王立坤，杨占清，张 军，杨瑞敏，武雪亮，史 丽，王义成△

(1.河北北方学院附属第一医院超声医学科，河北张家口 075000；2.河北省张家口市保县中医院内科 076650；3.河北省张家口市桥西区人民医院内科 075000；4.河北北方学院附属第一医院血管腺体外科，河北张家口 075000；5.河北北方学院附属第一医院内分泌科，河北张家口 075000)

论著·临床研究

2型糖尿病患者血清抵抗素、瘦素、脂联素水平与微血管病变的关系

王立坤1，杨占清2，张 军3，杨瑞敏1，武雪亮4，史 丽5，王义成1△

(1.河北北方学院附属第一医院超声医学科，河北张家口 075000；2.河北省张家口市保县中医院内科 076650；3.河北省张家口市桥西区人民医院内科 075000；4.河北北方学院附属第一医院血管腺体外科，河北张家口 075000；5.河北北方学院附属第一医院内分泌科，河北张家口 075000)

目的 探讨2型糖尿病患者血清抵抗素、瘦素、脂联素水平与微血管病变的关系。方法 选择河北北方学院附属第一医院2型糖尿病患者(T2DM)120例，根据是否伴微血管病变，分为无微血管病变组(NON-MAP)60例和微血管病变组(MAP)60例，另选取健康体检人群(NC)60例，采取酶联免疫吸附试验(ELISA)测定各组空腹抵抗素、瘦素、脂联素水平，并测定各组的空腹血糖、胰岛素和血脂水平，用胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)评价胰岛素抵抗。结果 MVP组及NON-MVP组患者血清抵抗素、瘦素、游离脂肪酸(FFA)及超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平均显著高于NC组，而脂联素明显低于NC组，差异有统计学意义(P<0.05)；相关分析表明T2DM患者血清抵抗素、瘦素水平与hs-CRP、淳离脂肪酸(FFA)、HOMA-IR、三酰甘油(TG)呈正相关(P<0.05)，与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)呈负相关(P<0.05)；脂联素水平与hs-CRP、FFA、HOMA-IR、TG呈负相关,与HDL-C呈正相关(P<0.05)；血清抵抗素、瘦素水平呈明显正相关，而二者与脂联素均呈明显负相关；以血清抵抗素、瘦素、脂联素为因变量，进行多元线性逐步回归分析显示，对三者影响最大的是HOMA-IR和腰臀比(WHR)。结论 T2DM患者血清抵抗素、瘦素水平升高、脂联素水平降低，提示血清抵抗素、瘦素、脂联素水平与T2DM的发病及其微血管病变的发生相关。

2型糖尿病；血清抵抗素；瘦素；脂联素；微血管病变；相关性

糖尿病是严重危害人类健康且在全球广泛流行的疾病，其患病率正随着人民生活水平的提高、生活方式的改变、人口老龄化而迅速升高[1-2]。糖尿病微血管病变(DMAP)是糖尿病较常见的慢性并发症之一，以组织器官的微血管结构和功能的病变为主要特征，主要包括糖尿病视网膜病变、糖尿病神经病变、糖尿病肾病等。大量研究显示DMAP可逐步发展为动脉粥样硬化、高血压、冠心病、脑血管病和周围血管疾病等，是糖尿病致死、致残的重要原因，因此早期预防、发现、干预、监测DMAP尤为重要[3-4]。

近年来，研究发现众多细胞因子如抵抗素、脂联素、瘦素等可能对胰岛素敏感性、糖代谢及其血管并发症的发生、发展有一定影响。抵抗素是一种由脂肪细胞分泌的激素，瘦素是由肥胖基因编码的蛋白质产物，基础研究表明，抵抗素和瘦素均与糖尿病代谢异常和动脉粥样硬化的形成有关[5-6]。脂联素作为成熟脂肪细胞分泌的特异性激素，通过多种途径发挥抗动脉粥样硬化功能，对心血管有正性保护作用[7]。本研究通过检测DMAP患者血清抵抗素、瘦素、脂联素水平，旨在探讨三者与糖尿病患者微血管病变及胰岛素抵抗的关系，并初步探讨其致病机制。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2014年12月至2015年12月河北北方学院附属第一医院内分泌科收治的2型糖尿病(T2DM)患者120例，研究经本院伦理委员会批准，所有患者均书面同意参加本研究。糖尿病诊断标准：空腹血糖(FPG)>7.0 mmol/L，OGTT(葡萄糖耐量试验)试验中予以75 g葡萄糖口服，2 h血糖大于或等于11.1 mmol/L。DMAP涉及糖尿病神经病变、糖尿病视网膜病变、糖尿病肾病等。排除标准：慢性心力衰竭、心肌梗死、急性脑血管病、严重肝功能异常、尿毒症、库欣综合征、恶性肿瘤等疾病。

