多 甜，张 超，赵晓进，李 莉，裴 超，吕爱军

( 河南师范大学 水产学院，河南 新乡 453007 )

多 甜，张 超，赵晓进，李 莉，裴 超，吕爱军

( 河南师范大学 水产学院，河南 新乡 453007 )

鱼诺卡氏菌；诺卡氏菌病；结节病

诺卡氏菌(Nocardiasp.)是一种革兰氏阳性丝状杆菌，具有抗盐、碱,耐干旱的特点，广泛分布于土壤、水体、空气、腐烂植物和动物粪便中[1-2]。该菌为条件致病菌，其中某些种类为人畜共患[1]。目前，已发现鱼诺卡氏菌(N.seriolae)、星状诺卡氏菌(N.asteroids)、杀鲑诺卡氏菌(N.salmonicida)和粗形诺卡氏菌(N.crassostreae)对鱼类具有致病性[1,3]。鱼诺卡氏菌是鱼类诺卡氏菌病的主要病原，多数为腐生，少数营寄生[4]。水产养殖动物一旦感染该菌，患病周期长、治愈率低、累积死亡率高，给我国的加州鲈(Microperussalmoides)、乌鳢(Channaargus)等特种水产养殖业造成了极大的经济损失[1,5]。笔者综述了鱼诺卡氏菌的国内外研究概况，旨在为该病的有效防控提供参考。

1 分类与命名

Shimahara等[9-11]对鱼诺卡氏菌台湾分离株和日本分离株进行了表型和基因型研究，发现台湾分离株多呈现α-葡糖苷酶阳性，日本分离株多呈阴性，酶切电泳图谱表现出丰富的基因多样性。满其蒙等[12]对15株鱼诺卡氏菌进行系统聚类分析发现，这些菌株聚成不同的亚群。以上结果都表明鱼诺卡氏菌具有多种表型和基因型，其分型与地域差异与宿主关系不大。Ismail等[13]研究发现，α-葡糖苷酶阳性菌株对盐酸土霉素有抗性，对红霉素敏感，而α-葡糖苷酶阴性菌株对盐酸土霉素敏感，绝大部分(97.9%)对红霉素有抗性；抗盐酸土霉素菌株都含有四环素耐药基因tet(K) 或tet(L)，抗红霉素菌株都含有大环内酯类抗性基因mef(A) 和 msr(D)，设想从α-葡糖苷酶活性和药敏特性之间的关系来区分流行株的表型。

2 生理生化特性

2.1 培养特性

2.2 生理生化特征

菌株过氧化氢酶、硝酸盐还原和七叶苷水解呈阳性，氧化酶、脲酶生产、明胶液化和淀粉水解呈阴性，酪蛋白、腺嘌呤、弹性蛋白、次黄嘌呤、黄嘌呤和酪氨酸分解试验呈阴性，α-葡糖苷酶测试呈阳性或呈阴性[5,9]。可以利用柠檬酸作为唯一碳源生长，阿拉伯糖、山梨醇和鼠李糖不能作为唯一碳源[5,14,18]。4%的NaCl条件下不能生长，45 ℃或50 ℃存活不超过8 h[5]。

3 临床症状

加州鲈、乌鳢、大黄鱼(Pseudocisenacrocea)、五条、鲻鱼(Mugilcephalus)、条纹鲈(Moronesaxatilis)、红鳍笛鲷(Lutjanuserythropterus)、石斑鱼(Epinephelussp.)、布氏鲳鲹(Trachinotusblochii)、金钱鱼(Scatophagusargus)、海鲈(Lateolabraxjaponicas)、褐牙鲆、卵形鲳鲹(T.ovatus)、花身(Teraponjarbua)等均为易感鱼类[9,19-22]。春末秋初，水温升至约22 ℃时易发病，病原主要通过口腔、鳃或创伤感染[5-6,23]。病鱼发病初期仅表现为反应迟钝、食欲下降、靠于池塘边沿，随着病情加重，体表变黑、腹部膨大、鳍条充血，心脏、脾脏、肾脏、肝脏等内脏器官出现直径1～5 mm的白色结节，有的病鱼鳃盖内缘或鳃丝上出现结节，腹腔内有纤维瘤[6,24]。患鱼诺卡氏菌病的鱼易继发迟钝爱德华氏菌(Edwardsiellatarda)或气单胞菌(Aeromonassp.)感染，加速死亡[25]。王国良等[26]研究发现网箱大黄鱼自然发病的平均死亡率为15%，注射和浸泡感染有致病性，口服不能致病，说明自然状态下该菌通过损伤或鳃部感染的几率较大，而通过饵料感染的几率较小。袁思平等[14]研究发现养殖鱼类感染鱼诺卡氏菌的自然发病率为15%～30%，严重的可达60%，而人工感染的死亡率高达90%以上[7]。

