李辉明

（青海省同仁县畜牧兽医工作站，青海同仁 811399）

阿苯达唑治疗牦牛消化道线虫的抗药性检测

李辉明

（青海省同仁县畜牧兽医工作站，青海同仁 811399）

为了解牦牛主要消化道线虫对阿苯达唑的抗药性。方法：采用粪便虫卵减少试验，将60头供试牛随机分为4组，每组15头。第1组为阿苯达唑片剂5mg/kg剂量组，第2组为10mg/kg剂量组，第3组为15mg/kg剂量组。第4组为阳性对照组。按照分组对试验牛逐头称重，编号，记录，1～3组试验牦牛分别按5、10、15mg/kg剂量经口投服阿苯达唑片剂。第4组为阳性对照组试验牛给予安慰剂。给药前1d和给药后7d和14d各组试验牛逐头直肠采粪，采用饱和盐水漂浮法进行实验室检查，统计消化道线虫1g粪便中的虫卵数（EPG）。根据投药后7d和投药后14d EPG的变化情况，奥斯特线虫试验组7d的虫卵减少率为86.5%，90.4%，100%，14d的虫卵减少率89.2%，93.7%，97.0%；马歇尔线虫试验组7d的虫卵减少率为73.1%，96.2%，94.5%，14d的虫卵减少率为84.9%，98.0%，100%；细颈线虫试验组7d的虫卵减少率为83.2%，90.4%，93.8%，14d的虫卵减少率为81.5%；93.3%；95.1%。结论：根据实验数据得出奥斯特线虫和细颈线虫对阿苯达唑产生了抗药性；马歇尔线虫对阿苯达唑未产生抗药性。

牦牛 阿苯哒唑 抗药性 消化道线虫 虫卵减少实验

目前，寄生虫的防治工频繁使用单一驱虫药，使得寄生虫对该驱虫药产生了抗药性，导致寄生虫的防治愈发困难。苯并咪唑是一类广谱驱虫药，这些药物具有交叉抗药性，阿苯哒唑是属于该类药物的一种，具有低毒、广谱、高效、价廉等优点，在各类动物和人体驱虫上都有广泛的应用，国外许多国家由于使用频繁，使寄生虫对该药已经产生了非常明显的抗药性。在药物的使用方式上有许多养殖户在推荐剂量5～15mg/kg的基础上，将使用剂量提高了5～10倍，甚至更高，但是效果不佳。

消化道线虫抗药性的检测，传统上经常运用粪便虫卵减少实验（FECR）进行检测，但是这种方法因为干扰因素太多，使检查结果对寄生虫是否产生了抗药性这一问题，并不能很好的说明。而饱和盐水漂浮法实验是使用分析纯的试剂以及实验室实验技术进行检测，因此其检测结果是唯一的，这种方法是由世界兽医寄生虫学促进协会推荐检测的方法，其他检测技术经过相关检索的报道，通过试验，在我国首次利用实验室检测技术证实了绵羊消化道线虫对阿苯哒唑产生了抗药性，这在实验室检测技术和生产实际上均有着一定的现实意义。

按照世界兽医寄生虫学促进协会（WAACP）制订的参数，对绵羊感染的奥斯特线虫，马歇尔线虫，和细颈线虫，通过饱和盐水漂浮法实验进行了检测，实验结果显示：绵羊感染的消化道寄生虫，特别是细颈线虫对阿苯哒唑产生了抗药性，而且从实验结果的数据分析可反映出有些已产生了相当严重的抗药性。

通过饱和食盐水漂浮法实验利用阿苯达唑分析纯试剂对绵羊体内寄生的消化道线虫抗药性进行检测，检测结果通过统计分析显示牦牛感染的消化道线虫，特别是奥斯特线虫，马歇尔线虫，和细颈线虫对阿苯哒唑类药物产生了相当严重的抗药性。

为调查青海同仁地区牦牛主要消化道线虫对阿苯达唑的抗药性现状，我们选用阿苯达唑片剂，按照世界兽医寄生虫学促进协会（WAACP）制订的方法和判定标准，进行了本项试验，现报告如下：

1 材料与方法

1.1 试验地区概况

同仁县因地处青藏高原腹地，隶属于青海省黄南藏族自治州同仁县土地总面积3275km2，最高海4767m，最低海拔2160m，年平均气温5.6℃，相对高差2067m年降水量约在401.4mm左右，属典型的高原大陆性气候。瓜什则乡地处同仁县东南部，3个纯牧业乡之一。有草场4万hm2，属山地草甸类草场，是天然的优良牧场。有牲畜12万头（只、匹），牲畜总数占全县牲畜数的24%。

