闫勇杰 王丽红

摘要 通过对南北2种青龙衣化学成分及抗菌、抗肿瘤、镇痛等药理作用的研究进展综述，发掘其巨大的潜在药用价值，为胡桃属植物资源综合开发利用提供广阔的前景。

关键词 青龙衣；山核桃；核桃楸；化学成分；药理作用

Research Progress on Chemical Constituents and Pharmacological Effects of Two Kinds of Juglans Green Peel

YAN Yong-jie，WANG Li-hong* （School of Pharmacy，Jiamusi University，Jiamusi，Heilongjang 154007）

Abstract This paper summarized chemical constituents and pharmacological effects（such as anti-bacterial，anti-tumor and analgesic effects and so on） of two kinds of Juglans green peel to explore its huge potential medicinal value，and provided broad prospects for the comprehensive development and utilization of walnut plant resources.

Key words Juglans green peel；Juglans cathayensis；Juglans mandshurica；Chemical constituents；Pharmacological effects

山核桃（Juglans cathayensis），又名野核桃、小核桃，主要產于浙江、安徽、甘肃、河北等地，生长在海拔800～2 800 m的杂木林中。核桃楸（Juglans mandshurica），又名胡桃楸，分布于东北三省等地，多生于湿润、排水良好、土质肥厚的山坡或沟谷两侧[1]。两者均为胡桃科（Juglandaceae）胡桃属（Juglans）植物。青龙衣也就是核桃楸皮，即未成熟的山核桃青皮剥制晒干而成，这2种植物的果实青皮均作为青龙衣入药。味苦、性寒，具有清热、解毒、止痢、明目等功效[2]，治泄泻、痢疾、白带、目赤等。青龙衣作为一味传统中药，其开发利用早就被人重视。《浙江天目山药植志》记载道：山核桃的青皮捣碎取汁可擦治皮肤癣症，其种仁具有定喘清肺、滋润温肾的功效，黄酒送服可治腰痛[3]。近年来，国内外学者对其化学成分、药理活性和临床应用等方面做了大量研究，表明青龙衣具有抗菌消炎、镇痛、抗肿瘤等作用，特别是抗肿瘤作用显著，具有极其宝贵的药用价值。经查阅文献已知国内有的学者将这2种植物及其拉丁名混淆，笔者现将近年来对这2种青龙衣化学成分的研究进展、药理作用及应用综述如下。

1 化学成分

山核桃和核桃楸的青龙衣主要含有多糖类、醌类、黄酮类以及大量鞣质等化学成分，萘醌及其衍生物已成为各地学者的研究重点。1973年Ohta等[4]从野核桃新鲜青皮中分离提纯出5，8-二羟基-l，4萘醌，得出青龙衣中萘醌的存在。Min等[5]通过对胡桃楸未成熟青皮进行提取研究，分离得到了4种黄酮醇、2种三羟基苯甲酰没食子酸葡萄糖苷和3种萘基吡喃葡萄糖苷，并鉴定了它们的结构。杜旭等[6]将山核桃嫩皮80 ℃烘干后利用马福炉灰化得到多种无机盐，原子吸收分光光度计测得：钾56.8%，钙21.4 %，镁5.5%，铁5.1%，锌2.27%，锂1.98%，铜0.25%。Lee等[7]从胡桃楸的青果皮中分离得到胃毒活性物质，为进一步研究其药理活性提供了有力的依据。周靖等[8]采用氢化物法和火焰原子吸收法对核桃楸青果皮中金属元素进行测定，铁、钾、锰、锌、镁、铜、钙和砷都有测得，且钾含量最高，为41 157.96 μg/g。孙墨珑等[9]分别用超声提取法、索氏提取法以及常规加热提取法提取分离出胡桃醌，并用高效液相色谱仪测定其含量，结果得出超声提取法纯化出该青皮中胡桃醌含量最多，常规提取法其次，索氏提取法较低。季宇彬等[10]对青龙衣多糖进行提取、分离，经纯化后可得多种单糖，如葡萄糖、阿拉伯糖、鼠李糖、果糖、半乳糖等。李秀凤[11]运用气相色谱与质谱联用法测出野核桃青皮中脂肪酸的成分及含量，其中不饱和脂肪酸含有2.93%的十六烯酸、1.45%的9-十八碳烯酸、14.36%的9，12-十八碳二烯酸、3.21%的9，12，15-十八碳三烯酸。高小宁等[12]研究了山核桃青皮乙醇提取的氯仿萃取部位，鉴定得出胡桃醌、β-谷甾醇等5个化合物。

