿考察配对t检验结果(成对样本检验)Tab 3 Results of pair t test of ampoule in high-temperature test(Paired samples test)

采用SPSS 11.5统计学软件分析，与0日初检比较，差异均无统计学意义(P>0.05)，表明样品在高温条件下质量稳定。

2.3 强光照射试验

3批样品(批号：1505181、1505182及1505183)横放于光照箱内，于照度为(4 500±500)lx条件下放置10 d，于第5、10日取样，按安瓿考察项检测，结果均符合标准要求，部分检测结果及比较分析见表7—9。3批样品(批号：1505181、1505191及1505201)横放于光照箱内，于照度(4 500±500)lx条件下放置10 d，于第5、10日取样，按药品考察项检测，结果均符合标准要求，部分检测结果及比较分析见表10—12。采用SPSS 11.5统计学软件分析，与0日初检比较，差异均无统计学意义(P>0.05)，表明样品在光照条件下质量稳定。

表4 高温试验药品考察部分检验结果Tab 4 Results of partial test of drugs in high-temperature test

表5 高温试验药品考察配对t检验结果(成对样本统计量)Tab 5 Results of pair t test of drugs in high-temperature test(Paired samples statistics)

注：“a”表明无法计算相关系数和t，因为差别标准误为 0

Note：“a”means the correlation andtcannot be computed because the standard error of the difference is 0

表6 高温试验药品考察配对t检验结果(成对样本检验)Tab 6 Results of pair t test of drugs in high-temperature test(Paired samples test)

表7 光照试验安瓿考察部分检验结果Tab 7 Results of partial test of ampoule in strong light exposure test

表8 光照试验安瓿考察配对t检验结果(成对样本统计量)

注：“a”表明无法计算相关系数和t，因为差别标准误为 0

Note：“a”means the correlation andtcannot be computed because the standard error of the difference is 0

表9 光照试验安瓿考察配对t检验结果(成对样本检验)Tab 9 Results of pair t test of ampoule in strong light exposure test(Paired samples test)

表11 光照试验药品考察配对t检验结果(成对样本统计量)

注：“a”表明无法计算相关系数和t，因为差别标准误为 0

Note：“a”means the correlation and t cannot be computed because the standard error of the difference is 0

表12 光照试验药品考察配对t检验结果(成对样本检验)

2.4 冻融试验

3批样品(批号：1505181、1505182和1505183)横放于-10～-20 ℃条件下2 d，然后在40 ℃加速条件下考察2 d，如此循环3次，按安瓿考察项检测，结果均符合标准要求，部分检测结果及比较分析见表13—15。3批样品(批号：1505181、1505191和1505201)横放于-10～-20 ℃条件下2 d，然后在40 ℃加速条件下考察2 d，如此循环3次，按药品考察项检测，结果均符合标准要求，部分检测结果及比较分析见表16—18。采用SPSS 11.5统计学软件分析，冻融前后比较的差异均无统计学意义(P>0.05)，表明样品在冻融条件下质量稳定。

表13 冻融试验安瓿考察部分检验结果Tab 13 Results of partial test of ampoule in freeze-thaw test

表14 冻融试验安瓿考察配对t检验结果(成对样本统计量)

注：“a”表明无法计算相关系数和t，因为差别标准误为 0

Note：“a”means the correlation andtcannot be computed because the standard error of the difference is 0

表15 冻融试验安瓿考察配对t检验结果(成对样本检验)

表16 冻融试验药品考察部分检验结果Tab 16 Results of partial test of drugs in freeze-thaw test

表17 冻融试验药品考察配对t检验结果(成对样本统计量)Tab 17 Results of pair t test of drugs in freeze-thaw test(Paired samples statistics)

注：“a”表明无法计算相关系数和t，因为差别标准误为 0

Note：“a”means the correlation and t cannot be computed because the standard error of the difference is 0

表18 冻融试验药品考察配对t检验结果(成对样本检验)Tab 18 Results of pair t test of drugs in freeze-thaw test(Paired samples test)

2.5 浸水试验

3批样品(批号：1505181、1505182和1505183)于水中放置30 min，暴露4 h后，按安瓿考察项检测，结果均符合标准要求，部分检测结果及比较分析见表19—21。3批样品(批号：1505181、1505191和1505201)于水中放置30 min，暴露4 h后，按药品考察项检查，结果均符合标准要求，部分检测结果及比较分析见表22—24。采用SPSS 11.5统计学分析，浸水前后比较，差异均无统计学意义(P>0.05)，表明样品在浸水条件下质量稳定。

表19 浸水试验安瓿考察部分检验结果Tab 19 Results of partial test of ampoule in submerging test

表20 浸水试验安瓿考察配对t检验结果(成对样本统计量)Tab 20 Results of pair t test of ampoule in submerging test(Paired samples statistics)

注：“a”表明无法计算相关系数和t，因为差别标准误为 0

Note：“a”means the correlation andtcannot be computed because the standard error of the difference is 0

表21 浸水试验安瓿考察配对t检验结果(成对样本检验)

