张永强,刘兰瑞,张 雁,李京华,赵凤芹,孙福强

(1.保定市疾病预防控制中心 结防科，河北 保定071000；2.保定市第五医院 外科)

据WHO统计，我国是全球22个结核病流行严重的高负担国家之一，结核病患病人数高居全球第2位，同时也是全球27个耐多药结核病流行严重的高负担国家之一，耐多药结核病患者的估计人数高居全球第1位[1]。而传统的诊断标准是抗酸杆菌染色法和结核分枝杆菌培养药敏法，抗酸染色法敏感度较差，阳性率低，固体培养药敏技术培养周期很长，延缓诊断和治疗。随着结核病实验室诊断技术的不断发展，新型的分子检测方法Xpert MTB/ RIF(利福平) 已经受到广泛关注。作为一种全新的结核病快速检测新方法，该方法既能检测结核分枝杆菌，又能确定是否对利福平耐药，本文采用Xpert MTB/ RIF技术检测1736份初诊疑似肺结核患者痰标本，用以探讨在结核病及耐药结核病诊断中的临床应用价值。报告如下。

1 对象与方法

1.1对象以2014.7-2016.6本地结核病定点医院1736例初诊疑似肺结核患者为研究对象，将初诊患者痰标本同时做涂片镜检、固体培养和XpertMtb/RIF检测。

1.2材料XpertMtb/RIF检测试剂(Cepheid，USA)；抗酸染色液、罗氏培养基(珠海贝索生物技术有限公司)

1.3方法

1.3.1痰涂片检查依据《中国结核病防治规划痰涂片镜检标准化手册》标准化操作执行。

1.3.2固体培养、比例法药敏依据《结核菌培养药敏标准化操作及质量保证手册》标准化操作执行。

1.3.3XpertMtb/RIF检测 取1 ml痰标本加入前处理管,视标本性状加入1-2倍标本体积的处理液,涡旋振荡15-30 s,静置15 min。打开反应盒,吸取2 ml处理后标本缓慢加入反应盒,放入检测模块,仪器自动检测并报告结果。

1.3.4统计学方法 将所有数据进行分析和统计学处理，采用EpiData 3.02建立数据库，应用SPSS13.0软件进行一般描述性分析和χ2检验。

2 结果

2.1XpertMtb/RIF对Mtb的检测

以固体培养结果为参考标准，涂片法检测Mtb的敏感度为79.81%(344/431)，特异度为99.25%(659/664)，XpertMtb/RIF检测Mtb的敏感度为98.61%(425/431)，特异度为99.55%(661/664)；两种方法的敏感度相比较，差异有显著性(χ2=79.08，P<0.01)，特异度相比较，差异无显著性(χ2=0.13，P>0.05)。详见表1。

表1 三种方法检测痰标本抗酸杆菌结果(以培养法为参考标准)

2.2XpertMtb/RIF对RIF的检测

以比例法药敏结果为参考标准， XpertMtb/RIF检测RIF的敏感度为97.92%(47/48)，特异度为99.81%(1045/1047)；见表2。

表2 XpertMtb/RIF检测利福平结果(以比例法药敏试验为参考标准)

3 讨论

结核病是严重危害人民呼吸健康的呼吸道传染病，被列为我国重大传染病之一，我国结核病占全球结核病发病人数的14.3%，始终位于甲乙传染病前列[2]。2007-2008年开展的全国结核病耐药性基线调查结果显示，我国肺结核患者中耐多药率为8.3%，据此估算，我国每年新发耐多药患者12万例，占全球每年新发总数的24.0%，位列全球第二位[3]。

结核病诊断的金标准是标本中发现结核分枝杆菌[4]，在痰标本中检出结核分枝杆菌是实验室检测的主要目的。而理想的结核菌检测技术应具有快速、准确、特异、敏感、方法简便的特点，这是长期以来研究的主要方向。2010年12月，WHO首次向国际社会推荐了一种被称为“Xpert MTB/RIF”的结核病和利福平耐药快速检测。这种被WHO结核病防控专家称为近百年来在结核病诊断领域具有“里程碑”意义的分子检测，能够在2个小时内，完成对结核杆菌和利福平耐药的同时甄别[5]。

本研究利用Xpert MTB/RIF技术进行检测，结果显示Xpert MTB/RIF检测法的敏感度明显高于涂片法，差异有显著性，能提高结核菌的阳性检出率，与培养法有较好的一致性，一致率为99.18%[(425+661)/1095]，与李妍等[6]的相关报道一致，并且能大大提高涂阴患者的诊断；Xpert MTB/RIF检测利福平耐药的灵敏度和特异度均达到95%以上，与比例法药敏实验有较好的一致性，一致率为99.73%[(47+1045)/1095]，与李辉等[7]的相关报道一致；丁秀秀等[8]研究表明，利福平耐药患者81.6%为耐多药结核病患者，可作为耐多药患者的初步判断。

借助Xpert MTB/RIF检测，可实现对结核和利福平耐药的同时诊断。Xpert MTB/RIF检测将耐药结核的诊断时间从原来的2-3个月，缩短到2个小时之内，既方便了临床治疗，同时也减少了患者可能造成的人群感染的风险。Xpert MTB/RIF高效、快速，有很高的灵敏性和特异性，应用于结核病患者检查，对基层医疗单位早期诊断结核病及耐药结核病，控制结核病流行传播具有重要意义。

参考文献：

[1]张贺秋，赵雁林.现代结核病诊断技术[M].1版,北京：人民卫生出版社，2013：5.

[2]王黎霞.中国结核病防治工作现状分析[J].中国公共卫生,2012,28(4):413.

[3]肖东楼.全国结核病耐药性基线调查报告(2007-2008年)[M].1版,北京：人民卫生出版社，2010：30-37.

[4]吴敏,张丽霞.结核菌实验室诊断研究进展[J].国际检验医学杂志,2016,37(4):519.

[5]赵冰,欧喜超,夏 辉.XpertMtb/RIF检测技术在结核病诊断中的应用评价[J].中国防痨杂志,2014，36(6)：462.

[6]李 妍,张天华,鲜小萍,等.Xpert MTB/RIF技术在MTB检测中的应用价值[J].检验医学,2016,31(1):52.

[7]李 辉，谭耀驹，李洪敏,等.利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术的诊断效果对比研究[J].中国防痨杂志,2014,36(6):472.

[8]丁秀秀，谭守勇，谭耀驹,等.噬菌体法检测利福平耐药在耐多药肺结核中的应用价值[J].实用医学杂志,2012，28(24)：4088.