青龙衣中的胡桃醌（Juglone，5-hydroxy-1，4-naphthoquinone）为其抑制癌症的主要成分。刘薇等[13]研究发现，青龙衣三氯甲烷提取物具有一定的抗肿瘤作用。陈向明[14]对山核桃青皮做了大量研究，通过正交试验优选出最佳提取溶剂和方法是：以70%乙醇为溶剂的萃取法，乙醇与青皮的料液比为10∶1，在60 ℃水浴加热的条件下回流提取4 h，总醌提取量可达0.84%；并得出色谱柱层析法为最佳的分离方法，以硅胶为填柱材料，按硅胶材料与浸提样液的配比为1∶3，得醌类的回收率高达88.71%，纯度可达86.08%。

目前关于青龙衣研究最多，药用价值最高的是醌类化合物及其衍生物，如α-和β-氢化胡桃醌、胡桃醌、3，3-双胡桃醌及3，6-双胡桃醌等；其次是黄酮类化合物，如胡桃苷、山奈酚、槲皮素、球松素、柚皮素等[15-16]。吴德玲等[17]对山核桃外蒲壳进行研究，从中共分离鉴定出大黄素甲醚、4，8-二羟基-1-四氢萘酮、球松素等5个化合物，其中4，8-二羟基-1-四氢萘酮和大黄素甲醚是首次从该植物青皮中分离得出。青龙衣中化学成分结构式如图1所示。

2 药理作用

2.1 抗菌作用

青龙衣提取物表现出以剂量依赖的方式具有广谱抗菌活性，试验表明因菌种不同，抑菌测试反应也不相同。20世纪90年代初，杨志等[18]就用胡桃楸内皮水煎剂做了相应的抑菌试验，结果发现，该水煎剂对水弧杆菌、金黄色葡萄球菌、变形杆菌OX10、1485均有较强的抗菌作用。闻平等[19]将山核桃乙醇提取物应用到烟曲霉菌、新生隐球菌、白色念珠菌中，并与临床上常用的抗真菌药物进行对比，结果显示，其对致病性真菌具有较强的抑制和杀死作用，其作用强度与FCZ、ICZ相当，但不如AMB和5-FC见效。Oliveira等[20]研究表明，青龙衣水提物对金黄色葡萄球菌以及许多革兰阳性菌、阴性菌均有较强的抑制作用。林君阳[21]采用生长速率法测定了青龙衣甲醇提取物4个有机萃取相的抑菌作用，结果表明，α-谷甾醇、乔松酮、5-羟基-2-甲氧基-1，4-萘醌和乔松素等8个化合物对玉米人斑病菌、水稻稻瘟病菌孢子萌發的抑制率均在90%以上。王艳梅[22]通过用青龙衣95%乙醇提取物做抑菌试验，结果表明，抑菌活性成分溶解在氯仿和石油醚萃取相中。在临床方面，千学技等[23]将山核桃嫩皮与具有抑菌、清热、收敛作用的儿茶配伍制成复方山核桃酊，治疗了困扰患者近一年的顽固性阴囊湿疹，取得了令人非常满意的效果。

