王蕾 倪万茂 曹顺旺 朱利芬 童向民⋆

类风湿性关节炎（RA）是常见的以关节慢性炎症性病变为主要表现的全身性自身免疫病。RA主要侵犯外周关节，但肺、心、神经系统、血液、眼等器官或组织亦可受累。其主要病理变化为滑膜细胞增生，炎症细胞浸润，血管翳形成，浸蚀人软骨及骨组织。滑膜持续炎症导致关节结构破坏、畸形和功能丧失。有研究表明，RA患者中IL-6、IL-17A、TNF-α的表达水平明显升高［1］，IL-10能抑制前炎症因子的产生，既可增加RA患者的抗炎因子，也可减少RA的致病性促炎因子［2］。作者通过检测RA患者血清中细胞因子IL-6，IL-10，IL-17A，TNF-α的表达，探讨其在RA的临床意义。

1 临床资料

1.1 一般资料 选择2016年3月至2017年6月浙江省人民医院住院及门诊RA患者222例，其中门诊95例，男8例，女87例；平均年龄（47.46±13.45）岁；住院127例，男27例，女100例；平均年龄（59.43±11.51）岁。所有患者均符合2009年美国风湿病学会（ACR）和欧洲抗风湿病联盟（EULAR）提出的新的RA分类标准和中医诊断为痹症湿热痹阻型，并排除同时患有其他结缔组织病，感染性疾病或肿瘤等相关性疾病。根据DAS28评分将住院患者分为缓解组和活动组，其中缓解组37例，男10例，女27例；平均年龄（57.03±12.69）岁；活动组90例，男17例，女73例；平均年龄（60.42±10.90）岁。健康体检者33例为对照组，男19例，女14例；平均年龄（64.58±11.61）岁。

1.2 方法 所有受检者清晨空腹坐位肘静脉血采集2ml，采用分离胶促凝管，1500r/min离心5min，分离血清备用。Th1/Th2/Th17检测试剂盒购自美国BD公司，严格按照说明书操作。实验仪器采用美国Beckman Coulter 公司的Navios流式细胞仪，并使用其配套的kaluza软件分析白介素-2（IL-2），IL-4，IL-6，IL-10，IL-17A，TNF-α，γ-干扰素（IFN-γ）的结果。

1.3 统计学方法 采用SPSS 17.0统计软件。计量资料以（±s）表示，采用非参数检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 门诊RA患者组与健康对照组各细胞因子表达水平比较 见表1。

表1 门诊RA患者组与健康对照组七种细胞因子表达水平比较［ng/L，（±s）］

表1 门诊RA患者组与健康对照组七种细胞因子表达水平比较［ng/L，（±s）］

门诊RA患者 健康对照组 P值IL-2 4.42±11.66 0.20±0.54 0.196 IL-4 14.80±108.07 0.24±0.67 0.110 IL-6 16.06±23.18 0.57±0.94 0.000 IL-10 3.49±5.09 0.81±0.84 0.002 IL-17A 3.83±11.95 0.16±0.32 0.000 TNF-α 20.29±30.38 2.60±2.93 0.042 IFN-γ 1.50±2.28 0.24±0.70 0.089

2.2 缓解组与活动组各细胞因子表达水平比较 见表2。

表2 缓解组与活动组各细胞因子表达水平比较［ng/L，（±s）］

表2 缓解组与活动组各细胞因子表达水平比较［ng/L，（±s）］

住院RA患者中缓解组 住院RA患者中活动组 P值IL-2 3.17±5.76 13.29±48.37 0.068 IL-4 2.03±3.69 11.65±49.58 0.057 IL-6 41.05±81.47 61.87±121.49 0.002 IL-10 3.71±4.20 11.58±33.24 0.006 IL-17A 3.00±6.31 25.27±122.88 0.047 TNF-α 6.71±14.00 19.70±71.33 0.019 IFN-γ 3.88±12.64 11.36±60.46 0.085

2.3 不同性别RA患者细胞因子表达水平比较 见表3。

表3 不同性别RA患者细胞因子表达水平比较［ng/L，（±s）］

表3 不同性别RA患者细胞因子表达水平比较［ng/L，（±s）］

男女P值IL-2 22.25±76.01 5.11±10.79 0.240 IL-4 21.28±78.17 9.54±77.24 0.099 IL-6 56.70±84.72 35.45±88.08 0.020 IL-10 17.57±51.81 4.79±6.85 0.004 IL-17A 42.99±193.20 6.62±20.20 0.888 TNF-α 37.50±111.73 14.10±24.48 0.049 IFN-γ 20.75±96.30 3.11±7.96 0.096

3 讨论

RA是一种病因未明的慢性、以滑膜炎症为主的系统性疾病。其特征是手、足小关节的多关节、对称性、侵袭性关节炎症，常伴有关节外器官受累及血清类风湿因子阳性，最终可以导致关节畸形及功能丧失。研究表明，RA与较多细胞因子的表达水平相关，IL-6、IL-10、IL-17A、TNF-α等异常表达在RA患者中起重要作用［3-4］。本资料结果显示，与健康对照者比较，RA患者血清中IL-2，IL-4，IFN-γ含量差异无统计学意义（P＞0.05），而 IL-6、IL-10、IL-17A、TNF-α的血清水平则明显升高（P＜0.05）。此外，活动期RA患者血清中IL-6、IL-10、IL-17A、TNF-α含量明显高于缓解期患者，差异有统计学意义（P＜0.05）。表明血清IL-6、IL-10、IL-17A、TNF-α表达水平与RA患者病情活动相关。

IL-6主要由单核-巨噬细胞、血管内皮细胞、Th2细胞、成纤维细胞产生，在炎症细胞因子网络和免疫调节网络具有关键性且多样的作用［2］。IL-17A由Rouvier发现并命名，属于IL-17细胞因子家族的标志性细胞因子，主要由Th17细胞、γδT细胞、NK细胞分泌，在TGF-β和IL-1β存在的情况下可诱导NKT细胞产生IL-17［5］。其能有效介导中性粒细胞动员的兴奋过程，从而有效介导组织的炎症反应。TNF-α是一种由巨噬细胞对细菌感染或其他免疫源反应产生的细胞因子，能杀伤和抑制肿瘤细胞，促进中性粒细胞吞噬，抗感染，促进细胞增殖和分化，是重要的炎症因子，并参与某些自身免疫病的病理损伤。研究表明，TNF-α抑制剂可明显降低患者疾病活动度，改善临床症状。本资料结果表明，IL-6、IL-17A、TNF-α表达水平在RA患者中明显升高。在活动期患者中，IL-6、IL-17A、TNF-α比缓解期患者明显升高。目前细胞因子抑制剂如IL-6抑制剂、TNF-α拮抗剂已应用于临床，并取得一定的疗效。IL-10由Th2细胞克隆分泌，是一种多细胞源、多功能的细胞因子，调节细胞的生长与分化，参与炎性反应和免疫反应，是目前公认的炎症与免疫抑制因子，研究表明IL-10与RA的疾病活动呈负相关［2］。但是，本资料结果表明活动期RA患者血清中IL-10明显高于缓解期患者，与文献报道结果不符，推测与本资料病例数较少有关，活动期与缓解期病例数相差较大。因此，IL-10与RA患者的相关性有待进一步扩大样本量后验证。本资料结果表明IL-6、IL-10、TNF-α的含量男性患者比女性患者明显升高，差异有统计学意义，而IL-2、IL-4、IL-17A、IFN-γ的含量与性别无关。IL-6、IL-10、TNF-α是炎症调节因子，在类风湿关节炎患者中，性别对炎症因子是有一定影响的。