●唐媛媛

临床血液检验中的两种不同细菌鉴定法的应用

●唐媛媛

目的：探索在临床血液检验中两种不同细菌鉴定方法的应用。方法：随机选取我院在2015年2月至2017年2月间就诊的480例发烧合并全身感染的患者血液标本进行细菌阳性鉴定，对标本同时使用直接药敏试验和常规药敏试验方法进行细菌检测，对两种鉴定方法的药敏试验结果与敏感度进行统计分析。结果：480份血液标本中，有412份经检测为阳性，两种鉴定方法对药物耐药性、敏感度及中度敏感的符合率差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论：直接药敏试验与常规药敏试验符合率较高，是临床常用的检测手段，但鉴于直接药敏试验报告时间短，操作简便，耗材少，结果准确，在临床上更为常用。

血液检验；细菌鉴定；直接药敏试验；常规试验

自上世纪初抗生素发明以来，细菌感染和致病微生物感染类疾病的发病率逐年下降。但进入二十世纪后，在我国患者中抗生素使用率高达70%，随之而来的抗生素滥用使病菌耐药性及对抗生素敏感性发生了变化，因此，细菌鉴定法的正确选择有利于疾病的诊断，提高检验工作者的效率[1]。本文就两种不同鉴定法在临床血液检验中的应用进行分析。

1 资料与方法

1.1 一般资料

480例发烧合并全身感染的患者血液样本进行细菌阳性鉴定，在无菌操作方式下对患者发热初期或发热高峰期采集血液，每人采集30ml，只采集一次，样本需冷藏保存，并及时送到检验科鉴定。以上患者注意排除其他血液系统疾病；入院前未服用药物或进行过相关治疗；患者凝血功能正常。

1.2 研究方法

把采集到的样本进行直接药敏试验和常规药敏试验，对两种检测结果进行统计分析。

1.2.1 常规药敏试验

把采集的阳性血液样本分别接种到巧克力平板、麦康凯平板和血平板上，要求温度达到35℃、浓度达到5%的CO2下孵育20h至24h，然后取出菌落涂片并对其进行革兰氏染色镜检，根据检测结果选择相应的酶。用Walk-away4.0系统进行药敏试验与鉴定。

1.2.2 直接药敏试验

将血液样本置于Bactec9240系统中自动培养与鉴定，当出现阳性结果后，用无菌注射器抽取10ml样品，置入无菌试管中，对细菌进行密度梯度离心分离，要求速度为1700r/min，时间为5min收集上清液，再次以3000r/min，离心15min后去除上清液，用PBS洗涤两次沉淀，再重悬。取20µl悬液涂片，然后进行革兰氏染色镜检，在显微镜下倒着放置观察。若出现链状的革兰阳性菌选择MH+6%的羊血的血平板进行初次药敏试验。根据检测结果选择相应的酶，菌落浓度要求控制到6.2×108cfu/L后将其在NC21药敏综合板上接种，并进行药敏试验与鉴定。除真菌外的一般菌种取1至3滴悬液接种到MH平板上，用无菌试纸将其涂抹均匀，将合适的药敏纸片贴到板上,用2005NCCLSI标准对其耐药性和敏感性进行检测。

1.3 统计学分析

用SPSS18.0统计学软件分析，定性资料组间比较采用χ2检验，p＜0.05作为差异具有统计学意义。

2 结果

表1 两种检测方法药敏试验结果与敏感度比较

480份血液标本中共检测出412份阳性样本，G-球菌和G+杆菌的耐药、敏感、中度敏感符合率分别是97.47%、95.65%、90.48%和94.69%、97.55%、91.19%，组间比较差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

3 讨论

在临床上抗生素的使用是十分普遍的，在细菌感染类疾病得以控制的同时，抗生素滥用也变得广泛起来，随之而来的是细菌耐药性和敏感性的变化，给临床检验工作带来新的挑战，增加了患者疾病确诊的等待时间，甚至错过最佳治疗时间，因此菌种的及时确定及药敏试验的快速合理选择可以说是疾病治愈的关键[2]。

细菌耐药性的增加，引起败血症、菌血症等疾病发生率也不断增加，血液系统疾病患者病死率逐年上升，快速、有效、合理的检测细菌种类成为临床治愈疾病的关键，近些年来，临床上应用比较广泛的细菌鉴定方法主要有镜检、常规检验、直接药敏试验、血清学凝集试验等，药敏试验原理是不同细菌对抗菌药物敏感性不同来确定的[3]。

本研究采用的是直接药敏试验和常规药敏试验对480份血液样品进行检测，结果显示两种方法检测阳性样本药敏试验总符合率比较差异无统计学意义（P＞0.05），结果表明直接法能够替代常规药敏试验，而且直接法易操作，时间短，耗材少，更适合应用于临床检验中。

（作者单位：潍坊市第二人民医院）

[1]孙捷民.临床血液检验中的两种不同细菌鉴定法的应用[J].山东医学高等专科学校学报,2013,35(6):456-458.

[2]李祖新.临床血液检验中的两种不同细菌鉴定法应用分析[J].中外医疗,2013,32(6):185-186.

[3]杨化芹.临床血液检验中的两种不同细菌鉴定法应用分析[J].中国医药指南,2014(24):108-109.