4 致病机理

病变器官都是与血液循环有密切联系的器官，说明该菌通过血液循环到达各个器官，这些器官是鱼类进行物质代谢、消化吸收、排泄和免疫等生理活动的主要器官，组织器官损伤致使酶活力发生显著变化，影响水产养殖动物正常的生理代谢，导致机体贫血，营养不良，免疫力下降[28]。孙东雨等[6,29]研究了鱼诺卡氏菌对乌鳢血液指标的影响，乌鳢感染诺卡氏菌后，初期血液中的血细胞数量激增，而随着感染的延续，鱼体造血机能受到抑制，肾脏、脾脏等贮血器官遭到破坏，血液中新生红细胞比例减少，血细胞趋于老化，导致了鱼类血细胞数量显著下降、血细胞脆性上升，非特异性免疫受到抑制。另外，感染乌鳢血清中各种酶活力均发生了显著的变化，说明病鱼的肝脏、肾脏、心脏、脾脏等主要器官严重损伤，营养物质代谢、免疫等方面的正常功能受到了严重损害[6]。

5 检测与防治

5.1 检测

利用PCR技术，以16S rDNA为模板，采用通用引物或特异性引物扩增目的片段，进行基因测序，能够有效检测该菌[30]。基于16S～23S rDNA基因内转录间隔区的环介导恒温基因扩增检测法比普通PCR更敏感，该方法更加省时省力，既能检测到有临床症状的鱼，又能检测到隐性感染的鱼，为早治疗提供了依据[5,31-33]。王国良等[34]建立了鱼诺卡氏菌的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法，该方法具有特异、敏感等优点，亦可用于病原的早期检测。

5.2 药物治疗

5.3 预防

全肽聚糖是一种免疫增强剂，彭程远等[29]研究表明,鱼诺卡氏菌WPG腹腔注射免疫21 d以上对乌鳢诺卡氏菌病有明显的保护作用。疫苗是预防传染病的有效方法，Shimahara等[39]采用鱼诺卡氏菌福尔马林全菌灭活苗免疫加州鲈，检测到鱼体的抗体滴度有明显升高，但是免疫保护率较低(<20%)。采用同属近缘种N.soli、N.fluminea和N.uniformis作为活疫苗免疫五条，弱毒鱼诺卡氏菌株攻毒，表现出一定的免疫保护作用(相对免疫保护率65.4%)[40]。牛分枝杆菌(Mycobacteriumbovis)卡介苗是一种减毒活疫苗，对哺乳动物的多种传染病(包括诺卡氏菌病)具有免疫保护作用，Kato等[41]发现卡介苗能够诱导褐牙鲆产生非特异性免疫应答，鱼诺卡氏菌攻毒后，免疫保护率达78.6%。

6 基因组学

7 展 望

[2] Bennur T, Kumar A R, Zinjarde S, et al. Nocardiopsis species: incidence, ecological roles and adaptations[J]. Microbiological Research, 2015(174):33-47.

[3] 陈言峰，范祖游，王子涛，等. 水产动物诺卡氏菌病防控技术的研究进展[J]. 安徽农业科学，2015，43(13)：170-172.

[4] 王国良，袁思平，金珊. 大黄鱼结节病病原菌—诺卡氏菌的鉴定及其系统发育分析[J]. 中国水产科学， 2006，13(3)：410-414.

[5] Wang G L, Xu Y J, Jin S, et al. Nocardiosis in snakehead,OphiocephalusargusCantor[J]. Aquaculture, 2007, 271(1):54-60.

