何惠嫦，黄瑾，陈应智，高海洋，相媛媛

(中山市人民医院妇科1、病理科2，广东中山528400)

EMP2、TTF-1在子宫内膜增生症和子宫内膜样腺癌中的表达及意义

何惠嫦1，黄瑾1，陈应智2，高海洋1，相媛媛1

(中山市人民医院妇科1、病理科2，广东中山528400)

目的探讨上皮膜蛋白2(EMP2)与甲状腺转录因子1(TTF-1)在子宫内膜增生症和子宫内膜样腺癌中的表达及其临床意义。方法选取1990年1月至2014年10月间在中山市人民医院妇科就诊、起初病理诊断为子宫内膜增生症(包括单纯型、复杂型、不典型增生)，经过10年随访发展和没有发展为子宫内膜癌的患者标本107例，其中正常子宫内膜标本28例，子宫内膜增生症癌变标本51例，子宫内膜癌标本28例，应用免疫组化S-P法检测各组标本中EMP2、TTF-1表达情况。结果在正常增生期子宫内膜、子宫内膜增生症、子宫内膜样腺癌组织中EMP2蛋白的阳性表达率分别为10.7%、33.3%、82.1%，依次递增，TTF-1的阳性表达率分别67.9%、45.1%、35.7%，依次递减，差异均有统计学意义(P˂0.05)；EMP2阳性者的比例随手术病理分期、组织病理分级的升高而增加，差异有统计学意义(P˂0.05)，而TTF-1阳性者的比例随手术病理分期、组织病理分级的升高而逐渐下降，差异有统计学意义(P˂0.05)。结论EMP2、TTF-1可能参与子宫内膜增生发展至子宫内膜癌的过程，对子宫内膜癌的早期诊断及预测预后有一定的价值。

上皮膜蛋白2；甲状腺转录因子1；子宫内膜癌；子宫内膜增生症；子宫内膜增生症癌变；免疫组织化学

子宫内膜癌是女性生殖系统常见的三大恶性肿瘤之一，其中以子宫内膜样腺癌最常见，且子宫内膜癌的发病率有升高和年轻化趋势。子宫内膜腺癌发病的分子机制尚不明确，我们通过免疫组化SP法检测子宫内膜样腺癌及子宫内膜增生症、正常子宫内膜组织中EMP2、TTF-1的表达，探讨两者在子宫内膜样腺癌发病过程中的作用。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取1990年1月至2014年10月间在中山市人民医院妇科因异常阴道出血行诊刮病理诊断为子宫内膜增殖症的患者107例，10年随访期间按因再次异常阴道出血而诊刮术或因子宫良性病变行全子宫切除术的内膜病理检查结果分组，其中正常子宫内膜组28例(空白对照组)，年龄31～54岁，中位年龄45岁；子宫内膜增生组(包括单纯型增生、复杂型增生、不典型增生)51例，年龄25～45岁，中位年龄37岁；子宫内膜癌组28例，年龄31～64岁，中位年龄52岁。所有患者均有完整的临床资料和存档石蜡块，术前均未接受放疗或化疗，且所有患者在年龄等因素方面比较差异均无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法EMP2鼠抗人单克隆抗体、TTF-鼠抗人单克隆抗体、SP免疫组化染色试剂盒购自福州迈新生物有限技术公司，应用免疫组化S-P法检测上述2组患者组织标本EMP2和TTF-1的表达情况。

1.3 结果判定PBS代替一抗为阴性对照。每张切片选10个高倍视野，每高倍视野记数100个正常细胞或瘤细胞消门EMP2阳性表达定位于胞质和胞膜。TTF-1阳性表达定位于胞核。免疫组化结果经2名病理医师分别阅片和评分，结果一致方作为最后结果。免疫组化评分标准[1]：分别为阳性强度评分：无着色0分，浅黄1分，棕黄色2分，棕黑色3分；阳性细胞占所有细胞的比例评分：˂5%为0分，5%～25%为1分，26%～50%为2分，51%～75%为3分，＞75%为4分。将两项乘积分别评价：9～12分者为强阳性表达，4～8分者为弱阳性表达，0～3分者为阴性表达。强阳性及弱阳性均按阳性处理。

1.4 统计学方法应用SPSS13.0统计软件进行数据分析，计数资料均采用χ2检验和Fisher确切概率法，均为双侧检验，以P˂0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 EMP2、TTF-1在不同子宫内膜组织中的表达在正常增生期子宫内膜、子宫内膜增生症、子宫内膜腺癌组织中EMP2蛋白的阳性表达率依次递增(图1、图2)，TTF-1的阳性表达率依次递减(图3、图4)。三种不同病理类型的子宫内膜组织中EMP2和TTF-1阳性表达率比较差异均有统计学意义(χ2= 31.62，6.27，P˂0.05)，见表1。