2.2 抗肿瘤作用

青龙衣在民间用于抑制及治疗各种癌症已经取得不错的效果。青龙衣中多种组分均表现出抗肿瘤的药效作用，许多单体成分也表现出较强的抗肿瘤增殖作用。从作用机理的角度看，青龙衣抗肿瘤增殖作用总是与抗氧化、免疫调节、毒性作用等相联系，而主要得益于其中的胡桃醌（5-羟基-1，4-萘醌）等成分，胡桃醌已经成为抗肿瘤作用研究的热点。许绍惠等[24-25]通过研究核桃揪青皮的有效成分，并从其中提取分离出胡桃醌及衍生物胡桃醌二聚体的3种结晶化合物，鉴定出结构且与国际学者的报道一致。抑瘤率也称抗癌率，是衡量一种药物抗肿瘤作用的重要指标之一，是筛选抗肿瘤药物的主要依据。吴德玲等[26]从野核桃外蒲壳中分离纯化出5 个单体化合物，并针对肝癌HepG2 细胞采用MTT法进行了活性试验，结果表明，4，8-二羟基-1-四氢萘酮、乔松酮、大黄酚3个化合物对肝癌HepG2 细胞均有很强的抑制和杀伤作用，最高抑制率分别为67%、70%和69%。姜秀梅等[27]将青龙衣乙醇提取物和人乳腺癌细胞体外共同培养，当药物浓度为400 μg/mL时，抑癌率达38.4%；600 μg/mL 时，达 47.9%，试验表明青龙衣乙醇提取物对乳腺癌细胞有一定抑制作用。王少东等[28]用胡桃楸青果皮水提浸膏对体外肉瘤S180细胞和小鼠肝癌进行试验，结果显示，癌细胞的核酸代谢受到抑制，从而被杀死，其作用效果与药物浓度和作用时间呈正相关性，是一种有前途的抗肿瘤药物。宋华等[29]通过体外试验研究发现，核桃楸叶的乙酸乙酯提取液能抑制乳腺癌细胞（MCF7/ADR）、肺癌细胞（NCIH460）、慢性髓原白血病细胞（K562）这3种癌细胞的增殖，药物浓度为0.5 mg/L时这3种癌细胞100%死亡，因而确定0.5 mg/L浓度为这3种细胞的最大致死剂量。

李岩等[30]利用胡桃醌对人肺癌细胞A549的生长抑制作用及对细胞周期的影响作为研究机制，并以血清药理学原理为基础进行研究，结果发现，胡桃醌对A549的增殖具有明显抑制作用，能将这种癌细胞复制阻滞在S期，诱导其凋亡。李生正等[31]应用BSLB法[32]对青龙衣乙酸乙酯提取物进行了相关研究，发现其提取物LC50值为79.102 3，具有较明显的抗癌活性。

在我国东三省地区，民间就有流传把核桃楸青果皮当茶饮用来治疗肿瘤或是减缓癌症带来的疼痛。青龙衣的抗肿瘤作用在临床上亦有许多应用。李中原等[33]在河北省食管贲门癌高发区——涉县，共用核桃楸树皮对120例食管贲门癌患者进行治疗，综合有效治疗率高达53%。高奎滨在二十多年对656例临床癌症患者用青核桃和刺五加配伍使用的治疗得出，对肺癌、胃癌、食管癌等6种癌症有效治疗率为30.46%，且无其他抗癌药的毒副作用[34]。