1.2 分组 将所选T2DM患者根据是否出现微血管病变分为无微血管病变(NON-MAP)组60例和MAP组60例，其中NON-MAP组中男33例，女27例，年龄42～55岁，平均(49.15±4.60)岁，病程6～13年，平均(10.3±2.4)年；MAP组中男36例，女24例，年龄43～56岁，平均(50.62±4.61)岁，病程7～14年，平均(11.0±2.1)年；另选取健康人群60例作为NC组，男34例，女26例，年龄43～54岁,平均(49.15±4.60)岁，3组人群的年龄、性别及两个T2DM组患者的病程间比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.3 试剂 血糖、血脂试剂盒购于宁波亚太生物技术有限责任公司；抵抗素、瘦素、脂联素及游离脂肪酸(FFA)试剂盒购自美国Rapidbio公司。AU5400全自动生化仪购自日本日立公司。

1.4 观察指标 测定身高、体质量、腰围、血压，计算体质量指数(BMI)，采空腹静脉血，采用肝素抗凝，室温下密封保存，避免剧烈震荡引发溶血现象，3 000 r/min离心后应用自动生化仪检测各组患者治疗前后FPG、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)，采用放射免疫分析法测定空腹胰岛素(FINS)、采用比色法测定糖化血红蛋白(HbA1c)值；应用夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清抵抗素、瘦素、脂联素及FFA水平。并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)：HOMA-IR=FPG×FINS/22.5。

2 结 果

2.1 3组人群一般情况及相关指标比较 与对照组比较，NON-MVP组的腰臀比(WHR)、FPG、HbA1c、FINS、HOMA-IR、TG、FFA、hs-CRP均显著升高(P<0.05)，与NON-MVP组比较，MVP组患者WHR、FINS、HOMA-IR、HbA1c、TG均显著升高，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

2.2 3组人群血清抵抗素、瘦素、脂联素水平比较 MVP组及NON-MVP组患者血清抵抗素、瘦素、脂联素水平显著高于对照组(P<0.05)，MVP组患者血清抵抗素、瘦素、脂联素水平亦显著高于NON-MVP组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

2.3 抵抗素、瘦素、脂联素水平的相关性分析 血清抵抗素、瘦素水平与FFA、hs-CRP、WHR、TG、HOMA-IR均呈正相关(P<0.05)，与HDL-C呈负相关；而脂联素水平与FFA、hs-CRP、WHR、TG、HOMA-IR呈负相关，与HDL-C呈正相关，三者均与BMI、TC、LDL-C、SBP、DBP无相关性。此外，血清抵抗素、瘦素水平呈明显正相关(r=0.545,P=0.000)，而二者与脂联素均呈明显负相关(r=-0.429,P=0.000、r=-0.469,P=0.000)，见表2。

2.4 抵抗素与各种影响因素的多元逐步回归分析 以抵抗素、瘦素、脂联素为因变量(Y)，以BMI、WHR、FPG、FINS、HOMA-IR、TG等为自变量(X)，进行多元逐步回归分析，见表3、4、5，结果显示对抵抗素、瘦素、脂联素影响较大的因素是HOMA-IR和WHR。

表1 3组人群相关指标的比较

续表1 3组人群相关指标的比较

*：P<0.05，与NC组相比；#：P<0.05，与NON-MVP组相比。

表2 T2DM患者血清抵抗素、瘦素、脂联素与相关指标的相关性

表3 以抵抗素为因变量的多元逐步回归分析

-：表示无数据。

表4 以瘦素为因变量的多元逐步回归分析

-：表示无数据。

表5 以脂联素为因变量的多元逐步回归分析

-：表示无数据。

3 讨 论

抵抗素是一种由脂肪细胞分泌的多肽类激素，研究证实抵抗素有较强的对抗胰岛素效应，促进血糖升高、脂肪细胞增生并致肥胖，并通过上调血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)及IL-1、IL-6的水平[8]，促进血管内皮细胞释放内皮素(ET-1)和减少NO生成，诱导全身各血管强烈收缩痉挛，进一步损伤内皮细胞，从而促进动脉粥样硬化的形成[9]。

瘦素是由肥胖基因编码、脂肪细胞合成的蛋白质产物，通过抑制胰岛素分泌调控血糖，与肥胖、高血压、脂代谢紊乱、胰岛素抵抗等密切相关[10]。多项研究表明瘦素能通过促进ET-1的分泌，诱导血管平滑肌的分裂和增生，致内皮功能紊乱；Shanker等[11]研究显示瘦素可上调冠状动脉细胞内基质金属蛋白酶(MMP-2)、MMP-9、TIMP-1的表达，调节血管外基质的重组，从而参与AS的形成；此外，瘦素也可以通过加速血小板聚集、微血栓形成、平滑肌细胞的迁徙影响血管钙化进程，从而参与AS的进展[12]。