2.2 EMP2在不同期别子宫内膜癌组织中的表达EMP2在晚期(Ⅲ～Ⅳ期)子宫内膜癌组织中的阳性表达率比早期(Ⅰ～Ⅱ期)稍高，G3～G2的阳性表达率比G1高，有淋巴结转移者的阳性表达率比无淋巴结转移者高，深肌层浸润者的阳性表达率比无深肌层浸润者高，以上各项指标比较差异均有统计学意义(χ2= 31.62，P˂0.05)，见表2。

图1 增生期子宫内膜EMP2弱阳性表达(×200)

图2 子宫内膜癌EMP2强阳性表达(×200)

图3 单纯性子宫内膜增殖TTF1表达(×200)

图4 子宫内膜癌TTF1弱阳性表达(×200)

2.3 TTF-1在不同期别子宫内膜癌组织中的表达TTF-1在晚期(Ⅲ～Ⅳ期)子宫内膜癌组织中的阳性表达率比早期(Ⅰ～Ⅱ期)低，G3～G2的阳性表达率比G1低，有淋巴结转移和深肌层浸润者的阳性表达率比无淋巴结转移者低，深肌层浸润者的阳性表达率比无深肌层浸润者低，以上各项指标比较差异均有统计学意义(χ2=6.27，P˂0.05)，见表3。

表1 三种不同病理类型的子宫内膜组织中EMP2和TTF-1阳性表达

表2 EMP2表达与子宫内膜患者临床病例参数的关系（例）

表3 TTF-1表达与子宫内膜癌患者临床病理参数的关系(例)

3 讨论

3.1 子宫内膜增生与子宫内膜癌的关系子宫内膜增生症包括单纯型子宫内膜增生、复杂型子宫内膜增生、不典型子宫内膜增生，其中不典型子宫内膜增生属癌前病变。子宫内膜增生症发病率高于子宫内膜癌，若不治疗，部分子宫内膜增生症会缓慢发展成子宫内膜癌。Kurman等[2]研究发现单纯型增生、复杂型增生、不典型增生恶变率分别为1%、3%、29%；子宫内膜癌占女性生殖道恶性肿瘤的20%～30%，近年来发病率有上升趋势，已接近甚至超过宫颈癌发病率[3-5]。子宫内膜癌的确切病因尚不清楚，目前认为子宫内膜癌可能有两种发病类型：雌激素依赖型和非雌激素依赖型。前一种类型占子宫内膜癌的大多数，均为子宫内膜样腺癌，它的发生可能是在无孕激素拮抗的雌激素长期作用下发生子宫内膜异常增生甚至癌变，尽早发现子宫内膜增生发展子宫内膜样腺癌的高风险人群，并作出相应激素治疗及随访管理，有望降低子宫内膜样腺癌的发病率或早期发现子宫内膜癌。

3.2 EMP2与子宫内膜增生、子宫内膜癌的关系EMP2是一种原癌基因产物，是含有167个氨基酸的多通道蛋白，属于GAS3/PMP22(生长停滞特异性-3/外周髓鞘蛋白22)家族，定位于细胞质和细胞膜，作为一种细胞表面的连接受体，EMP2参与细胞与细胞之间的信号传导，参与细胞的转录，主要通过调节某种特定信号复合物的活性来发挥作用[6-7]，从而引起细胞增殖失控，凋亡受阻，导致肿瘤发生。Habeeb等[8]和Freije等[9]研究发现在子宫内膜癌、卵巢癌、神经胶质瘤多种肿瘤中都有EMP2的超表达，并且EMP2表达的失控可能还与肿瘤的进展、恶化、预后有一定的相关性。在子宫内膜癌，EMP2通过调节血管表面生长因子的产生来影响肿瘤组织的血管再生，从而促进肿瘤生长。提示EMP2可作为子宫内膜癌预后的一个良好的预测指标。

本研究中EMP2在正常子宫内膜中低表达，阳性率只有10.7%，在子宫内膜增生症组表达水平稍升高为33.3%，在子宫内膜癌中进一步升高，阳性率达82.1%。在子宫内膜癌患者中，随着手术病理分期越晚、细胞组织学分级越高EMP2的阳性表达率越高，有淋巴结转移、深肌层浸润患者的EMP2阳性率较无淋巴结转移和无深肌层浸润患者的高。提示子宫内膜增生症发展到子宫内膜癌的过程中EMP2可能起着某种促进作用。

