闫丽丽

摘要：在查阅、收集国内蒲公英中总黄酮取纯化工艺、生物活性文献基础上，综述近年来蒲公英中总黄酮的纯化工艺及生物活性研究进展，旨在为进一步开展蒲公英相关研究提供参考。

关键词：总黄酮；蒲公英；提取纯化；生物活性

中图分类号：R932 文献标识码：A 文章编号：1674-1161（2017）01-0066-02

蒲公英为菊科植物蒲公英属多年生草本植物，具有清热解毒、消肿散结、利尿通淋等功效，其主要有效成分为黄酮类。近年来，国内在蒲公英中总黄酮的提取纯化、生物活性等方面进行大量研究。在查阅收集文献的基础上，综述近几年来蒲公英中总黄酮的提取纯化、生物活性研究进展，旨在为相关研究提供参考。

1 蒲公英总黄酮的提取方法

蒲公英总黄酮的提取方法主要有溶剂提取法、超声辅助提取法、微波辅助提取法、超临界CO2萃取法等。吴杰等通过试验获得的乙醇提取蒲公英中总黄酮最佳提取工艺为：料液比1︰50（g/mL），乙醇浓度50%，提取温度40 ℃，提取时间2 h，黄酮得率为6.84%。杨春瑜等采用乙醇回流法提取蒲公英中总黄酮，得到的最佳工艺为：料液比1︰20，提取时间2 h，乙醇浓度70%，提取温度75 ℃，黄酮得率10.10%。李华峰等采用超声波法提取蒲公英花粉末中的总黄酮，最佳提取工艺为：料液比1︰100、乙醇浓度75%、超声功率100 W、55 ℃的条件下超声提取30 min，总黄酮与总酚酸成分的提取较为完全。杨兵等比较微波萃取、索氏提取和超声波提取3种方法的蒲公英总黄酮类物质提取效率，结果表明：微波萃取法的最优条件为微波温度70 ℃、乙醇浓度70%、加热时间5 min。周伟等通过正交试验优化的CO2萃取工艺条件为：萃取压力30 MPa，萃取温度40 ℃，萃取时间90 min，乙醇流速3 mL/min，总黄酮萃取率1.68%。

2 蒲公英总黄酮的纯化方法

目前，蒲公英中总黄酮提取液纯化的方法有大孔树脂柱色谱、大孔吸附树脂-硅胶层析耦合、聚酰胺柱色谱、硅胶柱层析等，其中大孔树脂较为常用。

大孔树脂具有吸附量大、选择性好、易解吸、易再生、成本低、效率高等优点，特别适用于水溶性化合物的提取分离。在大孔树脂型号的选择上，卫建琮、李華峰和袁杰等采用D-101型，赵惠茹采用AB-8型，姚德坤采用广谱型，这些型号用于纯化蒲公英中总黄酮的效果较好。

卫建琮等确定蒲公英中总黄酮的最佳分离纯化条件为：在D-101树脂柱中，上样液浓度1.238 mg/mL，pH值3，上样量2 BV（树脂床体积倍数），室温下以流速2.0 BV/h吸附饱和，用4 BV的50%～70%乙醇以2 BV/h 的流速洗脱，黄酮纯度为92.56%。

赵惠茹、马姣姣等研究表明：AB-8型树脂对蒲公英中总黄酮的吸附与解吸性能较好，最佳吸附条件为上柱液浓度（以总黄酮含量计）9.2 g/L、pH值6、吸附流速2 BV/h，树脂柱的径高比1︰6，上样液体积9 BV；最佳解吸条件为4.5 BV、75%乙醇洗脱，洗脱流速2 BV/h。

聚酰胺吸附树脂是一种有机高聚吸附剂，具有选择性好、吸附容量大、解吸容易等优点，广泛应用于黄酮类成分的纯化。袁河通过静态吸附和解析试验选定聚酰胺为最佳吸附树脂，确定最佳吸附条件为：溶液pH值6，上样量20.00 mL；最佳解析条件为：乙醇浓度90%，温度30 ℃；最佳动态工艺条件为：上样液浓度2.65 mg/mL，上样液流速2.0 mL/min，洗脱液流速1.5 mL/min，纯化前总黄酮含量21.07%，纯化后总黄酮含量为47.89%。

