任章章

(陇南市动物疫病预防控制中心，甘肃 陇南 730046)

农业部第2635号公告表明，2011年6月以来，全国未检出亚洲I型口蹄疫病原学阳性样品。经全国动物防疫专家委员会评估，我国亚洲I型口蹄疫已达到全国免疫无疫标准。农业部研究决定，自2018年7月1日起，在全国范围内停止亚洲I型口蹄疫免疫，停止生产销售含有亚洲I型口蹄疫病毒组分的疫苗。根据农业部规定，甘肃省兽医局及时调整口蹄疫疫苗采购计划，新购进口蹄疫O型、A型二价灭活苗用作牛羊免疫。为了掌握肉牛注射口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗后的免疫效果，陇南市动物疫病预防控制中心于2018年8月开展了肉牛接种口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗的免疫效果试验，为肉牛口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗普遍免疫提供了理论依据。

1 材料与方法

1.1 选择试验肉牛

在陇南市武都区选择一个肉牛育肥场，挑选40头10-12月龄临床检查健康的西门塔尔杂交肉牛作为试验用牛。

1.2 试验用疫苗

口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗(O/MYA98/BY/2010株+Re-A/WH/09株)，中农威特生物科技股份有限公司生产。疫苗规格：100ml/瓶，生产批号：D181502J，有效期20190523。

1.3 免疫抗体检测试剂

口蹄疫O型和A型液相阻断ELISA检测试剂盒均由中国农业科学院兰州兽医研究所生产，O型批号：20180618101-10，A型批号：20180604103-2。

1.4 免疫试验方法

1.4.1 免疫接种及采血 40头试验肉牛在分别采集血样后注射疫苗，采用颈部肌肉注射，每头牛注射1 ml，注射完疫苗后打耳标并详细登记。采集的血样无菌分离血清备用。

1.4.2 免疫后临床观察及采血 免疫后定期观察试验牛临床表现。免疫后21 d，分别采集40头试验牛血样，无菌分离血清备用。

1.4.3 免疫前后的抗体检测 严格按照中国农业科学院兰州兽医研究所生产的口蹄疫O型、A型液相阻断ELISA检测试剂盒说明书进行操作，O型和A型ELISA反应板均按每板10头份进行操作，血清稀释度23-210。

1.4.4 结果判定标准 根据农业农村部《2018年国家动物疫病监测与流行病学调查计划》附件2《口蹄疫监测计划》规定执行：口蹄疫O型、A型液相阻断ELISA，免疫21天抗体效价≥26为个体免疫合格，免疫合格个体数量占群体总数的70%(含)以上为免疫合格群体。

2 试验结果

2.1 临床观察结果

注射疫苗后定期观察试验牛的采食、饮水、精神状态等临床表现至21 d，未见任何不良反应。

2.2 抗体检测结果

实验室检测结果表明：40头试验牛免疫前O型口蹄疫抗体检出20头，但抗体水平均低于26；用口蹄疫O型、A型二价灭活苗免疫后21天，检出抗体合格样品34份，合格率85.0%(34/40)。免疫前40头试验牛A型口蹄疫抗体均未检出，用口蹄疫O型、A型二价灭活苗免疫后21天，检出A型抗体合格样品31份，合格率77.5%(31/40)。A型抗体水平普遍比O型低1-2个滴度。详细检测结果见表1。

表1 免疫前后抗体检测结果对照表

3 讨论与小结

1)从试验结果来看，用O型、A型二价灭活苗免疫肉牛21 d后，O型口蹄疫抗体合格率达85.0%，A型口蹄疫抗体合格率77.5%，A型抗体合格率明显低于O型，A型抗体水平普遍比O型低1～2个滴度。分析原因，主要是因为试验牛在春季普遍注射过口蹄疫O型、亚洲I型二价灭活疫苗，有一定免疫基础，而A型是首次免疫，故A型抗体合格率低于O型，且抗体滴度普遍比O型和亚洲Ⅰ型低1～2个滴度。

2)从检测结果来看，用O型、A型二价灭活苗免疫肉牛21 d后，仍然有部分不合格个体，原因可能和动物个体差异有关，个别牛应各种原因不能对疫苗产生足够的免疫应答，不能产生足够的免疫抗体。

3)按照疫苗使用说明，本次试验使用的O型、A型二价灭活苗注射剂量为每头牛1 ml，相比较以前的口蹄疫O型、亚洲I型二价灭活疫苗，注射剂量减少了一半，这就为广大基层防疫机构的疫苗贮存和使用提供的更加有利的条件。注射剂量减少一方面减少了疫苗贮存压力，减轻了防疫员的劳动强度，由于注入的疫苗佐剂随之减少，另一方面也可减少了免疫不良反应的发生几率，可显著提高口蹄疫防控水平。

4)随着亚洲Ⅰ型口蹄疫的逐渐消失，国家适时调整口蹄疫免疫计划，用O型、A型二价灭活苗代替以前的O型、亚洲I型二价灭活疫苗，是顺应口蹄疫防控形势的必然选择。本次试验表明：用O型、A型二价灭活苗免疫肉牛后21天，未见任何不良反应发生，O型、A抗体合格率完全能达到农业部规定的标准。