[6] 孙东雨，沈理，金珊，等.鱼诺卡氏菌对乌鳢血液指标的影响[J]. 基因组学与应用生物学，2012， 31(3)：289-294.

[7] Kubota S, Karita T, Nakamura Y, et al. Nocardial infection in cultured yellowtails (SeriolaquinqueruiataandS.purpurascens) Ⅰ. Bacteriological study [J]. Fish Pathology, 1968, 3(1):16-23.

[8] Kudo T, Hatai K, Seino A.Nocardiaseriolaesp. nov. causing nocardiosis of cultured fish[J]. International Journal of Systematic Bacteriology, 1988, 38(2):173-178.

[9] Shimahara Y, Huang Y F, Tsai M A,et al. Genotypic and phenotypic analysis of fish pathogen,Nocardiaseriolae, isolated in Taiwan[J]. Aquaculture, 2009, 294(3):165-171.

[10] Shimahara Y, Nakamura A, Chen S C, et al.Enzymatic profiles of the bacterial fish pathogen,Nocardiaseriolae, analyzed by the RapID Yeast Plus System[J]. Bulletin of the Faculty of Agriculture, Miyazaki University, 2008(54):39-45.

[11] Shimahara Y, Nakamura A, Nomoto R, et al. Genetic and phenotypic comparison ofNocardiaseriolae, isolated from fish in Japan[J]. Journal of Fish Diseases, 2008, 31(7):481-488.

[12] 满其蒙，冯娟，区又君，等. 15株鱼源致病性鲫鱼诺卡氏菌的聚类分析[J]. 南方水产科学，2013，9(5)：86-92.

[13] Ismail T F, Takeshita A, Umeda N, et al. Application of α-glucosidase activity and drug susceptibility tests to epidemiological studies on the fish pathogenNocardiaseriolae[J]. Fisheries Science, 2011, 77(1):113-118.

[14] 袁思平，王国良，金珊. 养殖鱼类致病诺卡氏菌研究进展[J]. 微生物学通报，2006，33(2)：137-141.

[15] 夏立群，王蓓，夏洪丽，等.鱼诺卡氏菌培养条件及培养基的优化[J]. 南方水产科学，2013，9(3)：51-56.

[16] Shimahara Y, Huang Y F, Li Y L, et al. Growth characteristics and morphological changes of fish pathogenNocardiaseriolaein submerged culture[J]. Aquaculture Science, 2010, 58 (3):429-431.

[17] 彭程远，解俊，王锡波，等.鱼诺卡氏菌全肽聚糖的提取及鉴定[J]. 宁波大学学报：理工版， 2015，28(1)：21-24.

[18] Wang G L, Yuan S P, Jin S. Nocardiosis in large yellow croaker,Larimichthyscrocea(Richardson)[J]. Journal of Fish Diseases, 2005, 28(6):339-345.

[19] Chen S, Lee J, Lai C, et al. Nocardiosis in sea bass,Lateolabraxjaponicus, in Taiwan[J]. Journal of Fish Diseases, 2001, 23(5):299-307.

[20] Lee D C, Cho M Y, Park S I. A review of nocardial infection in fishes[J]. Journal of Fish Pathology, 2007, 20(1):1-23.

[21] 满其蒙，徐力文，区又君，等.鱼诺卡氏菌感染卵形鲳鲹的组织病理学研究[J].广东农业科学，2012，39(21)：132-135.

[22] Wang P C, Chen S D, Tsai M A, et al.Nocardiaseriolaeinfection in the three striped tigerfish,Teraponjarbua(Forsskål)[J]. Journal of Fish Diseases, 2009, 32(4):301-310.

[23] Itano T, Kawakami H, Kono T, et al. Estimation of the time forNocardiaseriolaeinfection of cultured yellowtail[J]. Fish Pathology, 2008, 43(2):86-88.

[24] Labrie L, Ng J, Tan Z, et al. Nocardial infections in fish: an emerging problem in both freshwater and marine aquaculture systems in Asia[G]//Bondad-Reantaso M G, Mohan C V, Crumlish M, et al. Diseases in Asian aquaculture Ⅵ, Manila: Fish Health Section, Asian Fisheries Society, 2008:297-312.