3 蒲公英总黄酮的生物活性

研究表明，蒲公英总黄酮具有抑菌、抗氧化、心肌细胞保护、脑保护、抗癌、保鲜和改善卷烟吸味等活性。

3.1 抑菌活性

王晓英的研究表明：蒲公英总黄酮类提取物能破坏细胞膜结构，导致细胞通透性增加，使细胞内容物外泄。另外，蒲公英总黄酮类提取物可以妨碍细菌蛋白质的正常表达，导致细菌正常生理功能丧失，起到抑菌作用。杨春瑜等用平板打孔法测定蒲公英黄酮的抗菌活性，结果表明，蒲公英黄酮的抗菌活性强弱顺序为白色黄色葡萄球菌>枯草芽孢杆菌>大肠杆菌。李华峰的研究表明：蒲公英提取液对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、变形杆菌和绿脓杆菌敏感，对大肠埃希菌低度敏感。

3.2 抗氧化活性

李华峰的研究表明：蒲公英花提取液对超氧阴离子自由基、羟自由基和油脂自氧化均有较好的清除效果，并在供试质量浓度范围内呈现量效关系；对超氧阴离子自由基的半数抑制率IC50为96.1 μg/mL，对羟自由基的IC50为7.7 μg/mL；蒲公英花提取液可使花生油的过氧化值显著降低，效果与在花生油中添加0.10%的VC相当。

袁河对蒲公英总黄酮提取物抗氧化作用的研究表明：DPPH自由基的清除率随蒲公英黄酮提取物浓度的增加而增大，纯化后的黄酮提取物比纯化前的清除DPPH自由基能力强，也比对照品BHT强，但比添加VC弱。杨锐杰等研究发现：蒲公英花各萃取相的体外抗氧化作用与黄酮含量呈正相关作用，效果顺序为乙酸乙酯相>正丁醇相>水相>石油醚相。

3.3 脑保护活性

隋洪玉等研究发现：蒲公英水提液能够降低大鼠脑组织MDA、MAO含量，提高SOD活性，具有一定的抗自由基作用。蒋喜巧的研究表明：蒲公英总黄酮可改善造模后小鼠侧支循环和局部血液循环，进而升高小鼠结扎后的血流平均灌注量，使脑血流降低，从而改善小鼠脑膜微循环障碍；提高脑组织LDH、SOD、ATP酶的活力，改善脑部能量供应，减轻脑组织损伤；降低脑组织中LD、NOS活力和NO、MDA水平，以及IL-1β、ICAM-1、VcAM-1、TNF-α、NSE、MPO、S-100β蛋白的含量；降低死亡率；改善神经功能缺失评分；保护大脑皮质及海马区免受缺血再灌注引起的脑损伤。

3.4 心肌细胞保护活性

李建红将100只雄性BALB/c小鼠随机分为正常对照组，模型组，利巴韦林组和蒲公英总黄酮低、中、高剂量组，模型组和给药组小鼠腹腔接种CVB3病毒，观察蒲公英总黄酮对模型鼠生存率的影响，结果表明：蒲公英总黄酮能有效抑制病毒性心肌炎和小鼠心肌细胞凋亡。

参考文献

[1] 赵惠茹，马姣姣，魏彩霞，等.大孔吸附树脂分离纯化蒲公英中总黄酮的工艺研究[J].中国药业，2014（12）：81-83.

[2] 卫建琮，李华峰，乔华.中药蒲公英花中总黄酮的分离纯化研究[J].中国药物与临床，2014，14（1）：19-21.

[3] 杨锐杰，乔华，刘文，等.中药蒲公英花体外抗氧化活性部位研究[J].中国药物与临床，2016，16（1）：9-11.

[4] 蒋喜巧.蒲公英总黄酮对脑缺血模型的干预作用研究[D].郑州：河南中医学院，2015.