3.3 TTF-1与子宫内膜增生症癌变的关系TTF-1作为一种抑癌基因产物，是DNA连接蛋白，含有371个氨基酸，是相对分子量为38 kDa的核蛋白，在1989年Civitareale等[10]通过动物实验发现TTF-1可以调节甲状腺球蛋白基因的特异性表达，为甲状腺球蛋白的特异性转录因子，从而命名为甲状腺转录因子-1。Myong等[11]研究发现，TTF-1表达与细胞增殖抗原(Ki67)表达呈负性相关，意味着TTF-1表达水平越高，瘤细胞增殖率越低，提示患者的预后越好。Zhang等[12]首先发现了在正常子宫内膜组织中TTF-1的阳性表达。Sullivan等[13]研究表明，TTF-1阳性表达可以降低子宫内膜组织发展为子宫内膜癌的概率。这些研究结果表明，TTF-1在正常子宫内膜或子宫内膜增殖症癌变的过程中起到了一定作用。

本研究中，TTF-1在正常子宫内膜中高表达，阳性率为67.9%，在子宫内膜增生症组表达水平稍下降，阳性率为45.1%，在子宫内膜癌中的阳性率进一步下降，阳性率为35.7%。在子宫内膜癌患者中，随着手术病理分期越晚、细胞组织学分级越高TTF-1的阴性表达率越高，有淋巴结转移、深肌层浸润患者的TTF-1阴性率较无淋巴结转移和无深肌层浸润患者的高。这些结果提示TTF-1可能参与了癌变过程，与子宫内膜癌的侵袭、转移有关，并且在子宫内膜增殖症癌变的过程中起到了抑制作用。

综上所述，EMP2、TTF-1在正常子宫内膜、子宫内膜增生症、子宫内膜癌中的表达分别呈阶梯型升高和阶梯型降低，表明两者可能参与了子宫内内膜癌的发生发展过程，对子宫内膜癌的早期诊断及预测预后有一定的价值。有望成为新的分子导向治疗靶点。EMP2、TTF-1有助于我们区分出在子宫内膜增殖症患者中哪些属于可能发生癌变的高风险人群，尤其是对育龄期子宫内膜增生症的患者，帮助这些患者选择一种最合适的治疗方案。

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Expression and clinical significance of EMP2 and TTF-1 in endometrial hyperplasia and endometrial adenocarcinoma.

HE Hui-chang1,HUANG Jin1,CHEN Ying-zhi2,GAO Hai-yang1,XIANG Yuan-yuan1.
Department of Gynecology1,Department of Pathology2,Zhongshan People's Hospital,Zhongshan 528400,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo investigate the expression and clinical significance of epithelial membrane protein-2(EMP2)and thyroid transcription factor-1(TTF-1)in endometrial hyperplasia and endometrial adenocarcinoma.MethodsA total of 107 cases of patients,who admitted to Department of Gynecology of Zhongshan People’s Hospital and initially confirmed as by endometrial hyperplasia(including simple hyperplasia,complex hyperplasia,atypical hyperplasia)by pathology diagnosis from January 1990 to October 2014,were selected as the research subjects.After ten years of clinical follow-up,among of 107 cases of specimens,there were 28 cases of normal endometrial specimens,51 cases of endometrial hyperplasia specimens,28 cases of endometrial adenocarcinoma.The expression of EMP2 and TTF-1 were detected by immunohistochemical S-P method.ResultsThe positive expression rate of EMP2 in normal proliferative endometrium,endometrial hyperplasia(simple hyperplasia,complex hyperplasia,atypical hyperplasia),and endometrial adenocarcinoma tissue were 10.7%,33.3%and 82.1%,respectively,with an increasing trend;the positive expression rate of TTF-1 in three different tissues were 67.9%,45.1%and 35.7%,respectively,with a decreasing trend (P˂0.05).The proportion of EMP2 positive patients increased with increase of surgical pathology and histopathological grade(P˂0.05),while the proportion of TTF-1 positive patients decreased with increase of surgical pathology and histopathological grade(P˂0.05).ConclusionEMP2 and TTF-1 may be involved in the occurrence and development from endometrial hyperplasia to endometrial carcinoma,which may be valuable for the early diagnosis and prognosis of endometrial carcinoma.

Epithelial membrane protein-2(EMP2);Thyroid transcription factor-1(TTF-1);Endometrial cancer;Endometrial hyperplasia;Cancerous endometrial hyperplasia;Immunohistochemistry

R737.33

A

1003—6350（2017）11—1732—04

2016-08-10)

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.11.004

广东省中山市科技计划局项目(编号：20132A080)

何惠嫦。E-mail：huhehuichang@163.com