2.6 加速试验

3批样品(批号：1505181、1505182和1505183)于(40±2)℃下放置(横放)6个月，在第1、2、3及6个月时取样，按安瓿考察项检测，部分检测结果及比较分析见表25—27。3批样品(批号：1505181、1505191和1505201)于(40±2)℃下放置(横放)6个月，在第1、2、3及6个月时取样，按药品考察项检测，部分检测结果及比较分析见表28—30。采用SPSS 11.5统计学分析，与0月初检比较，差异均无统计学意义(p>0.05)，表明样品加速6个月质量稳定。

表22 浸水试验药品考察部分检验结果Tab 22 Results of partial test of drugs in submerging test

表23 浸水试验药品考察配对t检验结果(成对样本统计量)Tab 23 Results of pair t test of drugs in submerging test(Paired samples statistics)

注：“a”表明无法计算相关系数和t，因为差别标准误为 0

Note：“a”means the correlation andtcannot be computed because the standard error of the difference is 0

表24 浸水试验药品考察配对t检验结果(成对样本检验)

2.7 长期试验

表25 加速试验安瓿考察部分检验结果Tab 25 Results of partial test of ampoule in acceleration test

表26 加速试验安瓿考察配对t检验结果(成对样本统计量)Tab 26 Results of pair t test of ampoule in acceleration test(Paired samples statistics)

表27 加速试验安瓿考察配对t检验结果(成对样本检验)

3批样品(批号：1505181、1505182和1505183)在室温(25 ℃)下横放，于第3、6、9、12、18、24及36个月时取样，按安瓿考察项检测，部分检测结果及比较分析见表31—33。3批样品(批号：1505181、1505191及1505201)在室温下横放，于第3、6、9、12、18及36个月时取样，按药品考察项检测，部分检测结果及比较分析见表34—36。采用SPSS 19.0统计学分析，与0月初检比较，差异均无统计学意义(P>0.05)，表明样品长期(36个月)质量稳定。

表28 加速试验药品考察部分检验结果Tab 28 Results of partial test of drugs in acceleration test

表29 加速试验药品考察配对t检验结果(成对样本统计量)Tab 29 Results of pair t test of drugs in acceleration test(Paired samples statistics)

注：“a”表明无法计算相关系数和t，因为差别标准误为 0

Note：“a”means the correlation andtcannot be computed because the standard error of the difference is 0

表30 加速试验药品考察配对t检验结果(成对样本检验)Tab 30 Results of pair t test of drugs in acceleration test(Paired samples test)

3 讨论

近几年，国家药监部门越来越重视药物与其包装材料的相容性研究[14]，用以考察药用包装材料与药物间是否会发生相互的或单方面的迁移、变质等反应，证实包装材料与药品的相容性，保证药品效期内，包装容器不会影响药物的安全性、有效性及均一性。中药注射液的安全性日益受到重视，根据注射剂自身用药特点，其包装材料相容性研究显得更为重要。B2O3是提高玻璃热稳定性和化学稳定性的主要成分，而且在一定的范围内，随着其含量的提高，玻璃的性能越好。现中药注射液包装材料多为低硼硅玻璃安瓿，其B2O3含量为5%～8%，而中性硼硅玻璃安瓿B2O3含量为8%～12%。因化学组成的不同，性能也有差异，中性硼硅玻璃较低硼硅玻璃更助于注射液质量的保证[15-16]，其具有膨胀系数小、耐极冷极热性强、机械强度高、抗冲击性强及化学稳定性好等特点[17]，可以逐渐替代低硼硅玻璃安瓿，成为注射剂包装的首选材质。

表31 长期试验安瓿考察部分检验结果Tab 31 Results of partial test of ampoule in long-term test

表32 长期试验安瓿考察配对t检验结果(成对样本统计量)Tab 32 Results of pair t test of ampoule in long-term test(Paired samples statistics)

注：“a”表明无法计算相关系数和t，因为差别标准误为 0

Note：“a”means the correlation andtcannot be computed because the standard error of the difference is 0

表33 长期试验安瓿考察配对t检验结果(成对样本检验)Tab 33 Results of pair t test of ampoule in long-term test(Paired samples test)

表34 长期试验药品考察部分检验结果Tab 34 Results of partial test of drugs in long-term test

表35 长期试验药品考察配对t检验结果(成对样本统计量)Tab 35 Results of pair t test of drugs in long-term test(Paired samples statistics)

注：“a”表明无法计算相关系数和t，因为差别标准误为 0

Note：“a”means the correlation andtcannot be computed because the standard error of the difference is 0

表36 长期试验药品考察配对t检验结果(成对样本检验)Tab 36 Results of pair t test of drugs in long-term test(Paired samples test)

本研究结果显示：(1)中性硼硅玻璃安瓿在高温、强光照射、冻融及浸水等恶劣条件下均无破损现象，安瓿外观及药品性状均完好，无有害金属的释放(有害金属含量未有变化)，无含量的相互吸附作用(各含量均未有明显变化)；(2)中性硼硅玻璃安瓿在药品包装后加速与长期稳定性条件下质量均稳定，指标成分无明显变化，检测结果均符合规定；(3)中性硼硅玻璃安瓿与清开灵注射液具有较好的药物相容性。表明药品和包装材料未发生相互影响，两者稳定性良好，该包装材料能有效保证药品质量稳定，符合作为直接接触药品包装材料或容器的要求。该方法对探讨中药注射液与中性硼硅玻璃安瓿的相容性有借鉴作用，为中硼硅玻璃安瓿的产业化应用提供研究支持。