脂联素是迄今发现的唯一与机体脂质含量呈负相关的脂肪因子，具有纠正血糖血脂紊乱、抗炎、胰岛素增敏的功能[13]。生理浓度的脂联素即可抑制肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核巨噬细胞、T淋巴细胞亚群、VCAM-1、E选择素的形成和释放，并呈明显的剂量依赖性，同时阻止泡沫细胞的形成及平滑肌细胞的迁移和增殖，最终抑制AS的发展[14-15]。多项流行病学调查显示糖尿病患者中，脂联素水平越低，其患心血管疾病危险越高，且愈后越差。

本研究发现老年T2DM患者血清抵抗素、瘦素、FFA、hs-CRP水平均显著高于健康者，且MAP组抵抗素、瘦素、hs-CRP水平亦显著高于NON-MAP组；而脂联素则在NC组、NON-MAP组、MAP组中呈逐步降低趋势，这与文献[16-17]研究结果一致，表明血清抵抗素、瘦素、脂联素在糖尿病的发生、发展及微血管病变形成的过程中发挥重要作用。因而如何早期发现、控制及监测抵抗素、瘦素、脂联素水平变化，对延缓DMAP有积极的意义。

本研究还发现血清抵抗素、瘦素水平与FFA、hs-CRP、WHR、TG、HOMA-IR呈正相关；而脂联素则呈负相关，多元逐步回归分析显示，血清抵抗素、瘦素、脂联素水平仍与HOMA-IR呈明显相关性，即抵抗素、瘦素水平越高，脂联素水平越低，HOMA-IR越高，胰岛素抵抗越重。

综上所述，抵抗素、瘦素、脂联素参与了整个糖尿病发生和演进，表明随着三者水平的变化，胰岛素抵抗逐渐加重，直至发生DMAP。然而抵抗素、瘦素、脂联素在T2DM中的作用机制仍未完全阐明，诸多问题有待进一步的研究，这也将是本课题组今后的研究方向。

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Study on relationship between serum resistin,leptin and adiponectin with microangiopathy in patients with type-2 diabetes mellitus

WangLikun1,YangZhanqing2,ZhangJun3,YangRuimin1,WuXueliang4,ShiLi5,WangYicheng1△

(1.DepartmentofUltrasonicMedicine,theFirstHospitalAffiliatedtoHebeiNorthUniversity,Zhangjiakou,Hebei075000,China;2.DepartmentofInternalMedicine,KangbaoCountyHospitalofTraditionalChineseMedicine,Zhangjiakou,Hebei076650,China;3.DepartmentofInternalMedicine,thePeople′sHospitalofQiaoxiDistrictinZhanjiakouCity,ZhangJiakou,Hebei075000,China；4.DepartmentofVascularGlandSurgery,theFirstHospitalAffiliatedtoHebeiNorthUniversity,Zhangjiakou,Hebei075000,China;5.DepartmentofEndocrinolog,theFirstHospitalAfftliatedtoHebeiNorthUniversity,Zhangjiakou,Hebei075000,China)

Objective To investigate the relationship between serum resistin,leptin and adiponectin with microangiopathy in the patients with type-2 diabetes mellitus(T2DM).Methods One hundred and twenty patients with T2DM in our hospital were selected and divided into the non- microangiopathy group (NON-MAP,60 cases) and microangiopathy group (MAP,60 cases) according to whether complicating microangiopathy.Other 60 individuals undergoing healthy physical examination were selected as the normal control group(NC).Fasting serum resistin,adiponectin and leptin levels were detected in each group.Fasting blood glucose,insulin and blood lipid levels were also detected.The insulin resistance was evaluated by using insulin resistance index(HOMA-IR).Results The levels of serum resistin,leptin,free fat acid(FFA) and hs-CRP in the NON-MVP group and MVP group were significantly higher than those in the NC group,while the adiponectin level was significantly lower than that in the NC group,the difference was statistically significant(P<0.05).The correlation analysis showed that serum resistin and leptin levels had positive correlation with hs-CRP,FFA,HOMA-IR and TG(P<0.05),and had negative correlation with HDL-C(P<0.05);the adiponectin level was negatively correlated with hs-CRP,FFA,HOMA-IR and TG,while positively correlated with HDL-C(P<0.05);serum resistin and leptin levels had positive correlation,both had significantly negative correlation with adiponectin;with serum resistin,leptin and adiponectin as the dependent variables,the multiple stepwise linear regression analysis showed that HOMA-IR and waist to hip ratio had maximal influence on them.Conclusion Serum resistin and leptin levels increase and adiponectin level decrease in T2DM patients suggests that serum resistin,leptin and adiponectin are correlated with T2DM occurrence as well as microangiopathy occurrence.

type-2 diabetes mellitus;serum resistin;adiponectin;leptin;microangiopathy;correlation

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.16.012

河北省卫生和计划生育委员会医学科学研究重点课题计划(20160367)。 作者简介：王立坤(1983-)，硕士，主治医师，主要从事超声医学诊断方面的研究。△

，E-mail:wyc@126.com。

R587.23

A

1671-8348(2017)16-2200-04

2017-01-22

2017-03-26)