黄裔程

(上海市中医医院检验科 200071)

原发性肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一，每年约38.3万例患者病死于肝癌，约占全世界病例的51%，其病死率也居我国恶性肿瘤致死原因的第2位[1]。原发性肝癌的发病率高、病死率高、复发率高，但早期无明显临床症状和体征，确诊时多为中、晚期，因此早期诊断、早期治疗对改善患者的生存和预后具有重要的临床意义。血清甲胎蛋白(AFP)作为肝癌诊断的首选标志物已广泛使用于临床，但单项实验室检查指标由于敏感性、假阴性、假阳性等因素，具有一定的局限性。本研究采用回顾性研究方法，分析原发性肝癌、代偿性肝硬化和健康体检者AFP、α-L-岩藻糖苷酶(AFU)、谷氨酰转肽酶(GGT)、D-二聚体(D-D)水平，探讨联合检测方案在肝癌诊断中的临床应用价值。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2016 年 1 月1日至12月31日该院住院诊治的原发性肝癌患者、代偿性肝硬化患者、门诊体检的健康体检者。原发性肝癌患者68例(肝癌组)，均符合中国抗癌协会肝癌专业委员会原发性肝癌的诊断标准，经病理组织学确诊，男57例，女11例，年龄35～82岁，平均年龄(55.0±9.5)岁。代偿性肝硬化(Child-Pugh分级为A级)患者79例(肝硬化组)，男64例，女15例，年龄33～78岁，平均年龄(51.0±9.1)岁。根据体检号随机抽取健康体检者70例(健康对照组)，男38例，女32例，年龄25～55岁，平均年龄(36.0±5.7)岁。

1.2仪器与试剂 AFP检测采用雅培i2000全自动免疫分析仪，化学发光微粒子免疫检测法，试剂为雅培公司AFP测定试剂盒。AFU检测和GGT检测均采用Beckman Coulter AU5821全自动生化分析仪，使用速率法，试剂分别为北京普瑞亚科技有限公司提供德国产AFU测定试剂盒和Beckman Coulter GGT测定试剂盒。D-D检测应用Sysmex CA-7000全自动凝血分析仪，采用免疫比浊法，试剂为Siemens公司生产的D-D试剂盒。

1.3方法 (1)标本采集：3组研究对象清晨空腹采集上臂静脉血3 mL。血清标本置于生化管离心15 min(3 000 r/min，离心半径15 cm)。血浆标本置于3.2%柠檬酸钠抗凝管，混匀，采集后2 h内离心15 min(3 000 r/min，离心半径15 cm)。标本均无溶血和脂血现象。(2)检测方法：AFP、AFU、GGT、D-D检测方法均严格参照试剂盒说明书。(3)指标参考值范围：AFP为0～8.78 ng/L，AFU为0～40 U/L，GGT为0～50 U/L，D-D为0～0.55 mg/L。AFP、AFU、GGT、D-D检测值高于参考值上限为阳性，任意1项条件满足为联合检测阳性。

2 结 果

2.13组研究对象各指标检测结果比较 肝癌组和肝硬化组4项指标均高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。肝癌组4项指标也均高于肝硬化组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

2.23组研究对象各指标单独和联合检测的阳性率结果比较 肝癌组和肝硬化组各指标单独和联合检测均高于健康对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。肝癌组各指标单独和联合检测也均高于肝硬化组，差异有统计学意义(P<0.05)。各组内联合检测的阳性率高于单项指标检测的阳性率，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表1 3组研究对象各指标检测结果比较

注：与健康对照组比较，*P<0.05；与肝硬化组比较，#P<0.05

注：与健康对照组比较，*P<0.05；与肝硬化组比较，#P<0.05；与单项检测比较，$P<0.05

2.3各指标单独和联合检测原发性肝癌的诊断效率结果比较 原发性肝癌患者各指标联合检测的敏感性和阴性预测值高于单项检测，差异有统计学意义(P<0.05)；但特异性、准确性、阳性预测值与单项检测比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表3。

表3 各指标单独检测和联合检测的诊断效率结果比较(%)