[25] 唐绍林，雷燕，戚瑞荣，等. 海水鱼诺卡氏菌病的流行特点和防治[J]. 海洋与渔业：水产前沿，2015(5)：79-80.

[26] 王国良，袁思平，金珊. 网箱养殖大黄鱼诺卡氏菌病的初步研究[J]. 水产学报，2006，30(1)：103-107.

[27] 王玉群，骆豫江，张华，等. 加州鲈烂身、内脏白点病(诺卡氏菌病)的治疗[J]. 科学养鱼， 2010(10)：79.

[28] 安树伟，袁思平，王国良. 患诺卡氏菌病的大黄鱼几种主要组织的酶活力变化分析[J]. 渔业科学进展，2012，33(2)：43-48.

[29] 彭程远，解俊，金珊，等.鱼诺卡氏菌全肽聚糖对乌鳢非特异性免疫力的影响[J]. 动物营养学报， 2013，25(9)：2150-2159.

[30] Miyoshi Y，Suzuki S. A PCR method to detectNocardiaseriolaein fish samples[J]. Fish Pathology, 2003, 38(3):93-97.

[31] Itano T, Kawakami H, Kono T, et al. Detection of fish nocardiosis by loop-mediated isothermal amplification[J]. Journal of Applied Microbiology, 2006, 100(6):1381-1387.

[33] 王国良, 刘璐, 徐益军. 鱼类致病鱼诺卡氏菌(Nocardiaseriolae)的LAMP检测技术建立与应用[J]. 海洋与湖沼, 2011, 42(1):27-31.

[34] 王国良, 刘璐, 李思源.鱼诺卡氏菌SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用[J]. 水产学报，2012，36(4)：377-378.

[35] 彭开松，佘锐萍，祁克宗，等. 暗纹东方鲀脂肪肝并发诺卡氏菌病[J]. 水产科学，2008，27(12)：629-632.

[36] Wang P C, Tsai M A, Liang Y C, et al.Nocardiaseriolae, a causative agent of systematic granuloma in spotted butterfish,Scatophagusargus, Linn[J]. African Journal of Microbiology Research, 2014, 8(38): 3441-3452.

[37] Imajoh M, Sukeda M, Shimizu M, et al. Draft genome sequence of erythromycin- and oxytetracycline-sensitiveNocardiaseriolaestrain U-1(NBRC 110359)[J]. Genome Announcements, 2016, 4(1):e01606-e01615.

[38] Itano T, Kawakami H. Drug susceptibility of recent isolates ofNocardiaseriolaefrom cultured fish[J]. Fish Pathology, 2002, 37(3):152-153.

[39] Shimahara Y, Huang Y F, Tsai M A, et al. Immune response of largemouth bass,Micropterussalmoides, to whole cells of differentNocardiaseriolaestrains[J]. Fisheries Science, 2010, 76(3): 489-494.

[40] Itano T, Kawakami H, Kono T, et al. Live vaccine trials against nocardiosis in yellowtailSeriolaquinqueradiata[J]. Aquaculture, 2006, 261(4):1175-1180.

[41] Kato G, Kondo H, Aoki T, et al.MycobacteriumbovisBCG vaccine induces non-specific immune responses in Japanese flounder againstNocardiaseriolae[J]. Fish & Shellfish Immunology, 2012,33(2):243-250.

AReviewofResearchProgressofNocardiaseriolae

DUO Tian, ZHANG Chao, ZHAO Xiaojin, LI Li, PEI Chao, LÜ Aijun

( College of Fisheries, Henan Normal University, Xinxiang 453007, China )

Nocardiaseriolae; nocardiosis; granulomtous lesion

10.16378/j.cnki.1003-1111.2017.03.023

S941.99

C

1003-1111(2017)03-391-04

2016-06-16；

2016-09-12.

河南省重点科技攻关计划项目(142102110146)；河南师范大学博士科研启动金资助项目(qd13052)；河南师范大学国家级项目培育基金资助项目(2014).

多甜(1993-)，女，硕士研究生；研究方向：水产动物健康养殖. E-mail：15237355832@163.com.通讯作者：张超(1981-)，男，副教授，博士；研究方向：水产动物病害与防控. E-mail：shandongneau@aliyun.com.