2.3 镇痛作用

关于青龙衣的镇痛消炎作用，无机盐（钾盐）可能是镇痛活性之一，但钾同时却是一种致痛物质，因此成为许多学者研究的焦点。杜旭等[35]通过原子吸收分光光度法对青龙衣中镇痛活性成分进行了分析测定，得出钾盐是其镇痛活性成分，能提高小鼠基础痛阈，减少扭体次数及热板反应，其作用机制与提高动物低钙高钾条件下痛阈有关。又有学者对青龙衣提取分离、纯化得出钾盐是青龙衣中主要镇痛成分[36]。此外，Erdemoglu等[37]通过p-苯醌诱导小鼠腹部疼痛，用以青龙衣的乙醇和水提取物灌胃后根据小鼠腹部抗伤害感受不同的收缩程度得出具有镇痛和抗炎活性。宛蕾等[38]通过醋酸、热板传导致小鼠疼痛后用胡桃青皮乙醇提取液灌胃，得出该青皮对化学刺激及热传导引起的小鼠疼痛有显著的镇痛效果，且随剂量的增加，镇痛效果逐渐增强。

2.4 其他作用

有文献记载青龙衣水煎剂治疗Ⅱ型糖尿病有良好的效果[39]。王宏虬等[40]通过研究胡桃楸青皮的不同提取物对马铃薯害虫的杀伤作用，表明其对蚜虫的触杀效果好于对瓢虫的触杀效果。何志平[41]研究发现，不同青龙衣提取物清除自由基能力由弱到强依次为80%乙醇提取物、水提取物、乙酸乙酯提取物，得出青龙衣具有良好的抗氧化功能。

3 结语

综上所述，山核桃和核桃楸是我国分布最广泛的树种之一，青龙衣资源丰富，随着对青龙衣的研究不断加深，提取分离的方法不断得到改进，提取效率也有所提高。进一步对青龙衣抗肿瘤成分的作用机理进行研究，提取其活性成分，大力开发出一种青龙衣药物，为癌症病人的治疗寻找一种新的途径，使青龙衣在临床上得到更多的应用，有一定的经济价值和实际意义。这必将为胡桃属植物的开发提供更加广阔的前景，实现青龙衣的综合利用。

[29] 宋华，包永明，张红梅，等.核桃楸叶提取液对肿瘤细胞的抑制作用[J].大连轻工业学院学报，2001，20（2）：109-111.

[30] 李岩，赵剑璞，王燕妮，等.胡桃醌含药血清体外抗肿瘤实验研究[J].北京理工大学学报，2013，33（5）：545-550.

[31] 李生正，王云彩，蒋东风，等.BSLB法筛选青龙衣与核桃枝抗肿瘤作用有效部位[ J] .西北药学杂志，2006，15（3）：114.

[32] MEYER B N，FERRIGNI N R，PUTNAM J E，et al.Brineshrimp：A convenient general bioassay for active plant constituents[J].Planta Med，1982，45（5）：31-34.

[33] 李中原，高奎滨.“青龙衣”治疗食管贲门癌120例临床观察[J].中医药信息，1988（3）：31.

[34] 张洪娟，桑树荣.高奎滨用青龙衣制剂治疗肿瘤用药经验[J].黑龙江中医药，2000，3（2）：62.

[35] 杜旭，李玉文，倪雁，等.中药青核桃镇痛作用研究与展望[J].中国中药杂志，2000，25（1）：7-10.

[36] 杜旭，王明晶.中藥青龙衣镇痛作用机理的研究[J].中国中医药科技，1997（3）：155-156.

[37] ERDEMOGLU N，KPELI E，YESILADA E.Anti-inflammatory and antinociceptive activity assessment of plants used as remedy in Turkish folk medicine[J].Journal of ethnopharmacology，2003，89（1）：123-129.

[38] 宛蕾，陈秀芬，杜江.胡桃青皮抗炎及镇痛作用的研究[J].中药药理与临床，1999，15（2）：29-30.

[39] 梁慧峰.核桃楸的化学成分及利用研究进展[J].北方园艺，2010（16）：219 -221.

[40] 王宏虬，廖福俊，李彪，等.核桃青皮提取物对马铃薯蚜虫与瓢虫的杀虫活性[J].江苏农业科学，2012，40（7）： 112-114.

[41] 何志平.浙江山核桃抗氧化与蛋白质特性研究[D].杭州：浙江大学，2011.