注：与单项检测比较，$P<0.05

3 讨 论

我国肝癌仍是发病率和病死率居高的恶性肿瘤，随着分子生物学和基因组学的进展，越来越多的肿瘤标志物被发现和应用于临床，为肿瘤早期诊断创造了条件。1种肿瘤标志物可以存在多个恶性肿瘤中，1种恶性肿瘤也可表达多个肿瘤标志物，因此仅凭1种肿瘤标志物难以满足诊断的高敏感性和高特异性。由于单个肿瘤标志物的诊断价值有限，故近年来越来越多的学者开始关注2种甚至更多种肿瘤标志物的联合监测，以提高筛查和诊断价值。进行联合检测的结果如能得到更多临床数据的支持，则可充分发挥现有肿瘤标志物的价值，也将成为未来血清学诊断的发展方向之一[2]。

AFP是一种糖蛋白，来源于胎儿的卵黄囊，出生后不久即消失。肝癌时癌细胞内AFP合成基因可被激活，产生和分泌AFP，因此AFP是目前公认的诊断肝癌的特异性指标。据有关研究报道，原发性肝癌中AFP单项检测的阳性率较低，其敏感性不能满足临床需求，同时在胃癌、肝硬化、慢性肝炎、妊娠女性都有过表达，易出现假阳性，所以单一AFP检测原发性肝癌易发生漏诊或误诊[3-4]。AFU是一种溶酶体酸性水解酶，存在于机体多个组织器官，肝脏的活性最高。AFU参与含岩藻糖基的糖蛋白、糖脂等生物活性大分子的分解代谢，与其他标志物联合检测原发性肝癌效果较好，尤其对小细胞肝癌患者具有诊断意义[5-6]。GGT主要来自肝胆系统，癌细胞侵袭周围肝组织，肝细胞内可溶性GGT进入血液，产生较高表达，但在肝内外胆道阻塞、胰腺疾病，以及多种肝病中均有表达，因此特异性较差。D-D是交联纤维蛋白的降解产物，主要反映纤维蛋白溶解功能[7]。癌细胞合成和分泌纤溶酶原激活物，使交联蛋白断裂形成D-D，因此恶性肿瘤的D-D都升高，是恶性肿瘤生长过程的特异现象。AFP、AFU、GGT、D-D 4项指标对原发性肝癌敏感性较高，并对疾病的治疗和预后判断具有一定的参考作用，多个不同的原发性肝癌联合检测方案选用了其中1项或多项指标，众多研究报道显示联合检测的敏感性和特异性优于单项检测，但较少报道选用这4项指标进行联合检测[3,8-12]。本研究结果表明，3组研究对象分别进行AFP、AFU、GGT、D-D 4项指标的单项和联合检测，差异有统计学意义(P<0.05)。肝癌组患者各单项指标的表达水平和阳性率最高，均高于肝硬化组和健康对照组(P<0.05)。肝癌组患者联合检测的阳性率也高于其他2组，且高于单项检测，联合检测的敏感性和阴性预测值也优于单项检测，差异均有统计学意义(P<0.05)。因此AFP、AFU、GGT、D-D 4项指标的联合检测优于单项检测，提高诊断的敏感性，减少漏诊和误诊。虽然肝硬化组患者4项单项指标有30%～60%的阳性表达，但联合检测的敏感性、特异性、准确性、阳性预测值、阴性预测值分别为64.6%、88.6%、75.8%、86.4%、68.9%，提示4项指标联合检测肝硬化组的敏感性、准确性、阴性预测值均较低，易造成漏诊和误诊，因此不适用于代偿性肝硬化。在表达阳性的肝硬化组患者中，4项指标的表达水平明显低于肝癌组(P<0.05)。敏感性、特异性、准确性、阳性预测值、阴性预测值都是基于定性，结合4项指标的定量水平，再结合病史、体检、影像学检查等，也有利于对早期原发性肝癌和代偿性肝硬化进行鉴别诊断。

综上所述，AFP、AFU、GGT和D-D在原发性肝癌中均高表达，联合检测更有利于提高检测的敏感性、特异性、准确性，互补作用较强，降低误诊和漏诊，且检测操作简便，因此4项指标的联合检测有利于原发性肝癌的早期诊断，为临床选择敏感性高、特异性强、优化合理的指标选择提供了实验室依据。

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