1.2 试验时间

2016年3月-5月。

1.3 试验药物

阿苯达唑片剂，西宁丰源农牧科技有限公司生产，规格：100mg/片，生产批号：20160107。经青海省饲料兽药监察所检验合格。

1.4 试验动物

在青海省同仁县瓜什则乡郭进村，从7个月未经任何药物驱虫的牦牛中。经粪便虫卵检查，选出自然感染消化道线虫较高的60头牦牛供试。

1.5 试验方法

1.5.1 分组

将60头供试牛随机分为4组，每组15头。第1组为阿苯达唑片剂5mg/kg剂量组，第2组为10mg/kg剂量组，第3组为15mg/kg剂量组。第4组为阳性对照组。

1.5.2 给药

按照分组对试验牛逐头称重，编号，记录，1～3组试验牛分别按5、10、15mg/kg体重剂量经口投服阿苯达唑片剂。第4组为阳性对照组试验牛给予安慰剂。

1.5.3 粪便虫卵检查

给药前1d和给药后7d和14d各组试验牛逐头直肠采粪，采用饱和盐水漂浮法进行实验室检查，统计消化道线虫1g粪便中的虫卵数（EPG）。

1.5.4 效果判定

根据投药前和投药后EPG的变化情况，按以下公式计算各试验组的虫卵减少率。依据结果判定是否产生抗药性。

虫卵减少率= 投药前虫卵EPG-投药后虫卵EPG/投药前虫卵EPG×100%

2 结果

依据粪检结果，实验牦牛感染的消化道线虫主要有奥斯特线虫、马歇尔线虫、细颈线虫。

2.1 奥斯特线虫粪检虫卵结果

奥斯特线虫粪检虫卵减少情况统计结果见表1、2。由表1、2可知，给药后7d和14d阿苯达唑片剂5mg/kg剂量组对试验牦牛自然感染奥斯特线虫虫卵减少率分别为86.5%和89.2%；10mg/kg剂量组对实验牦牛自然感染奥斯特线虫虫卵减少率分别为90.4%和93.7%；15mg/kg剂量组对实验牦牛自然感染奥斯特线虫虫卵减少率分别为100%和97.0%；阳性对照组检查，粪便虫卵数无明显变化。

表1 阿苯达唑给药前后奥斯特线虫粪检虫卵数（EPG）统计结果

表2 阿苯达唑对奥斯特线虫的减少率统计结果

2.2 马歇尔线虫粪检虫卵结果

马歇尔线虫粪检虫卵减少情况统计结果见表3、4。由表3、4可知，给药后7d和14d的检查，阿苯达唑片剂5mg/kg剂量组对实验牦牛自然感染马歇尔线虫虫卵减少率分别为73.1%和84.9%；10mg/kg剂量组对实验牦牛自然感染马歇尔线虫虫卵减少率分别为96.2%和98.0%；15mg/kg剂量组对实验牦牛自然感染马歇尔线虫虫卵减少率分别为94.5%和100%；阳性对照组检查，粪便虫卵数无明显变化。

表3 阿苯达唑给药前后马歇尔线虫粪检虫卵数（EPG）统计结果

表4 阿苯达唑对马歇尔线虫的减少率统计结果

2.3 细颈线虫粪检虫卵结果

细颈线虫粪检虫卵减少情况统计结果见表5、6。由表5、6可知，给药后7d和14d的检查，阿苯达唑片剂5mg/kg剂量组对实验牦牛自然感染细颈线虫虫卵减少率分别为86.2%和81.5%；10mg/kg剂量组对实验牦牛自然感染细颈线虫虫卵减少率分别为90.4%和93.3%；15mg/kg剂量组对实验牦牛自然感染细颈线虫虫卵减少率分别为93.8%和95.1%；阳性对照组检查，粪便虫卵数无明显变化。

表5 阿苯达唑给药前后细颈线虫粪检虫卵数（EPG）统计结果

表6 阿苯达唑对细颈线虫的减少率统计结果

3 结果分析

粪检结果表明，阿苯达唑片剂5mg/kg剂量组给药后7d和14d奥斯特线虫粪检虫卵减少率分别为86.5%和89.2%；10mg/kg剂量组给药后7d和14d虫卵减少率分别为90.4%和93.7%；15mg/kg剂量组给药后7d和14d虫卵减少率分别为100%和97.0%。阿苯达唑片剂5mg/kg剂量组给药后7d和14d马歇尔线虫粪检虫卵减少率分别为73.1%和84.9%；10mg/kg剂量组给药后7d和14d虫卵减少率分别为96.2%和98.0%；15mg/kg剂量组给药后7d和14d虫卵减少率分别为94.5%和100%。阿苯达唑片剂5mg/kg剂量组给药后7d和14d细颈线虫粪检虫卵减少率分别为86.2%和81.5%；10mg/kg剂量组给药后7d和14d虫卵减少率分别为90.4%和93.3%；15mg/kg剂量组给药后7d和14d虫卵减少率分别为93.8%和95.1%。阳性对照组检查，粪便虫卵数无明显变化。根据（WAAVP）推荐的虫卵减少百分率95%的判定标准来判定虫体是否产生了抗药性，虫卵减少率＞95%的没有产生抗药性，虫卵减少率=95%的为抗药性可疑，虫卵减少率＜95%的产生了抗药性。本次试验结果得出奥斯特线虫和细颈线虫对阿苯达唑产生了抗药性；马歇尔线虫对阿苯达唑未产生抗药性。

4 建议

总结以上得出，线虫的抗药性是一个十分复杂的问题，虽然我国对这方面报道很少，但是在使用驱虫药后驱虫效果不佳，我们应该引起注意。因此，在防治线虫病时，必须合理应用现行有效的驱虫药，注意不同类型的药物进行交替使用，保障足够的剂量，做到用极少的驱虫药，使寄生虫的防治达到有效的水平和维持家畜较高的生产力，以防止和延迟线虫抗药性的形成。通过建立寄生虫的抗药性检测技术，可以及时了解消化道线虫的抗药性情况，根据检测的结果制定相应的应对措施，从而进行合理给药，避免产生抗药性，有效促进畜牧业发展做出贡献，是我国畜牧业生产力的提高，对畜牧业疾病防治提供帮助。